1 128 гэсэн тоонуудын утга нь тэмбүү юм. Тэмбүү өвчнийг оношлох үндсэн аргууд, үзүүлэлтүүдийг тайлах

Тэмбүү нь бэлгийн замын халдварт өвчний ангилалд багтдаг бөгөөд гол "буруутан" нь цайвар трепонема юм. Энэ нян нь бэлгийн харьцааны дараа эсвэл ахуйн замаар биед нэвтэрч болно.

Энэ өвчнийг тодорхойлоход чиглэсэн оношлогооны арга хэмжээ нь нарийн төвөгтэй байдаг. Туршилтын үр дүнд янз бүрийн антибиотик, жирэмслэлт болон нийтлэлд тайлбарлах бусад хүчин зүйлс нөлөөлж болно.

Тэмбүүгийн шинжилгээг зааж өгөхөд - оношлох заалтууд

Зарим өвчтөнүүд эмэгтэйчүүдийн эмч, андрологичд үзлэг хийхээр ирэхдээ бэлгийн амьдралынхаа чанарын талаар бодитой мэдээлэл өгдөггүй.

Магадгүй шалтгаан нь ердийн ичгүүр, магадгүй бэлгийн замын халдварт өвчний талаархи мэдээлэл дутмаг байж болох юм.

Эмч тэмбүү нь ямар ч байдлаар илрээгүй байсан ч шинжилгээнд илгээж болох бөгөөд өвчтөн энэ өвчний халдвар авах боломжгүй гэдэгт 100% итгэлтэй байна. Баримт нь эмгэг гэж үздэг өдөр тутмын холбоо барих замаар дамжих боломжтойэсвэл шинж тэмдэггүй байх.

Тэмбүүгийн шинжилгээг дараахь тохиолдолд тогтооно.

• Жирэмсэн үед бүртгүүлэх шаардлагатай.
• Өвчтөн донорын хувиар цусаа өгөхийг хүсдэг.
• Эмнэлгийн тусгай комиссыг давах шаардлагатай тодорхой албан тушаал (цэрэг, эрүүл мэндийн ажилтан, тогооч гэх мэт) авах боломжтой.
• Тэр хүн шоронд байгаа.
• Тэмбүүтэй өвчтөнтэй бэлгийн харьцаанд орсон.
• Шинээр төрсөн нярайн эх нь тэмбүүтэй.
• Өвчтөнд энэ өвчний шинж тэмдэг илэрсэн. Ихэнхдээ эдгээр нь бэлэг эрхтний бүсэд тууралт үүсдэг.
• Эхний шинжилгээ нь тухайн өвчин байгаа эсэхийг баталсан.

Цусны шинжилгээг тэмбүү өвчний үед тогтмол хийдэг. Энэ нь эмчилгээний арга хэмжээний чанарыг хянахад зайлшгүй шаардлагатай.

Эмчилгээний дараа өвчтөн мөн судалгаанд зориулж цус авдаг.

Тэмбүүгийн шинжилгээнд хэрхэн хамрагдах вэ

Судалгааны хувьд манипуляцийг ихэвчлэн ашигладаг венийн цус. Зарим тохиолдолд лабораторийн туслах нь оношлохын тулд зөв дээж авч болно хуруунаас, эсвэл нугасаас.

Хүргэлтийн үеэс үр дүнг хүлээн авах хүртэлх хугацаа өөр байж болно. нэг өдрөөс хоёр долоо хоног хүртэл. Туршилтын төрлөөр бүх зүйл тодорхойлогдоно.

Тухайн өвчнийг тодорхойлохын тулд цусны шинжилгээ өгөхөд бэлтгэхдээ дараахь зөвлөмжийг дагаж мөрдөнө.

• Туршилтаас нэг өдрийн өмнө өөх тос агуулсан хоолыг хоолны дэглэмээс хасах хэрэгтэй.Энэ нь цусны ийлдсийг бүдгэрүүлэхэд хүргэдэг бөгөөд энэ нь олж авсан үр дүнг гажуудуулах болно.
• Доод тал нь 8 цагийн турш хоол идэхээс зайлсхийтэмбүүгийн шинжилгээ хийхээс өмнө.
• Архи, никотин нь урвалын үнэлгээнд саад учруулж болзошгүй.Шинжилгээ хийхээс 24 цагийн өмнө согтууруулах ундаа агуулсан ундаа уухгүй байхыг мэргэжилтнүүд зөвлөж байна, шинжилгээ өгөхөөс дор хаяж нэг цагийн өмнө тамхи татахыг хүлээх хэрэгтэй.
• Хэрэв өвчтөн антибиотик хэрэглэж байгаа бол, заасан шинжилгээг эмчилгээ дууссанаас хойш дор хаяж долоо хоногийн дараа хийх ёстой.

Судалгаанд материал ирүүлэх, үзүүлэлтүүдийг тайлах арга

Өнөөдөр энэ өвчнийг оношлох аргуудын аль нь ч олж авсан мэдээллийн үнэн зөвийг баталгаажуулж чадахгүй. Ямар ч тохиолдолд алдаа гардаг бөгөөд тэдгээр нь 10% хүрч болно.

Үүнтэй холбогдуулан өргөдөл гаргана уу судалгааны аргуудын цогц.

Серологийн шинжилгээ - өвөрмөц бус, тусгай шинжилгээ

Энэ төрлийн оношийг өвчний хязгаарлагдмал шинж тэмдэг эсвэл бүрэн байхгүй тохиолдолд зааж өгдөг.

Хоёр төрлийн серодиагностик байдаг.

1. Өвөрмөц бус туршилтууд

Эдгээр нь олон тооны хүмүүсийг тэмбүүгийн шинжилгээнд хамруулах шаардлагатай үед хамааралтай боловч оношийг батлах шаардлагатай үед энэ арга нь тохиромжгүй байдаг.

Шинжилгээ хийхэд хэцүү биш боловч эцсийн үнэлгээг эмч өгөх ёстой.

Эдгээр төрлийн оношлогоонд дараахь шалгалтууд орно.

A) Хур тунадасны микро урвал (MR)

Үүнтэй төстэй судалгаа нь халдвар авснаас хойш нэг сарын дараа байгааг илтгэнэ. Хурууны цусыг шинжилгээнд хамруулдаг боловч заримдаа тархи нугасны шингэнийг хэрэглэж болно.

Туршилтын эерэг үр дүн ( Титр дэх эсрэгбие нь 1:2-1:320 хооронд хэлбэлздэг ) өвчтөн тэмбүүтэй гэсэн үг биш юм: нэмэлт шинжилгээнд хамрагдах замаар эцсийн оношийг баталгаажуулах боломжтой.

Сөрөг хариу үйлдэл нь хоёр сонголтын үр дүн байж болно:

• Өвчтөн тэмбүүтэй байдаггүй.
• Тэмбүү нь хөгжлийн эхний үе шатанд байдаг.

B) Вассерманы хариу үйлдэл ( П.Б. RW)

Энд турших материал нь дээрх шинжилгээтэй ижил байна.

Шалгалтын энэ арга нь халдвар авснаас хойш дор хаяж 6 долоо хоногийн дараа бодитой мэдээлэл өгөх боломжтой. Хэрэв эсрэгбиеийн титр нь 1: 2 - 1: 800 байвал бэлгийн замын эмгэг байгаа эсэхийг хэлж болно.

RV-ийн шинжилгээний үр дүнг дараахь математик шинж тэмдгээр үнэлнэ.

• « — » Тэмбүү байхгүй.
• « + "эсвэл" ++ "- сул эерэг хариу үйлдэл илэрхийлсэн.
• « +++ ' гэдэг нь эерэг хариу үйлдэл юм.
• « ++++ » - өвчтөн тэмбүүгийн эсрэг огцом эерэг хариу үйлдэл үзүүлдэг.

2. Тодорхой туршилтууд

Тодорхой эсрэгбиемүүдэд чиглэсэн энэ төрлийн шинжилгээнд зориулсан олон төрлийн шинжилгээ байдаг. Тэд цусанд нэн даруй гарч ирдэггүй, харин халдвар авснаас хойш нэг сарын дараа хэдэн жилийн турш (эмчилгээгүй бол) тэнд байж болно.

