Métodos de diagnóstico de laboratorio infección por VIH. Reglas para el diagnóstico de infección por VIH.

Producido por varios métodos diferentes. Parecería que nada es más fácil que identificar esta enfermedad a través de la cerca de sangre, no. Pero no es así. El diagnóstico del VIH realmente puede revelarse de esta manera, pero se realizan diferentes investigaciones por diferentes métodos. Depende en gran medida de cómo se deletrear el tratamiento al paciente, y qué medidas se tomarán posteriormente. Entre los métodos más comunes y altamente eficientes, es costumbre asignar análisis de detección y transferencia inmune. Cada uno de ellos debe ser considerado con más detalle.

Diagnóstico del SIDA: Análisis de detección

El análisis de detección o el método de investigación IFA se utiliza en la etapa inicial del diagnóstico de la infección por VIH. Al desarrollar este método en condiciones de laboratorio, las proteínas del virus se crearon artificialmente. Reaccionan especialmente a los anticuerpos. Los últimos se producen en el cuerpo cuando las células infectadas con terribles dolencias aparecen en ella. Los diagnósticos de laboratorio del VIH en este caso se realizan utilizando enzimas artificiales. Al entrar en la interacción con anticuerpos, están pintados en un determinado color. La tira con el indicador después de que el golpe de sangre se coloca debajo de un aparato especial, con lo que es posible determinar si una persona tiene esta enfermedad o no. Los métodos modernos de diagnóstico de VIH, incluido ELISA hacen posible determinar el hecho de la infección o su ausencia con una alta precisión. Pero, como toda la técnica, el aparato para el análisis de detección tiene un error. Por eso, si es necesario, el análisis es reubicado por el paciente.

Es importante saber que la prueba ELISA es uno de los métodos primeros para determinar la presencia en el cuerpo del virus de la inmunodeficiencia. La infección por VIH es un diagnóstico que es posible identificar solo unas pocas semanas después de la infección. Al ingresar a las células infectadas en la sangre, el sistema inmunológico del cuerpo comienza a resistir activamente. Se desarrollan anticuerpos, que son detectados por el método de estudio de laboratorio después de dos o tres semanas. El diagnóstico precoz de la infección por VIH por la prueba ELISA permite anticuerpos contra el virus del virus de la inmunodeficiencia humana. Esta es su principal diferencia con respecto a otros métodos modernos.

Vale la pena señalar que algunas personas tienen anticuerpos contra esta enfermedad comienzan a producirse en plazos posteriores. Desde el momento de la infección, antes del inicio de este proceso, puede pasar de tres a seis semanas. Es por eso que se recomienda especialistas en el campo de la medicina para someterse a un análisis de detección después de cuatro a cinco semanas después de un contacto sexual sin protección u otras razones por las cuales se puede sospechar el hecho de la infección aleatoria.

Los métodos de diagnóstico de laboratorio de la infección por HIF VIH se han desarrollado durante mucho tiempo. Hasta la fecha, hay cuatro generaciones de pruebas. Los más precisos y efectivos de ellos son aquellos que se desarrollaron por última vez. El diagnóstico de laboratorio de infección por VIH y SIDA utilizando la tercera y cuarta generación de pruebas ELISA se realiza utilizando proteínas y péptidos recombinantes. La sensibilidad de estas pruebas a los anticuerpos generados por el cuerpo es de 92 a 93%. Estamos hablando de métodos de investigación rusos. Los europeos han aprendido a hacer tales pruebas con sensibilidad del 99%.

Los métodos modernos de diagnóstico de laboratorio de infección por hif a base de hif se utilizan no solo para identificar la presencia de la enfermedad. Con la ayuda del análisis de detección, es posible monitorear la propagación del virus de la inmunodeficiencia, así como la cerca del material de prueba antes de tomar sangre de los donantes.

ELISA es un método estándar para diagnosticar la infección por VIH: ¿Cómo se lleva a cabo, por qué da un resultado falso?

Diagnóstico de VIH y SIDA por el procedimiento estándar IFA. La valla de sangre en el paciente está hecha de Viena. Para el análisis de suficientes cinco mililitros del material. Clínico el diagnóstico de tipo VIH 2 y 1 se realiza al menos ocho horas después de las comidas. Los médicos recomiendan perseguirlo por la mañana con el estómago vacío. Los resultados del estudio completo se conocen en dos o tres días. La detección expresa se realiza en menos tiempo. Como regla general, se tarda solo unas horas. Sin embargo, el error en este caso aumenta. Se necesita diagnóstico expreso del VIH en los casos de emergencia, por ejemplo, cuando el paciente necesita una operación urgente. Dicho análisis se lleva a cabo necesariamente antes de las intervenciones quirúrgicas no programadas, porque si el paciente tiene un virus de inmunodeficiencia, los médicos cumplen con el aumento de las medidas de seguridad. El diagnóstico clínico de la infección por VIH en un corto período de tiempo es necesario y, en el caso, cuando la cerca de la sangre del donante debe realizarse rápidamente para rescatar al otro paciente.

Hay casos en que una persona fue diagnosticada con SIDA o VIH, y como resultado no fue confirmado o viceversa. ¿Por qué está sucediendo en el caso de la prueba IFA? El resultado negativo falso puede deberse al hecho de que la sangre estaba preparada para el estudio de manera inapropiada. A veces la causa de la misma se convierte en una ejecución incorrecta de su cerca. Un resultado falso negativo al verificar el diagnóstico de la infección por VIH no se confirma en el caso de que los materiales para el estudio se tomaron demasiado pronto. Después de todo, después de la infección, se deberían sufrir al menos tres semanas. Hay casos en que el resultado de la detección de virus de inmunodeficiencia es falsa positiva. Esto se debe al estado general de los sistemas inmunes y hormonales del cuerpo humano. En la mayoría de los casos, el paciente tiene enfermedades que son consecuencia de un resultado falso positivo. Estamos hablando de hepatitis alcohólica, en la que el hígado produce enzimas especiales, lo que puede causar formulación inadecuada del diagnóstico del VIH. El embarazo y algunas enfermedades autoinmunes, junto con mieloma múltiple, también pueden causar un resultado falso positivo. En esta lista, puede incluir pacientes en diálisis y personas que se encuentran poco antes de que se vacunaron el diagnóstico diferencial del VIH.

Hablando de análisis de detección, es importante tener en cuenta que este método de estudio requiere confirmación. Médicos, antes de diagnosticar el VIH sobre su base, asegúrese de enviar a un paciente a la transferencia inmune.

Métodos básicos de diagnóstico de laboratorio Infección por VIH: inmune Blotting

Los SIDA, diagnósticos y tratamiento de los cuales están estrechamente interrelacionados, se detecta de varias de varias maneras. Como se mencionó anteriormente, una prueba ELISA no es suficiente para determinar finalmente el diagnóstico. El diagnóstico diferencial de la infección por VIH en este caso se complementa con la transferencia inmune. En la medicina moderna, se llama el método de diagnóstico de confirmación final. Para la investigación en este caso, se utilizan proteínas contenidas en la sangre del paciente. Se dividen en un gel especial, después de lo cual los trabajadores de laboratorio tienen la oportunidad de estudiar la composición molecular de la sangre.

El momento del diagnóstico del VIH con este método es de uno a tres días. Para estudiar desde las venas de la prueba, toman sangre, que se coloca en el probador con gel. El resultado que se cuestiona puede ocurrir durante el embarazo, la presencia de procesos oncológicos, la tuberculosis. La reacción falsa negativa a la prueba puede ocurrir con una investigación incorrecta y en caso de que se realice demasiado pronto. Desde el momento de la infección debe haber al menos tres semanas. Después de todo, a qué hora se diagnostica el VIH, depende directamente del estado de inmunidad.

Otros métodos de diagnóstico de SIDA y VIH.

Los métodos de diagnóstico de radiación del SIDA se usan generalmente en etapas terminales o secundarias. Con su ayuda, es posible establecer cambios que ocurran en el cuerpo debido a enfermedades secundarias o infecciones oportunistas.

El diagnóstico de biorresonancia del VIH, que también se denomina escaneo no lineal, para identificar el virus de la inmunodeficiencia se utiliza principalmente en clínicas privadas. La medicina oficial cree que dicho método no es preciso y efectivo. Quizás la mejora de los diagnósticos no lineales en el futuro permitirá identificar este diagnóstico terrible en el período de incubación.