Эмч нэг буюу өөр төрлийн шинжилгээг оновчтой сонгох, тус бүрийг нарийвчлан мэдэж, олж авсан үр дүнг удирдан чиглүүлэх, хариултыг хүлээн авсны дараа оношийг ялгах чадвартай байх ёстой.

Тусгай туршилтын хамгийн түгээмэл төрлүүд нь:

A) Immunfluorescence урвал (RIF)

Энэ нь тэмбүүгийн эхний үе шатанд хамааралтай боловч халдвар авснаас хойш 6-8 долоо хоногийн дараа шинжилгээ хийх хамгийн оновчтой хугацаа юм.

Судалгааны хувьд капилляр / венийн цус шаардлагатай.

• Жирэмслэлт, холбогч эдийн гажиг нь хуурамч урвал үүсгэж болох бөгөөд үүнийг тэмдэгтээр үнэлдэг. — «.
• Эерэг үр дүнг эерэгээр илэрхийлнэ (" + ") нэгээс дөрөв хүртэл.

B) Идэвхгүй наалдуулах урвал (RPHA)

Энэ шинжилгээний явцад хуруу/судаснаас бага хэмжээний цус авч, хуц/азарган тахиа цусны улаан эстэй холилдоно. Цусны урсгалд энэ өвчний үүсгэгч бодис байгаа тохиолдолд бичил биетүүд хоорондоо наалдаж, дараа нь суулт үүсдэг.

Энэ төрлийн шинжилгээ нь маш мэдрэмтгий байдаг: эмчилгээний дараа удаан хугацааны туршид тэмбүүгийн эерэг хариу урвалыг баталж чадна.

Мононуклеоз ба холбогч эдийн бүтцэд гарсан алдаа нь хуурамч эерэг урвалын шалтгаан байж болно.

Хариу авахын тулд дээд тал нь 1 цаг шаардагдах бөгөөд өвчтөнүүд халдвар авснаас хойш 4 долоо хоногийн дараа өөрсдийгөө шалгаж болно: эрт үед эсрэгбие хангалттай хэмжээгээр үйлдвэрлэгдэхгүй.

Цусан дахь халдвар хэр удаан байгааг та титрээр дүгнэж болно.

• Хэрэв тэдгээрийн үнэ цэнэ 1:320-аас хэтрэхгүй бол халдвар саяхан гарсан байна.
• Титр өндөр байх тусам трепонема нь биед удаан байдаг.

C) Ферментийн дархлааны шинжилгээ (ELISA)

Өнгөрсөн зууны төгсгөлд хэрэглэж эхэлсэн энэ өвчнийг оношлох хамгийн найдвартай аргуудын нэг.

Энэ нь халдвар авснаас хойш 21 хоногийн дараа маш их шинж тэмдэг бөгөөд 98-99% -ийн эерэг үр дүн нь тэмбүү байгааг илтгэнэ.

ELISA-г ихэвчлэн тусгай бус туршилтын дараа эсвэл зарим тусгай сорилтуудтай хослуулан хэрэглэдэг.

Цусан дахь нэг буюу өөр бүлгийн эсрэгбие илрүүлэх замаар ELISA шинжилгээ ( IgA, IgM, IgG) нь өвчний үе шатыг тодорхойлох боломжийг олгодог.

• Цусны дээжинд орсон болIgA гэхдээ байхгүйIgM,IgG: цайвар трепонема биед нэвтэрснээс хойш 14 хоногоос илүүгүй байна.
• Хэрэв тодорхойлсон болIgA,IgM, гэхдээ үгүйIgG: халдвар 28 орчим хоногийн өмнө гарсан.
• Цусан дахь дээрх бүх эсрэгбиемүүд байгаа нь халдвар авснаас хойш нэг сараас илүү хугацаа өнгөрснийг харуулж байна.
• дэргэд нь цусны урвал болIgA сөрөг баIgM,IgG эерэг: Халдвар авсан эсвэл өвчний эмчилгээ амжилттай болсон цагаас хойш асар их цаг хугацаа өнгөрчээ.

D) Treponema pallidum хөдөлгөөнгүй болгох урвал (RIBT)

Тэмбүүг оношлох хамгийн түгээмэл аргуудын нэг.

Халдварын эхний үе шатанд хэрэглэх нь утгагүй боловч 12 дахь долоо хоногоос хойш RIBT шинжилгээний үр дүн 99% найдвартай байдаг.

Энэхүү оношилгооны аргыг мэдрэлийн тэмбүү, дотоод эрхтний тэмбүүгийн сэжигтэй үед эсвэл өвөрмөц бус сорилтой хослуулан хэрэглэдэг.

Байнгын антибиотик хэрэглэх үед өвчтөн эмчилгээ дууссанаас хойш дор хаяж 25 хоног хүлээх ёстой. Усанд уусдаг антибиотикууд нь биеэс гадагшлуулахад бага хугацаа шаардагддаг: 7-8 хоног.

Цусыг судсаар өлөн элгэн дээр авдаг бөгөөд үр дүнг хөдөлгөөнгүй байдлын хувиар тайлбарладаг.

• Хэрэв хөдөлгөөнгүй байдлын түвшин 20% -иас хэтрэхгүй бол тэмбүүгийн шинжилгээг сөрөг гэж үзнэ.
• 50% -иас хэтэрсэн тохиолдолд заасан эмгэгийн хариу урвал эерэг байна.

Бусад тохиолдолд давтан судалгааг томилно.

D) Дархлаа арилгах

Бусад туршилтууд эргэлзээтэй үр дүн өгөхөд ашигладаг судалгааны шинэ аргуудын нэг юм.

Энэхүү оношилгооны тусламжтайгаар цусан дахь эсрэгбиеийн хамгийн бага хэмжээг илрүүлэх боломжтой: энэ нь бараг 100% нарийвчлалтай байдаг.

Бүх эмнэлгүүд ийм шинжилгээ хийдэггүй: энэ нь хямдхан биш юм.

Лабораторийн шинжилгээ

Шинжилгээний өртөг маш бага тул үр дүнг 30 минутын дотор олж мэдэх боломжтой.

1. Ийм судалгаа хийхийн тулд шархлаат / элэгдлийн гажигтай өвчтөнөөс дээж авдаг. бэлэг эрхтний бүсэд байрладаг. Авсан дээжийн микроскопийн шинжилгээг ихэвчлэн лабораторид хийдэг.

Нөлөөлөлд өртсөн газрыг эхлээд давсны уусмалаар арчина. Энэ нь гэмтсэн газрыг хортой бичил биетний нэвтрэлтээс хамгаалахад тусална.

2. Дараа нь тусгай гогцоо ашиглан гадаргууг цочроох хэрэгтэй тунгалаг цагаан шингэн гарч ирэх хүртэл хэдэн минут. Та энэ заль мэхийг болгоомжтой хийх хэрэгтэй: авсан дээжинд цусны хольц орох боломжгүй юм.

3. Олж авсан шингэнийг ил тод шилэн аяганд хийнэ. Заримдаа давстай холилдсон байдаг.

Ердийн трепонема илэрсэн үед эерэг хариу үйлдэл үзүүлэх боломжтой бөгөөд энэ нь дор хаяж 8 буржгар болно. Хэрэв үр дүн сөрөг байвал процедурыг давтан хийнэ (заримдаа хэд хэдэн удаа).

Тэмбүү нь IgG эсрэгтөрөгчийг илрүүлэх тусгай шинжилгээ юм. Ихэвчлэн энэ судалгааг RPR-д эерэг үр дүн гарсны дараа эсвэл сонгосон эмчилгээний үр дүнг үнэлэхэд ашигладаг. Тэмбүү нь маш мэдрэмтгий шинжилгээ бөгөөд амжилттай эмчилгээ хийснээс хойш 20 жилийн дараа эерэг үр дүн өгдөг ба зарим тохиолдолд өвчний үлдэгдэл насан туршдаа үлдэж болно.