Diagnóstico de la infección por VIH: método serológico y sus características.

Esta es una técnica relativamente nueva en la que los criterios de laboratorio para el diagnóstico de infección por VIH se basan en el principio del anticuerpo antígeno. En el caso del virus de la inmunodeficiencia, el anticuerpo está buscando el virus en el cuerpo humano. Para este propósito, se usa un antígeno derivado artificialmente para reaccionar anticuerpos. Los marcadores serológicos específicos de la infección por VIH causan cambios específicos en la composición de la sangre. Vale la pena señalar que este método de investigación es más efectivo en la etapa aguda, que termina con seroconvers. Sigue el período latente asintomático, durante el cual no es fácil encontrar un antígeno.

Diagnóstico de referencia de la infección por VIH: Descripción y características

Los valores de referencia del VIH se consideran los más precisos en la identificación del diagnóstico. Este método de investigación une la prueba ELISA y la transferencia inmune. El laboratorio de referencia de diagnóstico de VIH permite analizar las pruebas y su procesamiento posterior de dos maneras de dos maneras. Esto permite durante el día obtener el resultado más preciso. La recepción del análisis obtenida en el laboratorio de referencia es necesaria solo si la prueba ELISA y la transferencia inmune se contradicen entre sí. Este es un fenómeno bastante raro que ocurre con mayor frecuencia en las personas con las enfermedades concomitantes descritas anteriormente.

El diagnóstico del VIH es una de las tareas primordiales que enfrentan a los trabajadores del dispensario de la piel venereológica, así como a los empleados de la clínica.

La enfermedad se caracteriza por los médicos, como muy astutos. Se caracteriza por el flujo crónico y no es susceptible al tratamiento completo. Es importante identificar de manera oportuna para tomar el control y prevenir la distribución incontrolada. Qué características del virus de la inmunodeficiencia humana, y cómo pueden infectarse, los pacientes a menudo están interesados.

¿Cuáles son las formas de diagnosticar la enfermedad, y qué signos le permiten sospechar la infección?

Hoy en día, puede escuchar de todas partes sobre la peligrosa infección por VIH. Sin embargo, pocos explica qué es este peligro. Como resultado, los pacientes poseen un conjunto incompleto de información y, como resultado, no percibe en serio la amenaza. Pero el VIH es extremadamente peligroso. Se refiere a enfermedades virales lentamente progresivas, inclinadas al flujo crónico. Se sorprende de esta patología principalmente el sistema inmunológico.

Los médicos llaman la atención de los pacientes al hecho de que la muerte no proviene del propio virus de la inmunodeficiencia, como tal.

Una persona muere a partir de infecciones concomitantes para garantizar una protección completa contra la cual el cuerpo ya no es capaz. También la causa de la muerte se convierte en tumores de cáncer, con los cuales la inmunidad reducida no puede luchar.

De hecho, el mecanismo de exposición a la infección por VIH en el sistema inmunológico es bastante complicado. Según los médicos, los pacientes no lo entienden necesariamente a fondo. Es suficiente saber que la enfermedad puede reducir el nivel de inmunidad a los valores críticos. Como resultado, el cuerpo no podrá defenderse de diversas influencias desde el exterior, lo que conducirá a la muerte antes o más tarde.

Como se produce la infección.

Es importante entender que la infección por VIH está rodeada por una gran cantidad de una amplia variedad de mitos.

Los pacientes están muy mal informados sobre qué casos puede infectarse, y cuando la salud está fuera de peligro.

Lo primero que se debe recordar es que el VIH se caracteriza por una inestabilidad muy fuerte en el medio ambiente. Esto significa que el microorganismo patógeno es capaz de vivir completamente en el cuerpo humano. No tolera el calentamiento de más de 50 grados (muere al instante). Tampoco es capaz de soportar procesos de secado. No todos los fluidos corporales contienen una cantidad suficiente de virus para ser infectados.

El mayor peligro representa:

• sangre;
• preyacular
• esperma;
• selección de la vagina femenina;
• linfa;
• la leche materna.

Si alguno de estos líquidos está en contacto con las membranas mucosas, en las que se produce microtraumas, o con lesiones afectadas por la piel, se produce una infección.

También es posible si el líquido extranjero cae directamente en el torrente sanguíneo. Saliva y lágrimas, contrarias a la creencia popular, las amenazas no representan. Debido a las características del virus y su baja supervivencia, se transmite de varias maneras:

• manera sexual es decir. con contactos sexuales sin protección que implican inevitablemente el contacto de los fluidos biológicos y susceptibles al patógeno de las membranas mucosas del cuerpo;
• patrimonio parenteral es decir. transferencia de virus con sangre al desbordarse o debido al uso de herramientas médicas no estériles;
• camino vertical es decir. De la madre al niño (hoy, si una mujer toma terapia antirretroviral y rechaza la lactancia, la probabilidad de infección infantil en el parto se minimiza).

Es importante entender que, si por infección a través de la piel de la microtraum o las heridas abiertas son obligatorias, entonces no es necesario para la infección a través de la membrana mucosa. La diferencia se explica por el hecho de que las membranas mucosas y la cubierta de la piel del cuerpo humano tienen una estructura completamente diferente. Esta diferencia debe ser considerada.

Por qué signos sospechan el VIH.

Muchos pacientes están interesados \u200b\u200ben la pregunta de qué signos generalmente se pueden sospechar de infección con el virus de la inmunodeficiencia humana.

• aumento irrazonable en la temperatura del tipo del sistema, que no puede explicarse por ninguna otra infección, y que se conserva durante mucho tiempo, a pesar de las medidas tomadas para tratar;
• un fuerte aumento en los ganglios linfáticos en tamaño (sufrir nodos principalmente en el área de la ingle, pero su participación en todo el cuerpo es posible);

• una fuerte disminución en el peso corporal, que no se puede explicar por dietas, estrés, fallas hormonales y otras razones;
• quejas sobre trastornos del Presidente, que persiguen al paciente durante mucho tiempo, y encuentran la razón por la que aparecieron no se pueden encontrar;
• una pronunciada tendencia a la transición de cualquier enfermedad infecciosa en formas crónicas, y la naturaleza del patógeno no importa, se croniza tanto las patologías bacterianas como las virales;
• las enfermedades se están desarrollando provocadas por una microflora patógena condicionada, que no plantea una amenaza para una persona cuya inmunidad está funcionando completamente (por ejemplo, micoplasmosis, ureaglasmosis, candidiasis, etc.).

La clínica del VIH es muy inespecífica, ya que los médicos dicen. Debido a esto, a menudo se plantean dificultades con el diagnóstico. Muchos pacientes ignoran los síntomas alarmantes en absoluto, prefiriendo no buscar atención médica. Incluso si la enfermedad afecta firmemente su salud general.

Es importante entender que la infección por VIH durante mucho tiempo puede no poder saber sobre sí mismo. Y cuando aparezcan los primeros signos, una persona puede ni siquiera puede asociarlos con la posibilidad de su infección y hacer intentos de ser tratados en casa.

Métodos de diagnóstico.

Los diagnósticos de laboratorio del VIH se han desarrollado durante mucho tiempo y se utilizan con éxito para diagnosticar esta enfermedad peligrosa.

La enfermedad no se puede identificar solo por los síntomas. Por lo tanto, la confirmación del diagnóstico sobre la base de las técnicas de laboratorio a menudo desempeña un papel decisivo.

Hay varios métodos para diagnosticar el VIH. En Rusia, en primer lugar, se da preferencia a la transacción inmune, así como las reacciones de IFA. Estos métodos se utilizan a menudo como la detección, por ejemplo, al verificar el personal médico.

Ifa sistemas

A menudo, los pacientes le piden a sus médicos, con qué método vale la pena comenzar una búsqueda de diagnóstico en una infección sospechosa con un virus de inmunodeficiencia humana.

Cualquier médico competente dirá que se debe dar preferencia al análisis inmununal. Es esta técnica en Rusia la que es la primera etapa de diagnóstico.

El principio de operación de la IFA es simple. En el laboratorio, los médicos crearon proteínas especiales. Son capaces de detectar anticuerpos generados por el cuerpo en respuesta al contacto con el VIH, e interactuar con ellos. Luego se agrega el indicador de enzimas especiales al sistema, que cambia su color. En la etapa final, el material se procesa con la ayuda de una máquina especial, y el médico recibe un resultado final.

Elisa es muy popular.

En primer lugar, debido al hecho de que es posible obtener resultados, incluso si la Patogenne ha pasado no más de unas pocas semanas desde la introducción del patógeno.

Es importante entender que un análisis inmunoamenimal determina que no sea el virus en la sangre, sino los anticuerpos.

Para muchas personas, pueden comenzar a producirse más tarde que en dos semanas, debido a que el resultado puede ser erróneo. Hay varias generaciones de pruebas de IFA.

Las más modernas y de alta precisión son las que pertenecen a 3 y 4 generaciones. Los médicos señalan que es mejor, si hay una opción, para dar preferencia a los reactivos europeos, ya que su precisión alcanza el 99%. Los plazos para obtener los resultados de la ELISA están en promedio de 2 a 10 días.

¿Por qué un HYF puede ser falso?

Es importante comprender que un análisis de inmunofermento puede dar resultados falsos positivos y falsos negativos. Aunque el riesgo de tales desarrollos es extremadamente pequeño.

Resultados negativos falsos El paciente puede obtener si el análisis se tomó demasiado pronto, y los anticuerpos aún no han tenido tiempo para formarse en el cuerpo.

Para excluir una reacción similar, se recomienda a los pacientes que realicen el análisis varias veces con un intervalo diferente.

La prueba falsa positiva se encuentra en algunas enfermedades. Por ejemplo, pacientes con:

• hepatitis alcohol;
• meloms en grandes cantidades;
• algunas enfermedades autoinmunes;
• mujeres durante el embarazo y otros.

Con tales enfermedades, la sangre de una persona se llena de anticuerpos. Pueden parecerse a una estructura de anticuerpos al VIH, que introduce reactivos en confusión, provocando la reacción. Por supuesto, en los últimos años, los sistemas de prueba son cada vez más sensibles. Sin embargo, hasta el final para resolver el problema de los resultados falsos falló.

Inmunoteca

En las condiciones modernas, ponen un diagnóstico positivo del VIH, confiando solo en ELISA, es imposible. Es necesario confirmar los resultados obtenidos, que se realiza utilizando la reacción de la transferencia inmune (inmunotransferencia, IB).

Para realizar IB, las tiras de prueba especiales deben estar presentes en el laboratorio. Se aplican proteínas virales aplicadas. Antes de realizar el análisis, la sangre de un paciente, tomada de la vena, se prepara de una manera especial.

El material biológico resultante se añade al gel, en el que las proteínas están separadas por peso. Luego, la banda pre-cosechada se reduce en la masa resultante.

Los controles de la banda (transferencia), se detectan rayas si hay proteínas de infección por VIH en el material. Si faltan las proteínas, la humectación no cambia la apariencia de la tira.

Hay varias interpretaciones de inmunotransferencia. Sin embargo, de acuerdo con cualquier método, un hospital o laboratorio específico no realizó la decodificación, la probabilidad de la exactitud del diagnóstico es del 99.9%.

¿Puede la inmunoteca dar resultados incorrectos, a menudo los pacientes están interesados? Sí, es posible, por ejemplo, si el paciente está enfermo de la tuberculosis, está en un estado de embarazo, sufre de oncología.

PCR para ayudar

La PCR es otro método que puede diagnosticar un virus de inmunodeficiencia humana en la sangre y otros fluidos biológicos, donde su concentración es lo suficientemente alta.

Según los médicos, la reacción en cadena de la polimerasa puede dar un resultado positivo después de 10 días después de que ocurrió el primer contacto del cuerpo con infección.

Es importante entender que la PCR en algunos casos da resultados falsos positivos. Esto se explica por el hecho de que el método tiene una sensibilidad muy alta.

Como resultado, a menudo reacciona a anticuerpos similares, testificando a procesos patológicos completamente diferentes en el cuerpo del paciente.

A pesar de la alta sensibilidad y la baja probabilidad de obtener resultados falsos, la PCR no se usa en todas partes. Esto se explica por varios factores. Primero, requiere un equipo especial para realizar una reacción en cadena de la polimerasa, el precio es bastante grande. En segundo lugar, el personal que trabaja con equipo debe tener una alta calificación que también puede causar dificultades. Estas características en el complejo hacen que la PCR sea costosa de diagnóstico y, como resultado, no todos disponibles.

A pesar del hecho de que la PCR no es un método de detección, se usa, por ejemplo, para probar el recién nacido a la infección con el virus de la inmunodeficiencia humana.

Sistema expreso para diagnósticos.

Los médicos y los científicos han pasado muchos esfuerzos para crear pruebas expresas para evaluar la infección de la infección por VIH. Según los médicos, al usar estos sistemas, existe la oportunidad de obtener el resultado 15 minutos después de que se realizó la prueba.

Las pruebas expresas para el VIH se basan en el principio de inmunocromatografía. El sistema generalmente incluye una tira impregnada con reactivos especiales.

La tarea del paciente es aplicar sangre, espermatozoides o cualquier otro fluido biológico, en el que se pueden contar los anticuerpos contra el virus.

Si se detectan, entonces aparecerán dos rayas de color en la tira, una de las cuales es el control y el otro diagnóstico. Si no se detecta, solo aparecerá la barra de control.

Es importante entender que las pruebas expresas no otorgan garantías al 100% de que una persona no está infectada o, por el contrario, está infectada con la infección por VIH. En cualquier caso, los resultados obtenidos con su ayuda deben ser confirmados en el laboratorio utilizando inmunotransferencia.

TRANS-SYSTEMS Express Type son convenientes para los pacientes que desean calmarse en casa. Sin embargo, como dicen los médicos, incluso si con su ayuda, una persona recibió un resultado negativo, con sospechas de cambios negativos en el cuerpo aún los costos para ver a un médico.

A lo que el médico se pone en contacto con la presunta infección.

Se les pregunta a muchos pacientes sobre cómo el médico se pone en contacto si hay una sospecha de infección por VIH. En primer lugar, se recomienda visitar al médico del venereólogo. Es este trabajador médico quien se especializa en enfermedades que pueden transmitirse de una persona al sexo humano.

Un venereólogo podrá realizar una inspección competente, recolectar anamnesis y tomar una decisión sobre qué encuestas son necesarias para el paciente con un diagnóstico preciso. A su discreción, también puede enviar a un paciente a un hospital infeccioso. Especialmente en caso de que todavía sospecha el VIH.

El virus de la inmunodeficiencia humana es una enfermedad común. Para enfrentarlo, alguien puede liderar la vida sexual activa.

El conocimiento de las características de la distribución y el diagnóstico de esta enfermedad en las realidades modernas es vital si el paciente quiere preservar su salud y longevidad. ¡Solo la apelación oportuna al médico permitirá tomar una infección bajo control y proteger contra ella!

Diagnóstico clínico y de laboratorio de infección por VIH. Tiene tres direcciones:

1. Estableciendo el hecho infectado con el VIH, el diagnóstico de la infección por VIH.
2. Determinar la etapa del curso clínico de la enfermedad e identificar enfermedades secundarias.
3. Previsión de la progresión del curso clínico de la enfermedad, control de laboratorio de la efectividad del tratamiento y efectos secundarios de los medicamentos antirretrovirales.

1. Establecimiento de la infección del VIH, diagnóstico de la infección por VIH.

Los siguientes indicadores específicos se utilizan para determinar la infección por VIH: anticuerpos contra el VIH, los antígenos del VIH, el ARN del VIH y los proveedores de ADN. Los anticuerpos contra el VIH están determinados por el método de análisis de inmunoensayo (ELISA) o inmunotransporte, que es esencialmente un tipo de ELISA. Los antígenos (proteínas) VIH están determinados por el método IFA. Con la ayuda de los métodos genéticos moleculares de la reacción de la cadena de la polimerasa (PNRR) y BDNA, se puede determinar el ARN del VIH y el ADN del Provirus. El uso de métodos adicionales para la hibridación de ácidos nucleicos con sondas específicas de ADN permite probar la especificidad de las secuencias de ADN obtenidas durante la PCR. La sensibilidad de la PCR es la detección de genes virales en una de las cinco mil células.