Тэмбүү tpha (идэвхгүй гемагглютинацийн урвал) илрүүлэх тестийг 1965 онд Т.Ратлев санал болгосон. Аргын мөн чанар нь эритроцитыг нааж, тунадасжуулах урвал байсан бөгөөд тэмбүүгийн гадаргуу нь цайвар трепонемийн эсрэгтөрөгчийг агуулдаг бөгөөд энэ нь цусан дахь антитрепонемаль эсрэгбие байгаа тохиолдолд л ажиглагддаг.

Trna шинжилгээг халдвар авсан өдрөөс хойш нэг сарын дараа хийхийг зөвлөж байна. Цуглуулга хийхээс өмнө та дор хаяж 8 цагийн турш идэхээс татгалзах хэрэгтэй. Хэрэв транс тестийн үр дүн нь халдваргүй болохыг харуулж байгаа боловч өвчтөнд шинж тэмдэг илэрч, халдварын эхний шинж тэмдэг илэрвэл, эсвэл урьд өмнө спирохетын халдвар авсан хүнтэй бэлгийн харьцаанд орсон бол дахин шинжилгээ хийлгэхийг зөвлөж байна. 2 долоо хоногийн завсарлагатай хяналтын судалгаа. Хуурамч сөрөг tpha үр дүнгээс ялгаатай нь хэт эрт судалгаанаас үүдэлтэй IgG эсрэгтөрөгчийг илрүүлэх энэ аргыг ашиглах үед цайвар трепонемийн хуурамч эерэг үр дүн гурван тохиолдолд ажиглагдаж болно.

• халдварт мононуклеоз;
• Лепрегийн өвчин;
• Холбогч эдийн системийн гэмтэл.

Өнөөдрийг хүртэл tpha тестийг тэмбүүгийн бусад шинжилгээний эерэг үр дүнг баталгаажуулах эсвэл шаардлагатай бол эмчилгээний үр дүнг үнэлэх хамгийн үр дүнтэй тусгай ийлдэс судлалын шинжилгээ болгон ашиглаж байна.

IgG антиген байгаа эсэхийг судлах үр дүн нь зөвхөн "сөрөг" эсвэл "эерэг" гэсэн хоёр тэмдгээр хязгаарлагдахгүй бөгөөд судалгааны үр дүн нь өвчтөнийг эмнэлэгт хэвтэх үед эмчлэгч эмчийн анхаарч үздэг эсрэгбиеийн титрийг харуулж байна. эмчилгээний үр нөлөөг үнэлэх. Титрүүдийн утгын дагуу халдварын одоогийн үе, эмчилгээний арга хэмжээний амжилтын талаар дүгнэлт хийж болно. Тиймээс өвчний эхний үе шатанд хамаарах титр нь 1:80-1:320 хооронд хэлбэлздэг. Өвчин хоёрдогч үе шатанд шилжсэнээр тэмбүүгийн шинжилгээнд титр 1:5120 болж мэдэгдэхүйц нэмэгдэж, дараа нь далд үе 1:80 болж буурна. Амжилттай эмчилгээ хийсний дараа титрүүд мэдэгдэхүйц буурч болох ч эмнэлгээс гарсны дараа олон жилийн турш эерэг хэвээр байх болно.

Заримдаа tpha-ийн эерэг судалгаагаар титрүүд нь маш бага байдаг тул тэмбүүгийн оношлогоо нь ноцтой эргэлзээ төрүүлдэг. Энэ тохиолдолд олж авсан мэдээллийн эргэлзээтэй байдлын талаар тэмдэглэл хийж, 1-2 долоо хоногийн дараа дахин авахыг зөвлөж байна.

Ихэвчлэн тэмбүүгийн шинжилгээг өглөө нь богино хугацаанд хийдэг бөгөөд энэ нь судалгаанд шаардлагатай байдаг бөгөөд үүний дотор цусны дээжийг цуглуулснаас хойш 2 цагийн дотор лабораторид хүргэх шаардлагатай байдаг. Энэ тохиолдолд дээжийг +8 хэм хүртэл температурт тээвэрлэх шаардлагатай.

Tpha-ийн шинжилгээний материал бол өлөн элгэн дээрээ хүний ​​өгсөн цусны ийлдэс юм. Цусны дээж авах болон дараагийн шинжилгээний явцад шаардлагатай бүх нөхцөл хангагдсан бол олж авсан мэдээллийн нарийвчлал нь анхдагч тэмбүүгийн хувьд 76%, өвчний хоёрдогч хэлбэрийн хувьд 100%, өвчний хожуу үе шатанд 94% байна. Өвчний шинж тэмдэггүй явцын үед цайвар трепонема илрэх нь ойролцоогоор 97% байдаг. Өвөрмөц байдлын түвшин 99% хүртэл байдаг нь хуурамч эерэг үр дүнгийн хувилбаруудыг бараг бүрмөсөн хасах боломжийг олгодог бөгөөд энэ нь өвчтөнүүдийн ялган оношийг хөнгөвчлөх боломжийг олгодог.

Тэмбүүгийн Treponemal шинжилгээ. Ерөнхий тайлбар.

Тэмбүү өвчнийг найдвартай оношлох, өвчтөний биед (цусны ийлдэс эсвэл тархи нугасны шингэнд) тэмбүүгийн эсрэгбиеийг тодорхойлохын тулд лабораторийн судалгааны тусгай технологиуд - ийлдэс судлалын аргуудыг ашигладаг.

Тэмбүүгийн оношлогооны шинжилгээг хийхдээ янз бүрийн ийлдэс судлалын урвалыг ашигладаг: наалдуулах, тунадасжуулах, иммунофлуоресценц, комплемент бэхлэх, ферментийн иммуноэссей гэх мэт Эдгээр бүх ийлдэс судлалын урвалууд нь эсрэгтөрөгч ба эсрэгбиеийн харилцан үйлчлэлд суурилдаг.

Тусгай ийлдэс судлалын шинжилгээ гэж нэрлэдэг трепонемалУчир нь эдгээр шинжилгээнд цайвар трепонема буюу түүний эсрэгтөрөгч, өөрөөр хэлбэл трепонемал гаралтай эсрэгтөрөгчийг ашигладаг. Трепонемалын шинжилгээний зорилго нь тэмбүүгийн үүсгэгчийн эсрэгтөрөгчийн бүтцэд тодорхой эсрэгбие, өөрөөр хэлбэл трепонемагаар гэмтсэн биеийн эд эсийн эсрэг биш харин T. Pallidum бактерийн эсрэг тусгайлан чиглэсэн эсрэгбиемүүдийг тодорхойлох явдал юм. IgM ангиллын өвөрмөц антитрепонемаль эсрэгбиемийг өвчний хоёр дахь долоо хоногийн эцэс гэхэд эрт илрүүлж болно.

7. Хуурамч эерэг, хуурамч сөрөг үр дүн

Өвчин эмгэггүй хүмүүст тэмбүүгийн эерэг PB шинжилгээг хуурамч эерэг гэж нэрлэдэг. Эрүүл хүмүүст хуурамч эерэг үр дүнгийн давтамж 0.2-0.25% байдаг. Хэрэв эрүүл хүмүүст RV-ийн өвөрмөц бус хуурамч эерэг үр дүнгийн хувь маш бага байвал зарим өвчний хувьд энэ нь өндөр байж болно.

Серологийн урвалын бүх өвөрмөц бус үр дүнг дараах үндсэн бүлгүүдэд хувааж болно.

1. Ижил төрлийн эмгэг төрүүлэгчид (спирохета) нийтлэг антиген байдгаас үүдэлтэй өвчин: дахилттай халуурах, халуурах, бэжел, пинт, амны хөндийн трепонема, лептоспира.