En la infección primaria, se observan la siguiente dinámica de los marcadores de VIH en la sangre infectada. En el primer mes, como resultado de la activación del proceso replicativo, se produce un fuerte aumento de la carga viral (contenido del ARN del VIH en plasma), luego debido a la difusión del virus y la infección masiva de las células diana en la sangre y Nodos linfáticos, se hace posible determinar el ADN proviral. Un valor de diagnóstico primario es el hecho de detectar un ADN provisional integrado en el genoma de la célula objetivo.

La carga viral refleja la intensidad del proceso replicativo en células infectadas. Durante el período de infección primaria, el nivel de carga viral es diferente cuando se infecta con diferentes subtipos de VIH, sin embargo, la dinámica de sus cambios es aproximadamente la misma. Entonces, cuando la infección con el subtipo en, por ejemplo, si en el primer mes después de la infección, el valor de la carga viral es de 700 copias / ml, entonces, en el segundo mes, hay una disminución a 600, en el 3er a 100. , en las copias 4º a 50 / ml. Dicha dinámica se observa contra los antecedentes del aumento del contenido de la sangre de los anticuerpos específicos al VIH. El contenido del ADN inclinado en el infectado por VIH mononucleares de sangre se caracteriza por una constancia relativa durante los primeros 6 meses con fluctuaciones menores en algunos subtipos. Por lo tanto, las cargas ARN y ADN no son idénticas.

En la etapa de incubación durante algún tiempo, se producen los anticuerpos específicos al VIH en una cantidad suficiente para determinar los métodos de laboratorio existentes. Antes del registro de los anticuerpos, se observa un tiempo muy corto en la sangre de la proteína NE, que reprime el proceso replicativo y la proteína estructural P24. El antígeno P24 se puede detectar en la sangre mediante análisis inmérmopamental, después de 1-2 pedal después de la infección y se determina hasta la octava semana, entonces su contenido disminuye considerablemente. Además, en el curso clínico de la infección por VIH, se observa el segundo levantamiento del contenido de la sangre de la proteína P24. Cae por el período de formación del SIDA. La desaparición en la sangre de la sangre libre (no vinculada por los anticuerpos), las proteínas núcidas P24 y la aparición de anticuerpos específicos a las proteínas del VIH marcaron la aparición de seroconversión (Fig. 9.6).

Viryia y Antigenemia causan la formación de anticuerpos específicos de clase IgM (anti-P24, anti-GR41, anti-GR120, anti-GR160). Puede aparecer anticuerpos de IgM gratuitos y IgG IgG a la proteína P24, a partir de la 2ª semana, su contenido aumenta dentro de 2 a 4 semanas, alcanzando un cierto nivel en el que se almacena durante meses (IgM) y años (IgG) (Fig.) 9.7).

La aparición de la seroconversión completa, cuando se registra en la sangre periférica, se registra un alto nivel de anticuerpos de clase IgG SPEX a las proteínas estructurales del VIH P24, GP41, GP120, GR160, facilita significativamente el diagnóstico de la infección por VIH. Los anticuerpos contra el VIH aparecen en 90-95% infectados durante 3 meses después de la infección, en 5-9%, en el período de 3 a 6 meses desde el momento de la infección y en 0,5-1% en los plazos posteriores.

A pesar del hecho de que los anticuerpos contra el VIH aparecen por última vez, el principal indicador de diagnóstico de laboratorio al presente es la detección de anticuerpos específicos por el Método ELISA e Inmunobloting.

Los datos presentados en la Tabla 9.2. [show] y 9.3. [show] Esto demuestra claramente la alta sensibilidad de los sistemas de prueba de inmunoodheraperapia modernos al determinar los anticuerpos contra el VIH, superior a la sensibilidad de la inmunoteca. En algunos casos, al recibir un resultado positivo principal en ELISA, es posible confirmarlo en inmunotransferencia solo después de 2 a 3 semanas.

Al examinar a los pacientes con infección por VIH (infectados por el VIH) utilizando los sistemas de prueba de las empresas líderes de inmunocublación en todos los casos, se detectan anticuerpos a GP160 y P24 / 25, a otras proteínas de los anticuerpos, en 38.8-93.3% de los casos (Tabla. 9.4. [show] ).

Las dificultades con la detección de anticuerpos en pacientes con infección por VIH pueden ocurrir durante períodos de viremia masiva y antígena, cuando los anticuerpos específicos disponibles en la sangre se asocian con partículas virales, y el proceso replicativo está por delante de la producción de nuevos anticuerpos antivirales. Dicha situación puede ocurrir y desaparecer durante el proceso infeccioso.

En pacientes con un sistema inmunológico inicialmente debilitado, la viremia y la antigenemia aparecen anteriormente y se conservan a un nivel alto antes de la enfermedad. En tales pacientes, existe un bajo contenido de anticuerpos gratuitos al VIH, debido a dos razones: productos insuficientes de anticuerpos en linfocitos y unión de anticuerpos por viriones y proteínas de VIH solubles, por lo tanto, sistemas de prueba con mayor sensibilidad o modificación de los métodos de análisis. Se requieren, proporcionando la fase de liberación de anticuerpos a partir de complejos inmunes.

La reducción más a menudo en el contenido de los anticuerpos al VIH a las razones especificadas se produce en la etapa terminal, cuando los anticuerpos contra el VIH en suero Croweim no se pueden capturar utilizando los métodos de análisis inmununimal, ni el método imumumoblet (Western Blot). Además de la aparición de anticuerpos específicos al VIH, la respuesta inmune en los primeros 4 meses se caracteriza por una disminución en el contenido de la sangre de un CD4 + infectado y un aumento en CD8 + -cells. A continuación, el contenido de los receptores de CD4 y CD8 que transporta celdas se estabiliza y permanece sin cambios durante algún tiempo. Un aumento en el contenido de los linfocitos CD8 es una reacción protectora, porque La tipotoxicidad dependiente de la célula se implementa con CD8 + -limphocytes, que están dirigidos a la destrucción de las células infectadas por el VPH. Inicialmente, los linfocitos citotóxicos (CTL) reaccionan a la proteína reguladora del virus NEF, que desempeña un papel importante en la reducción de la carga viral (ARN) en el plasma del infectado por el VIH en los primeros meses. Luego se forma la respuesta de CTL y a otros, incl. Las proteínas estructurales, del VIH, lo que resulta en 12 meses después de la infección, el efecto zpotoxico aumenta significativamente.

Diagnóstico de laboratorio Diagramas de infección por VIH

Teniendo en cuenta la dinámica de marcadores de infección por VIH específicos en la práctica, es recomendable adherirse a los siguientes esquemas de diagnóstico de laboratorio en adultos (Fig. 9.8-9.10).

Los esquemas reflejan las tres fases principales del diagnóstico de laboratorio primario de la infección por VIH:

1. Poner en pantalla.
2. Referencia.
3. Experto.

La necesidad de varias etapas de diagnóstico de laboratorio se debe principalmente a consideraciones económicas. Por ejemplo, el costo del método de inmunotransferencia con la ayuda de los sistemas de prueba nacionales de un estudio de expertos es de hasta $ 40, la selección (método IFA) es de aproximadamente 0,2, es decir, la relación es 1: 200.

En la primera etapa (Fig. 9.8), las encuestas se determinan mediante la definición de anticuerpos contra el VIH con un solo sistema de prueba de inmunoensayo diseñado para detectar anticuerpos a ambos tipos de virus - VIH-1 y VIH-2.

Los fabricantes en los sistemas de prueba propuestos, lisado viral, proteínas recombinantes, péptidos sintéticos se utilizan como base antígeno. Cada uno de los portadores enumerados del VIH determinantes antigénicos tiene sus propias ventajas y desventajas. Por lo tanto, al elegir los sistemas de prueba de aproximadamente el mismo costo, debe preferir conjuntos con la mayor sensibilidad (preferiblemente el 100%). Entre los sistemas de prueba del mismo costo y sensibilidad, es recomendable detenerse en tener la máxima especificidad.

Basado en el lisado de virus, se crearon los primeros sistemas de prueba para el diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH. En la década de 1980, dichos sistemas de prueba se caracterizaron por una sensibilidad de menos del 100% y una especificidad baja manifestada por una gran cantidad (hasta un 60%) de resultados falsos positivos.

En la formación del virión en la cultura de los linfocitos, su cáscara se crea a partir de la membrana externa y, por lo tanto, contiene antígenos de las principales clases complejas de histocompatibilidad I y II. Esta circunstancia determina las reacciones falsas positivas si los anticuerpos contra la histocompatibilidad alichánica están presentes en la sangre de los pacientes.