2. Липидийн солилцооны өөрчлөлт, ийлдэс глобулины өөрчлөлтөөс үүдэлтэй эерэг урвал. Эдгээрт тулайтай жирэмсэн эмэгтэйд эерэг үр дүн, хар тугалга, фосфор, натрийн салицилат, дижиталис гэх мэт хордлогын үр дүнд липидийн найрлага алдагдах зэрэг орно. Эдгээр урвалууд нь зарим халдварт өвчний эерэг урвалыг багтаасан байх ёстой (халдвар, хумхаа, уушгины хатгалгаа , уяман өвчин, эндокардит, коллагеноз, миокардийн шигдээс, тархи доргилт, хорт хавдар, элэгний хатуурал гэх мэт)

3. Үйл ажиллагааны техникийн алдаа. Комплементийн тунг буруу сонгосон, урвалж хадгалах нөхцөл, хугацааг дагаж мөрдөөгүй, цусны ийлдсийн хяналтын дээжийг урвалд оруулахгүй, бохирдсон туршилтын хоолой, багаж хэрэгслийг ашигласан.

8. Вассерманы урвалын өөрчлөлт

Хүйтэн, тархи нугасны шингэнтэй хамт чанарын болон тоон хувилбарт Вассерманы урвалын өөрчлөлтүүд байдаг.

Хүйтэнд RV-ийн өөрчлөлтилүү мэдрэмтгий байсан бололтой. Хүйтэн үед Вассерманы урвалыг тохируулах аргын нэг онцлог шинж чанар нь нэмэлт бодисыг холбодог гурван фазын температурын горим юм. Энэ урвалыг мөн кардиолипин ба трепонемал антигенээр хийдэг.

RW-ийн чанарын үнэлгээнээс гадна түүнд зориулсан арга байдаг тоон тохиргооцусны ийлдэс (1:10, 1:20, 1:80, 1:160, 1:320) янз бүрийн шингэрүүлэлтүүдтэй. Реагин титр нь хамгийн их шингэрүүлэлтээр тодорхойлогддог бөгөөд энэ нь огцом эерэг үр дүнг өгдөг (4+). RV-ийн тоон томъёолол нь тэмбүүгийн зарим хэлбэрийг оношлох, эмчилгээний үр нөлөөг хянахад чухал ач холбогдолтой.

9. Хамрах хүрээ

ОХУ-д RSKt нь тэмбүүгийн (SSR) стандарт ийлдэс судлалын шинжилгээний цогцолборын нэг хэсэг юм.

Вассерманы урвалыг трепонемал ба кардиолипины эсрэгтөрөгч (RSKt) ашиглан хийдэг

• тэмбүүгийн бүх хэлбэрийн оношлогоо,
• эмчилгээний үр нөлөөг хянах,
• тэмбүүтэй өвчтөнтэй бэлгийн хавьталд орсон хүмүүсийн үзлэг;
• тэмбүүгийн эмнэлзүйн болон анамнезийн сэжигтэй хүмүүсийн үзлэг
• Сэтгэцийн болон мэдрэлийн эмнэлэгт хэвтэж буй өвчтөнүүд, донорууд болон жирэмсэн эмэгтэйчүүд, түүний дотор жирэмслэлтийг зохиомлоор тасалдуулахаар илгээсэн хүмүүсийг тэмбүүгээс урьдчилан сэргийлэх үзлэг хийх үед.

Одоогийн байдлаар ОХУ-ын Эрүүл мэндийн яамны тушаалаар RSKT-ийг илүү мэдрэмтгий трепонемал аргаар (ELISA эсвэл RPHA) солихыг зөвлөж байна.

Гадаадад трепонемал антигентэй Вассерманы урвалыг эмнэлзүйн лабораторийн практикт удаан хугацаагаар ашиглаагүй бөгөөд Дэлхийн эрүүл мэндийн байгууллагаас санал болгосон стандарт шинжилгээний жагсаалтад ороогүй болно.

Сонгодог ийлдэс судлалын урвалын цогцолбор (CSR)

DAC- тэр урвалын цогцолбортэмбүүгийн серодиагностикийн стандарт арга болгон ашигладаг. Энэхүү цогц урвалд кардиолипиний эсрэгтөрөгч (лецитин ба холестеролоор баяжуулсан бухын зүрхнээс гаргаж авсан ханд) ба трепонемал антиген (хэт авиан шинжилгээгээр эмчилсэн эмгэг төрүүлэгч соёлын цайвар трепонемийн суспенз) бүхий Вассерманы урвал, мөн микро хур тунадасжих урвал (RMP) орно. ) сийвэн эсвэл идэвхгүйжүүлсэн ийлдэс, кардиолипины эсрэгтөрөгчтэй хамт байрлуулна

Анхдагч үеийн дунд үед CSR эерэг болдог (түүний серонегатив ба ийлдэс эерэг гэж хуваагдах нь CSR-ээр нарийн тодорхойлогддог), хоёрдогч үе шатанд өвчтөнүүдийн 98-100%, гуравдагч үед зөвхөн 60-70-д эерэг байдаг. %. Өөрөөр хэлбэл, өвчний үргэлжлэх хугацаа ихсэх тусам СНХ-ийн эерэг байдал аажмаар буурдаг.

KSR-ийн давуу талууд:

1) Хямд, энгийн байдал, тохируулах хурд. Энэ нь ялангуяа бичил тунадасны урвалын хувьд үнэн юм: RMP нь одоогоор үндсэн скрининг (скрининг) арга юм;

2) Трепонемал бус сорилыг тэмбүүгийн эдгэрэлтийг хянахад ашиглахад тохиромжтой.

CSR-ийн сул талууд:

1) Урвалын үр дүнг үнэлэх субьектив байдал ("нүдээр");

2) Тэмбүүгийн хожуу хэлбэрийн үед бага мэдрэмжтэй байх;

3) Орчин үеийн туршилтуудтай харьцуулахад өвөрмөц чанар дутмаг. Тэдгээрийг гүйцэтгэх үед хуурамч эерэг урвал (LPR) ихэвчлэн тэмдэглэгддэг.

LPR нь цайвар спирохета болон бусад бичил биетүүдийн хоорондын хөндлөн урвал, липид ба уургийн солилцооны эмгэг, эсийн мембраны тогтворгүй байдал, аутоэсрэгбие үүсэх зэргээс шалтгаалж болно. LPR нь цочмог (хумхаа, халдварт мононуклеоз гэх мэт) болон архаг (сүрьеэ, уяман, гепатит, боррелиоз гэх мэт) халдвар, миокардийн шигдээс, элэгний хатуурал, коллагеноз (ялангуяа SLE), онкопатологи, вакцинжуулалт, эмийн хэрэглээ, архи, тослог хоол хүнс хэтрүүлэн хэрэглэх. Хуурамч эерэг нь жирэмсний сүүлийн долоо хоногууд, төрсний дараа, зарим эмэгтэйчүүдэд сарын тэмдгийн үед CSR байж болно. ХДХВ-ийн халдвартай холбоотой хуурамч сөрөг CSR үр дүн гарч болзошгүй.

RIT, RIBT - Цайвар трепонемийг хөдөлгөөнгүй болгох урвал

Treponema pallidum immobilization test (TPI; Treponema pallidum immobilization test, TPI) нь өвөрмөц трепонемийн эсрэгбиемүүдийг илрүүлэх сонгодог арга юм. RIBT урвал нь туулайн төмсөгт ургасан эмгэг төрүүлэгч treponema pallidum T. pallidum (Nichols омог)-ийг эсрэгтөрөгч болгон ашигладаг. RIBT нь өвчтөний цусны ийлдэс болон комплементээс эсрэгбиетэй харьцсаны дараа амьд цайвар трепонемийн хөдөлгөөнийг алдахад суурилдаг. Үр дүнг харанхуй талбайн микроскопоор үнэлдэг. RIBT тестийг тэмбүүгийн тусгай сорил болгон эмнэлзүйн практикт нэвтрүүлсэн хэдий ч энэ нь хөдөлмөр их шаарддаг, техникийн хувьд төвөгтэй, цаг хугацаа их шаарддаг, хэрэглэхэд үнэтэй байдаг.