Más tarde, para obtener un virus, se propuso utilizar la cultura de los macrófagos, en los que las partículas virales se forman principalmente intracelularmente al tipo no desde la membrana externa de la célula, sino de las membranas del retículo endoplásmico. Dicha tecnología ha reducido el número de resultados falsos positivos.

Algunos de los mejores en las características más importantes: la sensibilidad y la especificidad: las enzimas se reconocen como una combinación de lisado viral purificado con péptidos sintéticos, que representan los segmentos más antigenos de las proteínas de virus, o proteínas recombinantes.

La sensibilidad del sistema de prueba también depende de las características de otros componentes de los conjuntos. Por lo tanto, los sistemas de prueba que utilizan conjugados que reconocen los anticuerpos, no solo de clase IgG, sino también IgM, y IgA, le permiten identificar una fase anterior de seroconversión. El uso de los sistemas de prueba es prometedor, con el que puede determinar simultáneamente los anticuerpos antivirales y el antígeno P24, lo que hace que los diagnósticos de laboratorio más tempranos de la infección por VIH.

El resultado positivo principal debe ser rechazado por reexaminar la muestra en el mismo sistema de prueba, pero preferiblemente otra serie y otro asistente de laboratorio. Si se obtuvo un resultado negativo durante el reexaminamiento, el estudio se realiza por tercera vez.

Después de confirmar el resultado positivo, es deseable volver a instalar la sangre y explorarla sobre los anticuerpos contra el VIH como primaria. La sangre repetida le permite evitar el error debido a la inexactitud del etiquetado de los tubos y completar las formas de direcciones.

La etapa seropositiva seropogénica se envía a los estudios de referencia realizados utilizando dos o tres sistemas de prueba IFA altamente específicos. En el caso de dos resultados positivos, un estudio experto se lleva a cabo por inmunotransferencia.

La aplicación en los diagnósticos de referencia de los sistemas de prueba de Immunoopimen, con los que puede diferenciar anticuerpos específicos al VIH-1 y el VIH-2, facilita el trabajo adicional y le permite investigar una muestra positiva en la etapa de expertos inmediatamente usando la inmunoteca apropiada (VIH-1 o VIH-2).

La opinión de expertos en laboratorio sobre la infección por VIH se realiza solo sobre la base del resultado positivo de la inmunotransferencia (Western Blot). Al realizar diagnósticos de expertos, es necesario utilizar la nomenclatura de genes genéticos y VIH propuestos en 1990 (Tabla 9.5 [show] ).

La especificidad de las bandas de inmunotrablot debe evaluarse con mucho cuidado y cuidadosamente el uso de los resultados de la prueba del suero (positivo y negativo), que se llevan a cabo en paralelo con el estudio de las muestras experimentales y la muestra de inmunotranse con la designación de proteínas VIH. (Adjunto por el fabricante al sistema de prueba). La interpretación de los resultados obtenidos debe llevarse a cabo de acuerdo con las instrucciones adjuntas al sistema de prueba. Como regla general, el criterio de positividad es la presencia obligatoria de anticuerpos a dos proteínas (predecesor, externa o transmembrana), codificada por el gen ENV, y la posible presencia de anticuerpos a los productos de otros dos genes de VIH estructurales - GAG y POL (Tabla 9.6 [show] ).

En caso de un resultado dudoso, es necesario disfrutar de la lista de recomendaciones para la aclaración final de los resultados de la inmunoteca (Tabla 9.7 [show] ).

Sobre las recomendaciones del Centro Científico y Metodológico ruso para la prevención y el control del SIDA, el resultado es positivo en presencia de anticuerpos al menos una de las proteínas GP41, GP120 en combinación con anticuerpos a otras proteínas específicas del VIH-1 o sin anticuerpos. Estas recomendaciones se realizan en la base de la experiencia de trabajar con sueros de niños de los focos hospitalarios, que a menudo definían anticuerpos solo a una de las proteínas de la cáscara de virus.

La parte principal de los pacientes seropositivos encuestados primarios se relaciona con la fase de la linfadenopatía generalizada persistente (PGL) oa la fase asintomática. Por lo tanto, en inmunotoblo (tira nitrocelulósica, sobre la cual se determina las proteínas del VIH), como regla general, la siguiente combinación de anticuerpos a VIH-1: anticuerpos a las proteínas de la cáscara GP160, GP120 y GP41, codificadas por el genoma ENV, en combinación con anticuerpos a las proteínas núcleas P24 (proteína la nucleocápside, codificada por el genoma de la gag) y P31 / 34 (endonucleasa, codificada por el genoma POP).

Las reacciones positivas solo con gag y / o proteínas RL pueden ocurrir en el caso de una fase temprana de seroconversión, así como indicar una infección causada por el VIH-2, o una reacción no específica.

En caso de obtener un resultado dudoso, el uso de diversas técnicas metodológicas se puede aclarar por el hecho de la infección por VIH.

Dependiendo de las capacidades técnicas (la presencia de conjuntos de diagnóstico y reactivos, el equipo de equipos especiales y capacitación del personal), un laboratorio experto realiza estudios de diagnóstico adicionales (Fig. 9.10).

En algunos casos, es aconsejable utilizar métodos genéticos moleculares, lo que permite determinar las secuencias genéticas del VIH en suero, en los linfocitos sanguíneos o los nodos de LEMPH. La verificación de la especificidad de las secuencias de ADN obtenida como resultado de la PCR se puede llevar a cabo mediante hibridación de ácidos nucleicos con sondas específicas de ADN.

Los métodos de radioinmunoprecipitación (RIP) y la inmunofluorescencia indirecta (IFL) también se pueden usar para la verificación final de los suero con resultados dudosos en inmunotransferencia.

La detección del ARN del VIH en el plasma sanguíneo no es un método de alta calidad o cuantitativo no es significativo para el diagnóstico de la infección por VIH. Este resultado debe ser confirmado por métodos estándar, como la inmunoteca, después de 2 a 4 meses después de recibir la respuesta dudosa o negativa principal.

La liberación del VIH en el cultivo celular es la verdad en la última instancia. Sin embargo, el método es complicado, las carreteras y se realiza solo en laboratorios de investigación especialmente equipados.

El contenido de CD4 +: las células en la sangre es un indicador no específico, pero en casos controvertidos (IFA + ", ImmunoBlot" - ", la presencia de signos clínicos de infección por VIH / SIDA), puede usarse como una guía para La adopción de una decisión de expertos. Si el laboratorio tiene la capacidad de realizar solo la inmunoteca, se deben seguir las recomendaciones establecidas en la tabla. 9.7 y en la FIG. 9.9.

Las personas, con una prueba de expertos de suero cuyos resultados dudosos (inciertos), excepto en los casos de detección de anticuerpos solo a P17 (VIH-1) o P16 (VIH-2), deben re-probarse durante 6 meses (después de 3 meses ). En el caso de una verdadera infección por VIH después de 3 a 6 meses, se observa el altavoz "positivo" en el espectro de anticuerpos: formación adicional de anticuerpos a otras proteínas de virus. La falsa reacción se caracteriza por preservar durante mucho tiempo de un patrón dudoso de transferencia inmune o la desaparición de rayas sospechosas. Si, después del período indicado, los resultados de la inmunoteca repetida serán negativos o permanecerán dudosos, entonces, en ausencia de factores de riesgo, síntomas clínicos u otros factores asociados con la infección por VIH, una persona puede considerarse seronegativa para los anticuerpos contra el VIH-1 y VIH-2.

Los resultados falsos positivos debido al contenido de la sangre de los anticuerpos a la histocompatibilidad alloantigénica, que forma parte de la cáscara del VIH, se manifiesta en el inmunotipo en forma de una banda en el nivel GP41 y GP31. Las causas de otras reacciones no específicas (por ejemplo, a P24, que se encuentran a menudo que se encuentran en las personas con procesos autoinmunes) aún no están clarificados.

Mejorar la tecnología de producción de los sistemas de prueba de Immunodermen hizo posible lograr una alta sensibilidad, hasta el 99.99%, mientras que la sensibilidad del método de inmunotransferencia es del 97%. Por lo tanto, el respeto negativo en la inmunoteca en resultados positivos en IFA puede indicar el período inicial de seroconversión, caracterizado por un bajo nivel de anticuerpos específicos. Por lo tanto, es necesario repetir el estudio después de 1,5 a 2 meses., Es decir, el período de tiempo requerido para completar la seroconversión, lograr la concentración de anticuerpos específicos en la sangre suficiente para detectar el método de inmunotransferencia.