1. RIBT аргын түүх

Treponema pallidum immobilization test (TPRT) нь үнэндээ тэмбүүг оношлох анхны тусгай шинжилгээ юм. Энэхүү урвалыг 1949 онд Америкийн судлаач Нелсон, Майер (Р. В. Нелсон ба М. М. Майер) нар танилцуулж, дараагийн арван жилд шинжлэх ухааны баримт бичгүүдэд дэлгэрэнгүй авч үзсэн. Туршилтанд амьд трепонема ашиглах оролдлого өмнө нь бүтэлгүйтэж байсан. Нелсон трепонема нь 8 хоног хүртэл амьдрах чадвартай орчинг бүрдүүлж чадсан тул түүний судалгаа амжилттай болсон.

2. RIBT аргын зарчим

Энэ арга нь агааргүй нөхцөлд судлагдсан цусны ийлдэс ба комплементийн хөдөлгөөнгүй антитрепонемийн эсрэгбие байгаа тохиолдолд цайвар трепонемийн хөдөлгөөнийг алдах үзэгдэл дээр суурилдаг. Антиген нь тэмбүүгээр зохиомлоор халдвар авсан туулайнаас гаргаж авсан амьд эмгэг төрүүлэгч цайвар трепонема юм.

3. RIBT тестийг тохируулах

Туршилтын ийлдэс, нэмэлт ба эсрэгтөрөгч нь урвалд оролцдог. Сэдвийн цусны ийлдсийг хиймэл халдварын дараа туулайн төмсөгний эдээс олж авсан амьд трепонемд нэмнэ. Сийвэн дэх трепонемын эсрэг эсрэгбие-иммобилизин байгаа тохиолдолд цайвар трепонема хөдөлгөөнийг зогсооно (хөдөлгөөнгүй). Иммобилизин эсрэгбие нь хожуу үеийн антитрепонемаль эсрэгбие юм.

Урвалыг халуунд идэвхгүйжүүлсэн ийлдэс эсвэл лав цаас (хуурай дусал) дээр хатаасан ийлдсийн дээжээр гүйцэтгэдэг. Сийвэнг халаах замаар идэвхгүйжүүлэх ажлыг 560С-ийн температурт 30 минутын турш явуулна. Цус авахын өмнө өвчтөн эм, ялангуяа пенициллиний бэлдмэл хэрэглэхгүй байх ёстой. Бие махбодид саатал гарсан тохиолдолд эмийг хүлээн авахыг цуцална.

Антиген болгон 7-10 хоногийн туулайн тэмбүүт орхитоос (төмсөгний үрэвсэл) олж авсан Nichols омгийн бактерийг ашигладаг. Урвал үүсгэсэн үеэс түүний үр дүнг бүртгэх хүртэлх хугацаа 18-20 цаг үргэлжилдэг тул бичил биетний амьдрах чадвар, сайн хөдөлгөөнийг хадгалахын тулд амьд үлдэх орчин шаардлагатай.

RIBT нь далайн гахайн нэмэлтийг ашигладаг. Комплемент авахын тулд хэд хэдэн далайн гахайнаас цусыг ариутгасан нөхцөлд авах шаардлагатай.

Бактерийн бохирдолтой тохиолдолд нэмэлт бодисыг устгана. Цайвар трепонемийг хөдөлгөөнгүй болгох урвалд хэрэглэх боломжгүй, хадгалагдсан нэмэлт, tk. бичил биетэнд хортой.

Хөдөлгөөнгүй болгох урвалд нэмэлт нэмэлтийг хэрэглэдэг. Түүний хэмжээ нь цайвар трепонемагийн амьд үлдэх орчноос ихээхэн хамаардаг.

RIBT-ийг ариутгасан хайрцагт хийж, өмнө нь нян устгах кварцын чийдэнгээр 45-60 минутын турш цацна. Цусны ийлдэс бүрийг хоёр туршилтын хоолойд шалгана. туршлагатайболон хяналт. Туршилтын хоёр хоолойд шинжилгээний ийлдэс болон эсрэгтөрөгчийг шаардлагатай хэмжээгээр нэмнэ. Идэвхтэй нэмэлт бодисыг туршилтын хоолойд хийнэ, мөн ижил хэмжээний идэвхгүйжүүлсэн далайн гахайн цусны ийлдсийг хяналтын хоолойд хийнэ. Бөглөсний дараа хоолойн агуулгыг зөөлөн сэгсрэх замаар холино.

RIBT нь агааргүй нөхцөлд явагддаг. Найрлагатай туршилтын хоолойг микроаэростатанд хийж, агаар мандлын агаарыг вакуум насосоор соруулж, цилиндрээс хийн хольцыг шахдаг (азотын 95 хэсэг, нүүрстөрөгчийн давхар ислийн 5 хэсэг). Туршилтын хоолой бүхий микроанаэростатыг термостат (35 ° C) 18-20 цагийн турш байрлуулна.

RIBT-ийн үр дүнгийн үнэлгээг термостат ба микроанаэростатаас туршилтын хоолойг салгасны дараа (өөрөөр хэлбэл 18-20 цагийн турш ажилласны дараа) хийдэг. Пастерийн пипеткээр туршилтын хоолойн агуулгыг нэг дусал дуслаар шилэн слайдаар бүрхэж, микроскопын харанхуй талбарт шалгана (объектив 40, нүдний шил 10X). Бэлдмэлийн янз бүрийн хэсэгт хэд хэдэн харааны талбарыг судалж, хөдөлгөөнт болон хөдөлгөөнгүй цайвар трепонемийн тоог тоолно. Тооцоолол нь хяналтаас эм, дараа нь туршилтын хоолойноос эхэлдэг.

Урвалыг тогтоохдоо 5 хяналтын судалгааг ашигладаг: эерэг ба сөрөг цусны ийлдэс, идэвхтэй ба идэвхгүй комплемент, цайвар трепонемийн амьд үлдэх орчин. Энэхүү туршилтанд цайвар трепонемагийн хөдөлгөөний түвшинг тодорхойлохын тулд хяналтын сөрөг цусны ийлдэсийг ашигладаг. Эерэг цусны ийлдэсийг хянах - энэ туршилтын нөхцөлд хөдөлгөөнгүй болгох үйл ажиллагааны түвшинг үнэлэх. Идэвхтэй ба идэвхгүй нэмэлт, хүрээлэн буй орчны судалгааг цайвар трепонемагийн хөдөлгөөнд үзүүлэх нөлөөг тодорхойлох зорилгоор хийдэг.

Туршилтанд нэмэлт бодис дутагдалтай байгаа тул хөдөлгөөнгүй болгох эсрэгбие нь үйл ажиллагаагаа зохих ёсоор харуулдаггүй бөгөөд трепонема нь хөдөлгөөнт хэвээр байна. Тиймээс туршилтын дараа туршилтын хоолой дахь цайвар трепонемийн хөдөлгөөн нь комплемент дутмаг байсантай холбоотой эсэхийг үнэлэхийн тулд үлдэгдэл комплементийг тодорхойлох ажлыг гүйцэтгэдэг. Үүний тулд цус задралын системийг ашигладаг - термостатад хадгалсан хуцны эритроцитын суспенз ба шингэрүүлсэн гемолитик ийлдэсийн холимог.

Хоолой бүрт шаардлагатай хэмжээгээр цус задралын системийг нэмэх замаар нэмэлт нэмэлтийг тодорхойлно. Хоолойнуудыг термостатад 37 градусын температурт 45 минутын турш байрлуулна. Туршилтын туршилтын хоолойд эритроцитын цус задрал, хяналтын хоолойд цус задралын саатал гарах ёстой. Туршилтын хоолойд цус задрал байхгүй байгаа нь нэмэлт бодис хангалтгүй байгааг харуулж байгаа тул эдгээр тохиолдолд судалгааг давтан хийх шаардлагатай. Цусны сийвэнгийн давтан шинжилгээг зөвхөн цайвар трепонема 100% хөдөлгөөнгүй болсон тохиолдолд хийдэггүй.