Resultado positivo (resultados) del estudio sobre la referencia o solo la etapa de detección del diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH, es decir, un resultado positivo en un sistema de prueba no inmunoginerante, como resultado, no confirmado por métodos de expertos, es interpretado como la presencia en la sangre de los anticuerpos encuestados de respuesta cruzada. Bajo la reacción cruzada implica la unión de áreas no específicas en proteínas o péptidos de VIH utilizados como una base antigénica en el sistema de prueba en el que se obtuvo un resultado positivo.

En ausencia de inmunodeficiencia y signos clínicos de infección por VIH, estas personas se consideran seronegativas con respecto a los anticuerpos contra el VIH y deben interrumpirse.

El diagnóstico final del infeccioso del VIH se establece solo sobre la base de todos los datos clínicos, epidemiológicos y de laboratorio. Informar que el diagnóstico de infección por VIH del paciente es correcto solo asistir a un médico.

El principal método de confirmación de diagnóstico de laboratorio (experto) de la infección por VIH es la inmunoteca. Sin embargo, dada su menor sensibilidad en comparación con la IFA, se han propuesto a una serie de investigadores para usar una combinación de varios sistemas de prueba para la determinación final de la presencia de anticuerpos específicos al VIH. Por ejemplo, G. van der Groen et al. Ofreció una inmunoteca alternativa. Un método para verificar los resultados positivos de la etapa de detección del diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH. Implica el estudio del material en paralelo en tres sistemas de prueba, que se basan en varios métodos de detección de anticuerpos específicos al VIH (varias variantes de EIFA, reacción de aglutinación) utilizando antígeno de diversas naturaleza. Los autores lograron elegir tales combinaciones de sistemas de prueba, el uso cuyo uso proporciona una sensibilidad al 100% de la especificidad de N en comparación con los resultados obtenidos en inmunotransferencia.

La barato de este método de diagnóstico de expertos es una ventaja indudable, pero la falta de información, que específicamente las proteínas de virus tienen anticuerpos en la sangre del paciente, no permite evaluar la especificidad de la reacción en cada caso individual, así como la pista. Cambios en el espectro de anticuerpos en una etapa temprana de seroconversión.

El diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH en niños nacidos de madres infectadas por el VIH tiene sus propias características. Desde el momento del nacimiento durante mucho tiempo (hasta 15 meses) en la sangre de tales niños puede circular anticuerpos maternos al VIH. Las únicas inmunoglobulinas de la clase IgG se penetran a través de la barrera placentaria, por lo que los nmmmpoglobulinos específicos de IgM y IgA de las clases IgM y IgA permiten confirmar la infección, pero el resultado negativo no puede indicar la ausencia de VIH.

En niños menores de 1 mes de 1 mes, la replicación de VPH aún no está aún, y el único método de verificación es PCR. La determinación del antígeno P24 en niños mayores de 1 mes también es un método de confirmación.

La ausencia de anticuerpos contra el VIH en los recién nacidos no significa que el virus no se penetre a través de la barrera placentaria. En cualquier caso, los niños de las madres infectadas por el VIH están sujetas a encuestas de laboratorio y diagnóstico y observación dentro de los 36 meses desde el nacimiento.

Los resultados de los estudios de laboratorio sobre los marcadores del VIH requieren una interpretación cautelosa y deben considerarse solo en total con los datos de los exámenes epidemiológicos y clínicos. Por otro lado, se debe tener en cuenta que a pesar de la alta sensibilidad de los métodos modernos, los resultados negativos de la investigación no pueden eliminar completamente la presencia de la infección por VIH. Por lo tanto, el resultado negativo del estudio, por ejemplo, por inmunotransferencia, solo se puede formular como la ausencia de anticuerpos específicos al VIH-1 y el VIH-2.

Diagnóstico de la infección por VIH en pacientes seronegativos.

La calidad de los sistemas de prueba utilizados en el diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH se mejora cada año, su sensibilidad aumenta. Sin embargo, la alta variabilidad del VIH puede llevar a nuevos tipos, los anticuerpos a los que pueden no ser reconocidos por los sistemas de prueba existentes. Además, hay casos de una respuesta humoral atípica del sistema inmunológico del organismo anfitrión al virus. Entonces, L.Montagnier en 1996 informó que dos pacientes con SIDA, que durante los años anteriores no se han identificado en la sangre de anticuerpos específicos, el diagnóstico se realiza sobre la base de los datos clínicos y se confirma mediante el laboratorio solo para liberar el VPH- 1 en la cultura celular. En tales casos, es necesario utilizar las recomendaciones de la OMS, según las cuales el diagnóstico clínico de la infección por VIH en adultos y niños es posible en presencia de una de las 12 enfermedades indicadoras del SIDA:

1. candidiasis del esófago, tráquea, bronquios, pulmones;
2. criptocococosis extraválica;
3. criptosporidia con diarrea más de un mes;
4. derrota de citomegalovirus de cualquier órgano (excepto tanto para hígado, bazo como ganglios linfáticos en un paciente mayor de 1 mes):
5. la infección causada por un virus de un herpes simple es persistente más de 1 mes en un paciente mayor de 1 mes;
6. linfoma cerebral en paciente menores de 60 años;
7. neumonía intersticial linfocítica en un niño menor de 13 años;
8. infección disimular causada por las bacterias del Grupo Intracelulare de Micobacterium avium o M.Kansassii;
9. neumonía neumática;
10. lEUKO-encefalopatía progresiva de múltiples calificaciones;
11. toxoplasmosis del sistema nervioso central en pacientes mayores de 1 mes.

La presencia de una de estas enfermedades le permite diagnosticar la infección por VIH en ausencia de una prueba de laboratorio de sangre para la presencia de anticuerpos contra el VIH o incluso al recibir un resultado seronegativo.

Una fuente: Diagnóstico de laboratorio médico, programas y algoritmos. Ed. profe. Karpischenko a.i., San Petersburgo, Intermedica, 2001

Las pruebas especiales pueden identificar el SIDA. El proceso de prueba en sí consiste en identificar anticuerpos, que en respuesta a la aparición del virus se producen por el cuerpo. Los métodos de diagnóstico del SIDA de laboratorio incluyen cuatro pruebas que se utilizan para detectar esta enfermedad.

El primer IFA (análisis de inmunoensayo) es el método de diagnóstico más común. Este análisis puede determinar el número de anticuerpos que lograron acumularse en el cuerpo. Esto suele ser posible solo si el virus se metió en el torrente sanguíneo y han pasado tres meses desde ese momento. Como muestra la práctica de los resultados, el uno por ciento de los casos le da un resultado falso negativo o falso positivo.

El resultado falso negativo es posible si los anticuerpos aún no se han desarrollado o si la SIDA está en la etapa terminal, es decir, el virus en la sangre está presente, pero es tanto que los anticuerpos y las células CD-4 son prácticamente ausente. Para asegurarse en el resultado negativo, puede volver a pasar el ELISA, pero solo después de 3 meses.

En la mayoría de los casos, un resultado falso resultado positivo emite una encuesta de pacientes que padecen enfermedades crónicas autoinmunes, infecciosas, oncológicas y otras enfermedades. El resultado falso positivo se puede encontrar en mujeres embarazadas. Por lo tanto, cada resultado positivo se vuelve necesariamente comprobado, pero solo ya está en inmunoblot es una prueba más sensible.

Si el resultado del inmunotransporte es positivo, especialmente después del resultado de la ELISA, la autenticidad es del 99.9%, y esto es para una prueba médica (más que cualquier) precisión máxima.

Segundo - inmunotransporte (lleno. Mandado inmune). Esta prueba identifica la presencia de anticuerpos específicos al VIH. En este caso, el resultado es negativo, positivo, dudoso (también se llama incierto).