4. RIBT-ийн үр дүнгийн нягтлан бодох бүртгэл

Хөдөлгөөнгүй трепонема нь харанхуй талбайн микроскоп ашиглан микроскопоор тоологддог. Судлаач нь трепонемийн хөдөлгөөнийг үнэлэх чадвартай байх шаардлагатай. Тэрээр цайвар трепонемагаар хийсэн хөдөлгөөний эрчимийг анхаарч үзэх хэрэгтэй. Энэ нянгийн хувьд долгионтой төстэй агшилт, гулзайлтын хөдөлгөөнийг ажиглах нь үргэлж боломжгүй байдаг, заримдаа зөвхөн эргэлттэй байдаг. Та мөн трепонемийн идэвхтэй хөдөлгөөнийг шингэний урсгалтай хөдөлгөөнөөс ялгах чадвартай байх ёстой.

Урвалын үр дүнг үнэлэхийн тулд цайвар трепонемийн хөдөлгөөнгүй байдлын хувь, өөрөөр хэлбэл туршилтын хөдөлгөөнт ба хөдөлгөөнгүй трепонемийн харьцаа (идэвхтэй комплементтэй) ба хяналтын (идэвхгүй комплементтэй) харьцааг томъёогоор тооцоолно.

X \u003d (M - C) × 100 / М

энд M нь хяналт дахь хөдөлгөөнт трепонемийн тоо; C - туршилтын хөдөлгөөнт трепонемийн тоо; Х - % хөдөлгөөнгүй байдал. Практик ажилд хөдөлгөөнгүй байдлын хувийг дээрх томъёог ашиглан урьдчилан эмхэтгэсэн хүснэгтийн дагуу тодорхойлно.

Цайвар трепонемийг хөдөлгөөнгүй болгох урвалыг дараах байдлаар тооцоолсон

• эерэгхөдөлгөөнгүй байх үед 51 - 100% трепонем,
• сул эерэг: 31 - 50% хөдөлгөөнгүй трепонема,
• эргэлзээтэй: 21 - 30% хөдөлгөөнгүй трепонема,
• сөрөг: 0 - 20% хөдөлгөөнгүй трепонема.

Цайвар трепонемийг хөдөлгөөнгүй болгох урвал нь анхдагч төгсгөл буюу тэмбүүгийн хоёрдогч үеийн эхэн үед эерэг болдог (халдвар авсан үеэс хойш 7-8 дахь долоо хоног ба түүнээс дээш). Үүний зэрэгцээ RIBT нь тэмбүүгийн эхний үе шатыг оношлоход тийм ч чухал биш юм, учир нь цайвар трепонема өвчнийг хөдөлгөөнгүй болгож, хариу урвалаар тодорхойлогддог эсрэгбие нь халдвар авснаас хойш 3-6 долоо хоногийн дараа гарч ирдэг. Antibodies-immobilisins нь иммуноглобулины IgG ангилалд багтдаг. Тэд цусанд реагинуудаас хожуу (антикардиолипины эсрэгбие), флуоресцеины эсрэгбие (RIF ба ELISA илэрсэн) ба преципитин (RMP илэрсэн) -ээс хожуу илэрдэг.

Ирээдүйд RIBT эерэг хэвээр байна. Тэмбүүгийн хожуу хэлбэрийн урвалын өндөр мэдрэмжтэй байдаг. Хоёрдогч, хожуу тэмбүү, мэдрэлийн тэмбүү, төрөлхийн тэмбүүтэй тохиолдолд RIBT эерэг үр дүн тохиолдлын 95-100% -д бүртгэгддэг. Гуравдагч тэмбүү, дотоод эрхтнүүдийн өвөрмөц гэмтэл, мэдрэлийн систем, RV ихэвчлэн сөрөг байдаг тохиолдолд RIBT нь 98-100% тохиолдолд эерэг үр дүнг өгдөг.

RIBT нь тэмбүүгийн хамгийн өвөрмөц шинжилгээ гэж эртнээс хүлээн зөвшөөрөгдсөн. Уран зохиолын дагуу RIBT-ийн өвөрмөц байдал 99%, мэдрэмж нь 79-94% хооронд хэлбэлздэг. TsNIKVI-ийн мэдээлснээр RIBT-ийн мэдрэмж (нийт, тэмбүүгийн бүх үе шатанд) 87.7% байна.

7. Аргын хамрах хүрээ

RIBT-ийн хамрах хүрээ нь тогтоох хугацаа, өндөр өртөг, хөдөлмөрийн эрчимжилт зэргээс шалтгаалан аажмаар нарийсч байна. RIBT бол өндөр мэргэшсэн боловсон хүчин, вивариум байх шаардлагатай нэлээд төвөгтэй бөгөөд өртөг өндөртэй дүн шинжилгээ юм. Үүнтэй холбоотойгоор сүүлийн жилүүдэд энэ аргын хэрэглээ эрс багассан. АНУ-д энэ туршилтыг одоогоор зөвхөн судалгааны лабораторид ашиглаж байна.

RIF болон RIBT-ийн нарийн төвөгтэй байдал, өндөр өртөгт үндэслэн тэмбүүгийн хожуу болон далд хэлбэрийн оношлогоонд ашиглах нь зүйтэй юм. RIBT нь тэмбүүгийн эрт үеийн далд хэлбэр, хуурамч эерэг үр дүнг ялган оношлоход "урвалын арбитр" гэсэн байр сууриа хадгалсаар байна. Энэ урвал нь мэдрэлийн тэмбүүг оношлох, бусад ийлдэс судлалын шинжилгээнүүд нийцэхгүй байх үед тустай байж болно.

RIBT нь RIF болон RV-ээс хамаагүй хожуу эерэг болдог. Тиймээс тэмбүүгийн халдварт хэлбэрийг оношлоход ашигладаггүй.

RIF шиг RIBT нь тэмбүүгийн эсрэг эмчилгээний явцад маш удаан сөрөг байдаг. Үүний үр дүнд тэмбүүгийн эсрэг эмчилгээний явцыг хянахад тохиромжгүй байдаг.

RIBT-ийн хуурамч эерэг үр дүн (FPR) нь ховор бөгөөд ихэвчлэн Орос улсад байдаггүй трепонематозууд (яв, пинта, бежел), түүнчлэн уяман, саркоидоз, SLE, сүрьеэ, элэгний хатуурал зэрэгт ажиглагддаг. элэг болон тэмбүүгийн бус шинж чанартай бусад ховор өвчин. Өвчтөний нас ахих тусам RIBT-ийн хуурамч эерэг үр дүнгийн тоо нэмэгддэг.

Шинжилгээний ийлдэс нь цайвар трепонемийн өвөрмөц бус хөдөлгөөнгүй байдлыг үүсгэдэг трепонемик бодис (жишээ нь: пенициллин, тетрациклин, эритромицин) агуулсан бол RIBT хуурамч эерэг гарч болзошгүй. Энэ нь өвчтөн трепонемоцид антибиотик ууж байгаатай холбоотой байж магадгүй тул шалгалтыг хийхгүй. Сүүлийн нэг сарын дотор антибиотик эмчилгээ хийлгэсэн хүмүүст хийсэн. RIBT-ийн цусыг антибиотик болон бусад тэмбүүгийн эсрэг эм ууснаас хойш 2 долоо хоногийн өмнө шалгаж болно.

9. Цайвар трепонемийг хөдөлгөөнгүй болгох урвалын өөрчлөлт

Микроанаеростатик техникээс гадна Н.М.-ийн дагуу RIBT-ийн меланж тохиргоо байдаг. Овчинников. Урвалын найрлага дахь анаэробын нөхцөл нь урвалж буй хольцыг мелангерт (лейкоцитын холигч) байрлуулж, хоёр үзүүрийг резинэн цагирагаар хаадаг. Меланж урвалын техник нь вакуум шахуурга, азот, нүүрстөрөгчийн давхар ислийн холимог бүхий цилиндр, микроанаэростатыг тараах боломжтой болгодог. Томоохон эмнэлзүйн материал дээр хийсэн харьцуулсан судалгаагаар сонгодог анеростатик техникээс дутахааргүй үр дүн гарсан.