El resultado dudoso puede decir que el VIH está presente en el torrente sanguíneo, que el cuerpo aún no ha desarrollado todo el espectro de anticuerpos. En este caso, los anticuerpos contra el VIH en el suero aparecen después de 1-3-6 meses. Uno tras otro, desde el momento del recibo del primer resultado dudoso. Si se confirmaron los resultados, esto indica la infección por VIH en la etapa inicial

El resultado indefinido de esta prueba puede hablar sobre lo contrario. Falta la infección por VIH en sí, pero los anticuerpos similares a los anticuerpos contra el VIH viven en el cuerpo humano. Como regla general, el resultado dudoso se encuentra en mujeres embarazadas, en pacientes con tuberculosis, destinatarios, oncoboles, así como aquellos que han obtenido repetidamente hemotransfus (es decir, transfusión de sangre). El paciente cuyo resultado de esta prueba mostró incertidumbre, es observado por un médico infeccioso durante seis meses y pruebas después de 1-3-6 meses.

Tercera - PCR (reacción en cadena de polimerasa). Este diagnóstico de SIDA le permite determinar el ADN y el ARN del virus. Esta es una reacción bastante sensible y efectiva que permite explorar el ADN para obtener el resultado. En este caso, el ADN es tomado por una célula y se investiga multiplicando las secuencias de ADN características.

Esta prueba se aplica:

• para determinar qué virus está en el cuerpo (sucede el VIH 1 y el VIH-2);
• para determinar la presencia del VIH o su ausencia;
• para determinar y controlar la carga viral;
• para determinar el estado del VIH de un recién nacido, que nació por la madre infectada por el VIH.

Esta prueba tiene una alta sensibilidad: puede detectar el virus, incluso si se pasan alrededor de diez días del presunto momento de la infección. Tal alta sensibilidad de la prueba reacciona a otras infecciones, por lo tanto, a menudo emite resultados falsos positivos. Los resultados de esta prueba no son motivos para el diagnóstico final.

La realización de esta prueba requiere altas calificaciones de personal médico y equipo de laboratorio complejo. Esta es una prueba costosa, por lo que no se aplica en pruebas libres para el VIH.

Cuarto - Prueba expresa. Esta prueba se utiliza principalmente en casos de emergencia, durante el parto, según el testimonio de la vida durante la intervención operativa. El resultado de la prueba expresa generalmente se confirma mediante la prueba de plantillas para el VIH.

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Peor Mejor

La encuesta sobre la infección por VIH está sujeta a:

2. Personas con sospecha o diagnóstico confirmado: infección bacteriana en niños menores de 13 años, múltiples y recurrentes; Candidosis del esófago, tráquea, bronquios o pulmones; Cáncer invasivo cervical; Coccidomicosis diseminada o extractiva; Criptoxococosis de extrapuláticos; criptosporidiosis con diarrea durante 1 mes o más; Lesión de citomegalovirus de otros órganos, excepto hígado, bazo, ganglios linfáticos en pacientes mayores de 1 mes; retinitis de citomegalovirus con pérdida de visión; Infección herpética que causa úlceras de varios calificaciones que no se curan durante 1 mes, o bronquitis, neumonía, esofagitis; Histoplasmosis difundida o extrapilencia; Isospacer con diarrea más de 1 mes; Tuberculosis común o extrapulmonar; Tuberculosis pulmonar en adultos o adolescentes mayores de 13 años; tuberculosis extrapulica; Otras enfermedades causadas por Mycobacteriums, excepto M. tuberculosis difundidos o extrapulosía; neumonía causada por neumaticistas; Leuoentephalopatía multifoxi progresiva; Salmonellus (excepto Salmonella Typhi) de septicemia recurrente; ToxoyLase Mosa Cerebro en niños mayores de 1 mes; Caposhi Sarcoma; neumonía intersticial linfoide en niños menores de 13 años; Linfoma de Berkitta; linfoma inmunotranspuesto; linfoma primario del cerebro; Síndrome de agotamiento, hepatitis B, carro HBsAg; mononucleosis infecciosa; Refugio recurrente herpes en personas mayores de 60 años; enfermedades de transmisión sexual.

En un laboratorio altamente especializado, se lleva a cabo:

a) la determinación de los anticuerpos que circulan en la sangre, los antígenos y los complejos inmunes; cultivo del virus, detectando su material genómico y enzimas;

b) Evaluación de las funciones del sistema inmunológico celular. El papel principal pertenece a los métodos de diagnóstico serológico destinados a determinar los anticuerpos, así como a los antígenos del agente causal en la sangre y otros fluidos biológicos del cuerpo.

Las pruebas de anticuerpos al VIH se realizan para:

a) Seguridad de hemotransfios y trasplantes;

b) vigilancia, pruebas para monitorear los superiores a la infección por VIH y estudiar la dinámica de su prevalencia en una cierta población;

c) Diagnóstico de la infección por VIH, es decir, pruebas voluntarias del suero de personas o pacientes prácticamente sanos con diversos signos clínicos y síntomas similares a la infección por VIH o SIDA.

El sistema de diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH se construye de acuerdo con un principio de tres etapas. La primera etapa es la detección, diseñada para realizar estudios de sangre primarios para la presencia de anticuerpos contra proteínas VIH. La segunda etapa de la referencia: permite utilizar técnicas metodológicas especiales para aclarar (confirmar) el resultado positivo principal obtenido en la etapa de detección. El tercer Ethan es experto, destinado a la verificación final de la presencia y especificidad de los marcadores de VIH identificados en las etapas anteriores de los diagnósticos de laboratorio. La necesidad de varias etapas de diagnóstico de laboratorio se debe principalmente a consideraciones económicas.

En la práctica, se utilizan varias pruebas, lo que permite un grado de precisión suficiente para identificar a las personas infectadas por el VIH:

ELISA (ELISA) -TECTE (análisis de inmunoensayo de fase sólida) Detectando un primer nivel se caracteriza por una gran sensibilidad, aunque menos especificidad en lo siguiente;

Blot inmune (Western-Blot), prueba muy específica y más utilizada, lo que permite diferenciar el VIH-1 y el VIH - 2;

Antigenemia P25-Prueba efectiva en las etapas iniciales de la infección;

Reacción en cadena de polimerasa (PCR).

En los casos de detección de masas de muestras de sangre, se recomienda probar mezclas de sueros del grupo de examinado, compuesto con tal cálculo para que la dilución final de cada muestra no exceda de 1: 100. Si la mezcla del suero resulta ser positiva, se lleva a cabo el estudio de cada suero de la mezcla positiva. Este método no conduce a la pérdida de sensibilidad tanto en ELISA como en inmunotoblo, sino que reduce los costos laborales y el costo de las encuestas primarias en un 60-80%.

En el serodiagnóstico primario de la infección por VIH, los anticuerpos totales se determinan utilizando pruebas de calificación de detección: las reacciones de la IFA y la aglutinación. En la etapa segunda (arbitral), use una prueba más compleja: inmunotransporte, que permite no solo confirmar ni rechazar la conclusión inicial, sino también para hacer esto a nivel de definición de anticuerpos a proteínas de virus individuales.

Ensayo inmunosorbente vinculado (IFA) es el método principal y más utilizado para determinar los anticuerpos contra el VIH. Pero las desventajas del uso de ELISA en serodiagnóstico de infección por VIH deben atribuirse frecuentes resultados falsos positivos. En este sentido, el resultado en el ELISA no es una base para la conclusión sobre la seroposiciabilidad del VIH de los encuestados. Esto se debe a la limpieza insuficiente del inmunosorbente de las proteínas de lastre; Unión espontánea de anticuerpos séricos con plástico, si sus parcelas que no están ocupadas por un inmunoesorbente no se bloquean lo suficiente o no están bloqueadas por una proteína neutra muy especial; Interacción cruzada con proteínas contra el VIH del inmunosorbente de varias proteínas presentes en la sangre de las personas con ciertos procesos patológicos autoinmunes del tipo de esclerosis, LES, tuberculosis; con una donación frecuente, infecciosos y cáncer, quemaduras, embarazo, hemotransfios repetidos, trasplante de órganos, telas, así como personas en hemodiálisis; con la presencia de un factor reumatoide en la sangre, a menudo provocando reacciones de VIH-falso positivo; La presencia de anticuerpos a las proteínas de la mordaza del VIH examinadas en la sangre y principalmente a la proteína P24 (obviamente, los anticuerpos se forman a un retrovirus no identificado endógeno o endógeno. Dado que el anti-P24 se sintetiza en obligatorio en las primeras etapas de la seroconversión de la VIH, se lleva a cabo un mayor monitoreo inmunológico de personas con anticuerpos con proteínas de mordaza por VIH, así como la eliminación de ellos de la donación.