10. RIBT-ийн онцлог, давуу болон сул талууд

RIBT бол техникийн нарийн төвөгтэй, үнэтэй оношлогооны арга юм. Технологи нь туулайн арчилгаа, шинжилгээнд ихээхэн хэмжээний хөрөнгө оруулалт шаарддаг. Энэхүү цаг хугацаа шаардсан тестийг одоогоор шинжлэх ухааны зорилгоор голчлон ашиглаж байна. Гадаадын ихэнх орнуудад бараг 40 жилийн турш RIBT-ийг оношлогооны зорилгоор бус зөвхөн судалгааны ажилд ашиглаж ирсэн.

Урвалын сул талууд:

• RIBT нь туулайнд дасан зохицсон ч хүмүүст халдвартай хэвээр байгаа Nichols омгийн амьд эмгэг төрүүлэгч цайвар трепонематай ажиллахыг шаарддаг.
• урвал нь нарийн төвөгтэй, цаг хугацаа шаардсан, үнэтэй байдаг
• вивариум шаардлагатай
• Урвалыг бий болгох, үр дүнг бүртгэх, вивариумыг хадгалах өндөр мэргэшсэн боловсон хүчин шаардлагатай
• үр дүнгийн үнэлгээний субъектив байдал
• автоматжуулалт дутмаг
• Энэ ийлдэс судлалын аргыг стандартчилах арга байхгүй.
• Тэмбүүгийн эсрэг эмчилгээ үргэлжилж байгаа үед хариу үйлдэл үзүүлэхгүй
• эдгэрэлтийг хянахын тулд ашиглах чадваргүй. Тэмбүүтэй өвчтөнд RIBT нь бүрэн эмчилгээ хийлгэсэн ч олон жилийн турш (насан туршдаа) эерэг хэвээр үлддэг.
• Хорт хавдар, чихрийн шижин, уяман өвчин, аутоиммун өвчин, уушгины хатгалгаа, зүрх судасны хүнд хэлбэрийн эмгэг бүхий өвчтөнүүдэд урвал нь хуурамч эерэг үр дүнг өгч чадна.

RIBT-ийн давуу талууд нь:

1) Хангалттай өндөр мэдрэмж;

2) Өндөр өвөрмөц байдал.

RIF (Immunfluorescence урвал)

Иммунофлуоресценцийн урвал (RIF) нь бичил биетний эсрэгтөрөгчийг илрүүлэх эсвэл эсрэгбиемийг илрүүлэх экспресс оношлогооны арга юм. Флюресцент дохиог илрүүлэхэд үндэслэсэн шинжилгээг тэмбүүгийн хамгийн сайн шинжилгээний тоонд тооцдог.

1. Аргын түүх

Флюресцент трепонемал эсрэгбиемийг (FTA) анх 1957 онд Дикон нар (Диакон, Фалкон, Харрис) боловсруулсан.

2. Аргын зарчим

RIF арга нь флюресцент микроскопын хэт ягаан туяанд фторхромоор тэмдэглэгдсэн эсрэгбие бүхий дархлааны ийлдэстэй эд эсийн эсрэгтөрөгч эсвэл микробууд гэрэлтдэгт суурилдаг. Ийм гэрэлтэгч ийлдэсээр эмчилсэн түрхэц дэх бактери нь эсийн захын дагуу ногоон хүрээ хэлбэрээр гэрэлтдэг.

RIF дахь эсрэгтөрөгчийн хувьд туулайн цахирмаа өвчний Nichols омгийн амьд эмгэг төрүүлэгч цайвар трепонемийн суспензийг шилэн слайд дээр хатааж, ацетоноор бэхлэнэ. Өвчтөний цусны ийлдсийг цайвар трепонема дээр нэмж хатааж, ацетоноор шилэн дээр тогтооно.

Угаалгын дараа бэлдмэлийг флуоресцеинээр тэмдэглэсэн хүний ​​иммуноглобулины эсрэг эсрэгбие агуулсан ийлдэсээр эмчилнэ. Дахин нэг удаа бэлдмэлийг угааж, флюресцент микроскопоор харна. Туршилтын ийлдэс нь трепонемийн эсрэг флуоресцеины эсрэгбие агуулсан бол трепонемийн шар-ногоон гэрэлтэлтийг тэмдэглэнэ.

3. RIF аргаар судалгаа явуулах арга

Шилэн слайд дээр бэхлэгдсэн эсрэгтөрөгчийг (эмгэг төрүүлэгч трепонема цайвар) туршилтын ийлдэсээр боловсруулдаг. Угаалгын дараа бэлдмэлийг флюресцент хүний ​​эсрэг иммуноглобулины ийлдсэнд фторохромоор тэмдэглэнэ. Энэ тохиолдолд үүссэн флюресцент цогцолбор (хүний ​​эсрэг глобулин + флуоресцеин тиоизоцианат) нь цайвар трепонемагийн гадаргуу дээрх хүний ​​глобулинтай холбогдож, флюресцент микроскопоор цайвар трепонемийн гэрэлтдэг.

Антиген-эсрэгбиеийн цогцолборыг илрүүлэхийн тулд FITC-тэй хавсарсан төрөл зүйлийн эсрэг (хүний ​​эсрэг) иммуноглобулиныг төлөөлдөг гэрэлтэгч ийлдэсийг ашигладаг. Сийвэн дэх трепонемийн эсрэгбие байгаа эсэхийг флюресцент микроскопоор үзэхэд трепонемийн гэрэлтэлтээр тодорхойлно. Туршилтыг чанарын болон хагас тоон хувилбараар гүйцэтгэдэг.

4. Үр дүнгийн нягтлан бодох бүртгэл

RIF-ийн үр дүнг дүрслэх нь флюресцент микроскоп ашиглан хийгддэг. Үр дүнг бэлдмэл дэх трепонемийн гэрэлтэлтийн зэргээр үнэлдэг. Эсрэгбие байгаа тохиолдолд трепонемийн гялбаа харагдах боловч ийлдэс дэх антитрепонемал эсрэгбие байхгүй бол трепонема харагдахгүй болно. Шилэн дээр бэхлэгдсэн хатаасан цайвар трепонемийн гэрэлтэх зэргийг "нэмэх" хэсэгт ("-" -ээс "++++" хүртэл) зааж өгсөн болно. Сөрөг үр дүн - гэрэлтэх эсвэл арын түвшин байхгүй - 1+.

5. Өвчний ямар үед хэрэглэх нь дээр

Иммунофлуоресценцийн урвал (RIF) нь инкубацийн хугацаа дуусахаас эхлээд тэмбүүгийн төгсгөл хүртэл халдварын бүх үе шатанд нэлээд мэдрэмтгий байдаг. Сонгодог явц дахь тэмбүүгийн анхдагч үе нь халдвар авснаас хойш 3-4 долоо хоногийн дараа эхэлдэг. RIF нь анхдагч үеийн эхний өдрүүдэд эсвэл бүр инкубацийн төгсгөлд халдвар авснаас хойш 3 дахь долоо хоногоос эерэг болдог. RIF-ийн үр дүн бүх хугацаанд, түүний дотор хожуу хэлбэрт эерэг хэвээр байна.

RIF нь RW-ээс арай эрт эерэг болдог. Зарим мэдээллээр анхдагч серонегатив тэмбүүтэй өвчтөнүүдийн 80% -д эерэг RIF тохиолддог. Хоёрдогч үед RIF нь бараг 100% -д эерэг байдаг. Энэ нь далд тэмбүүгийн үед үргэлж эерэг бөгөөд өвчний хожуу хэлбэр, төрөлхийн тэмбүүгийн үед 95-100% эерэг үр дүн өгдөг.