La sensibilidad y especificidad del análisis inmunofermental se están aumentando constantemente. Como resultado, la IFA de la cuarta generación no es inferior en sus capacidades de diagnóstico de la transferencia inmune y se puede usar no solo en la detección, sino también en la etapa de confirmación del diagnóstico de la infección por VIH [Soltskaya T., 1997].

Inmunoteca Es el método final de diagnósticos serológicos, lo que permite realizar la conclusión final sobre la positividad del VIH o la negatividad de los encuestados.

Existe una clara correlación entre los resultados del examen del suero en InmunoBlot y ELISA, dos veces positivo en ELISA con diferentes sistemas de pruebas de suero en el 97-98% de los casos son entonces VIH positivo en inmunotransferencia. Si el suero resultó ser positivo en IFA solo en uno de los dos sistemas de prueba usados, se detectan en inmunoblot positivo solo en el 4% de los casos. En el 5% de los casos, al realizar la confirmación de la investigación en personas con datos positivos, el IFA-inmunobloque puede dar resultados "indefinidos", y entre ellos aproximadamente el 20% de los casos "indefinidos" los resultados causan anticuerpos contra las proteínas de GAG \u200b\u200bde VIH-1 (P55, P25, P18). La presencia de anticuerpos solo a las proteínas de GAG \u200b\u200bde VIH-1 es una razón para una encuesta adicional de suero sanguíneo para la infección por VIH-2.

La evaluación de los resultados de inmunotransferencia se realiza estrictamente de acuerdo con las instrucciones adjuntas al sistema de prueba. En ausencia de instrucciones para la interpretación de los resultados, deben usarse los criterios de los cuales.

Al obtener resultados de investigación positivos en la etapa de referencia del diagnóstico de laboratorio de infección por VIH y el resultado negativo del estudio mediante el método de transferencia inmunitaria, se realiza un diagnóstico de reperto obligatorio después de 6 meses después de la primera encuesta.

Si los resultados de la inmunoteca después de 12 meses después de que el primer estudio de muestra sigue siendo negativo o incierto, entonces, en ausencia de factores de riesgo, los síntomas clínicos u otros factores asociados con la infección por VIH, se examinan de la observación de dispensarios.

Entre los métodos serológicos en el caso de resultados inciertos de inmunobot, utilizados como diagnósticos expertos. Radioinmunoprecipitación (ROTURA). Se basa en el uso de proteínas de virus etiquetadas con el yodo radioactivo, y se detectan precipitados utilizando contadores beta. Las desventajas del método se refieren al alto costo del equipo, la necesidad de equipos para estos propósitos de locales especiales.

Las personas que se diagnostican con infección por VIH están sujetas a una observación dinámica constante con una encuesta obligatoria de laboratorio cada 6 meses.

La reacción en cadena de polimerasa (PCR) revela secuencias de nucleótidos multiplicadas previamente, específicas para el genoma de este patógeno. La multiplicación aislada del gen o su fragmento, llamado amplificación, la PCR hace posible realizar en el tubo utilizando la enzima de ADN polimerasa estable térmica. Durante 2-3 horas, PCR le permite obtener millones de copias de un segmento específico del virus. Cuando la infección por VIH del ARN celular, incluido un ARN de virus, si se reprodució en una célula o se integró en su genoma, utilizando la transcripción inversa y la hibridación con "sondas" marcadas con oligonucleótidos, se obtiene una cantidad suficiente de ADN aburrido, que se detecta. y caracterizado por cuantitativamente con respecto a la pertenencia al gen del VIH, en una etiqueta radiactiva u otra sonda, estableciendo la homología de ADN y las secuencias de aminoácidos específicas de virus. La sensibilidad de la PCR es la detección de genes virales en una de las cinco mil células.

La PCR, incluida la cuantitativa, se puede usar solo para determinar la carga viral plasmática para resolver la cuestión del inicio del tratamiento con medicamentos de un paciente o cambio de fármacos antirretrovirales. La PCR no se puede recomendar para el diagnóstico de la infección por VIH, ya que incluso los métodos más ultra modernos de su formulación y reactivos le permiten determinar la carga viral al menos una cierta cantidad de copias / 50 ml. Y la complejidad de la producción de PCR y su alto costo (alrededor de $ 200) reduce su uso a gran escala como un método de diagnóstico de laboratorio diario de infección por VIH. Por lo tanto, la PCR permanece indispensable solo para estimar la carga viral plasmática en pacientes con un diagnóstico ya establecido de infección por VIH para resolver el problema de la terapia del paciente.

Esquemáticamente, las etapas de los diagnósticos de laboratorio de la infección por VIH se presentan en la FIG. uno.

Higo. 1. Etapas de diagnóstico de laboratorio de infección por VIH.

Durante la infección por VIH, hay un período de "ventana de laboratorio oscuro" cuando el número de anticuerpos contra el VIH es insuficiente para la sensibilidad de los sistemas de prueba. Este período varía de una semana a tres meses desde el momento de la infección del VIH, dependiendo del nivel de sensibilidad del sistema de prueba. Con este fenómeno, existen dificultades en el examen de la sangre de los donantes de personas que están en el mencionado período de infección por VIH. Por lo tanto, en la mayoría de los países del mundo, se ha introducido un sistema de uso de la sangre solo después de su almacenamiento durante 3 a 6 meses para implementar un reexamen obligatorio sobre las dosis de marcación contra el VIH de la sangre y sus componentes.

La etapa de manifestaciones primarias se caracteriza por la actividad del proceso replicativo. La corrección de la viremia y la antigenemia causan la formación de anticuerpos específicos de clase IgM: Anti-P24, anti GP41, anti GP120. El antígeno P24 en parte de las piezas infectadas se puede detectar en la sangre del método IFA después de 2 semanas después de la infección y se determina a la octava semana. A continuación, en el curso clínico de la infección por VIH, se observa el segundo levantamiento del contenido de la sangre de la proteína P24 para el período de formación de la etapa del SIDA.

La aparición de la seroconversión completa, cuando en la sangre periférica se registra un alto nivel de anticuerpos de clase IgG específicos a las proteínas estructurales del VIH GP41, P24, GPL20, facilita significativamente el diagnóstico de la infección por VIH. La mayoría de los conjuntos comerciales están diseñados para indicar exactamente tales anticuerpos.

Las dificultades con la detección de anticuerpos en pacientes con infección por VIH pueden ocurrir durante los períodos de viremia masiva y la antigenemia, cuando los anticuerpos específicos disponibles en la sangre se consumen para la unión de las partículas virales, y el proceso replicativo está por delante de la operación de nuevos antivirales. anticuerpos.

En las personas con un sistema inmunológico debilitado por el seno, la viremia y la antigenemia aparecen anteriormente y se conservan a un alto nivel antes de la enfermedad. Al mismo tiempo, estos pacientes tienen un bajo contenido de anticuerpos gratuitos al VIH, debido a dos razones: productos insuficientes de anticuerpo en linfocitos y anticuerpos de unión de viriones y proteínas de VIH soluble, por lo tanto, sistemas de prueba con mayor sensibilidad o modificación del análisis. Se requieren métodos para determinar la infección. Lanzamiento de la etapa de anticuerpos de complejos inmunes.

A pesar de la abundancia de marcadores de VIH específicos, la más a menudo determinada es la presencia de anticuerpos totales a las proteínas del VIH. El término "total" implica la presencia de dos clases de anticuerpos (IgG e IgM) y una amplia gama de anticuerpos a diversos, principalmente a las proteínas estructurales y del VIH.

Definición de células CD4. El principal indicador clínico y de laboratorio del diagnóstico de la etapa de infección por VIH, el grado de destrucción del sistema inmunológico en pacientes en la vida cotidiana fue la definición del contenido de CD4 + Limfocitos: una disminución en el nivel inferior a 200 células / MM3 es El principal criterio para el diagnóstico de SIDA. Se cree que todas las personas infectadas por el VIH con la cantidad de CD4 + -Limphocytes 200 células / MM3 y por debajo necesitan tanto en terapia antiviral como en la prevención de la neumonía neumática. Y aunque 1/3 del infectado por VIH con la cantidad de C04 + -limphocytes es inferior a 200 células / mm3, no hay manifestaciones clínicas, la experiencia ha demostrado que tienen los síntomas que se desarrollan en los próximos 2 meses, por lo que todos son considerados como Pacientes en la etapa del SIDA.