6. Мэдрэмж, өвөрмөц байдал

Дархлааны флуоресценцийн урвал (RIF) нь өндөр мэдрэмж, өвөрмөц шинж чанартай бүлэг аргууд юм. RIF нь инкубацийн үеэс эхлээд тэмбүүгийн хожуу үе хүртэл халдварын бүх үе шатанд мэдрэмтгий байдаг. ДЭМБ-ын мэдээлснээр анхдагч тэмбүүгийн үед RIF-ийн мэдрэмж 70-100%, хоёрдогч болон хожуу тэмбүүгийн үед 96-100%, өвөрмөц байдал 94-100% байна. TsNIKVI-ийн мэдээлснээр тэмбүүгийн бүх хэлбэрийн RIF-ийн мэдрэмж 99.1% байна.

Туршилтын ийлдсийг сорбент - бүлгийн эсрэгбиемүүдийг (RIF-abs) холбодог хэт авианы трепонемал антигенээр урьдчилан эмчлэх замаар RIF-ийн өвөрмөц чанарыг нэмэгдүүлэх боломжтой.

7. Аргын хамрах хүрээ

RIF хамаарна:

• эрт, далд тэмбүүгийн үед баталгаажуулах урвал болгон
• Ретроспектив оношлох зорилгоор
• тэмбүүгийн далд хэлбэр, тэмбүүгийн судалгааны хуурамч эерэг үр дүнг ялгах зорилгоор.
• мэдрэлийн тэмбүүгийн баталгаажуулах тест болгон.

RIF-ийг баталгаажуулах тест болгон өргөн ашигладаг боловч техникийн хувьд тохируулахад хүндрэлтэй тул ердийн хэрэглээ, скрининг хийхэд зориулагдаагүй. RIF-ийг хийхийн тулд вивариумтай байх эсвэл эмгэг төрүүлэгч цайвар трепонемийн суспензийг худалдан авах шаардлагатай бөгөөд энэ нь урвалын боломжийг хязгаарладаг. Гэсэн хэдий ч сүүлийн жилүүдэд туршилтын системүүд дотоодын зах зээл дээр гарч эхэлсэн бөгөөд энэ нь вивариум болон эмгэг төрүүлэгч цайвар трепонемагийн өөрийн лабораторийн омог байхгүй үед урвал явуулах боломжийг олгодог.

8. Тайлбарын алдаа, худал эерэг, худал сөрөг байдлын эх үүсвэр, шалтгаан

RIF тогтоох үед LPR нь ховор тохиолддог (коллагеноз, боррелиозтой).

RIF нь тэмбүүгийн хамгийн сайн шинжилгээний нэг гэж тооцогддог бөгөөд энэ нь серодиагнозын "алтан стандарт" юм. RIBT-тэй харьцуулахад RIF нь суулгахад хялбар,

Оношлогооны өндөр ач холбогдолтой хэдий ч амьд T. pallidum ашиглах хэрэгцээ, судалгааны өндөр өртөг, үргэлжлэх хугацаа нь RIF-ийг өдөр тутмын практикт өргөн нэвтрүүлэхэд саад болж байна. Урвалыг тохируулах нь маш их хөдөлмөр юм. Үүнээс гадна RIF-ийн үр дүнгийн үнэлгээ нь субъектив юм.

RIF-ийн давуу талболон RIBT нь:

1) Өндөр мэдрэмжтэй (ялангуяа RIF-ийн хувьд);

2) Өндөр өвөрмөц байдал (ялангуяа RIBT-ийн хувьд).

RIF-ийн сул талуудболон RIBT:

1) Техникийн нарийн төвөгтэй байдал, аргын өндөр өртөг.

2) Үр дүнгийн субъектив үнэлгээ, автоматжуулалтын дутагдал;

3) Тэмбүүтэй өвчтөнд RIF болон RIBT нь бүрэн эмчилгээ хийлгэсэн ч олон жилийн турш (тэр ч байтугай насан туршдаа) эерэг хэвээр үлддэг. Тиймээс эдгээр урвалыг эдгэрэлтийг хянахад ашиглах боломжгүй юм.

10. Аргын өөрчлөлт

Практикт тэмбүүгийн серодиагностикийн хувьд иммунофлуоресценцийн урвалын хэд хэдэн өөрчлөлтийг ашигладаг бөгөөд эдгээрийг ашигладаг.

• RIF-абс- тэмбүүгийн серодиагностикийн хамгийн мэдрэмтгий арга бөгөөд энэ нь бусад урвалаас эрт эерэг болдог (халдвараас хойш 3 дахь долоо хоногоос);
• RIF-200(өвчтөний ийлдсийг илчлэх үед 200 удаа шингэлнэ) нь тэмбүүгийн серодиагностикийн маш өвөрмөц арга юм.
• RIF-10(Туршилтын ийлдэсийг 10 дахин шингэлэх) - RIF-200-ээс илүү мэдрэмтгий арга.
• RIF-tsсогтууруулах ундаагаар хийсэн.
• RIF-abs-IgM- IgM ангиллын антитрепонемаль эсрэгбиемийг эрт илрүүлэх.

1. Хамгийн өргөн тархсан өөрчлөлт RIF-абс- шингээлттэй иммунофлуоресценцийн урвал. Урвал үүсгэхийн өмнө өвчтөний ийлдэс нь хөндлөн урвал үүсгэхгүйн тулд эмгэг төрүүлэгч бус трепонемийн холимогоор шавхагдана. Хэт авианы тусламжтайгаар устгасан соёлын трепонемийн тусламжтайгаар судлагдсан ийлдэсээс бүлгийн эсрэгбиемүүдийг гаргаж авдаг бөгөөд энэ нь урвалын өвөрмөц байдлыг ихээхэн нэмэгдүүлдэг. Туршилтын ийлдсийг 1:5 харьцаатай шингэрүүлсэн хэлбэрээр ашигладаг тул RIF-abs нь маш мэдрэмтгий байдаг.

Эмнэлзүйн практикт RIF-abs хэрэглэх үндсэн заалтууд нь:

• тэмбүүгийн далд болон хожуу хэлбэрийн оношлогоо,
• CSR ба RMP-ийн хуурамч эерэг үр дүнг илрүүлэх, ялангуяа тэмбүүгийн сэжигтэй жирэмсэн болон соматик өвчтөнүүдэд;
• өвчний ретроспектив оношийг тогтоох.

RIF-abs нь эмчилгээний үр дүнг үнэлэхэд тийм ч их мэдээлэл өгдөггүй: тэмбүүгийн эсрэг хангалттай эмчилгээ хийлгэсэн өвчтөнүүдийн 85% -д RIF-ийн эерэг үр дүн олон жилийн турш үргэлжилдэг.

Энэ урвалыг тэмбүүгийн серодиагнозын "алтан стандарт" гэж нэрлэдэг. Энэ нь арбитрын хэргүүдэд ашиглагддаг боловч найдвартай үр дүнд хүрэхийн тулд туулайн 7 хоногийн настай цахирмаа өвчний Nichols-ийн T. pallidum омгийн шинэ төвлөрсөн суспенз шаардлагатай бөгөөд үүнийг хөлдөөж болохгүй.

2. ЗХУ-д үүнийг хоёр хувилбараар суулгасан - RIF-10болон RIF-200, өөрөөр хэлбэл туршилтын ийлдсийг 10 ба 200 дахин шингэлэх замаар. RIF-200 - туршилтын ийлдсийг 200 удаа шингэлж, хуурамч эерэг үр дүнг бууруулдаг. Энэ нь урвалын өндөр өвөрмөц байдлыг хангадаг боловч мэдрэмж нь бага зэрэг буурдаг. RIF-10 нь илүү мэдрэмтгий боловч өндөр өвөрмөц чанараараа тодорхойлогддог RIF-200-аас илүү өвөрмөц бус эерэг үр дүнг өгдөг. RIF-10 нь илүү мэдрэмтгий, RIF-200 болон RIF-abs нь илүү өвөрмөц байдаг.

RIF-200 ба RIF-abs-ийн мэдрэмж 84-99%, өвөрмөц байдал нь 97-99% байна.

3. RIF-tsсогтууруулах ундаагаар хийсэн. Төв мэдрэлийн тогтолцооны тодорхой гэмтлийг тодорхойлохын тулд тархи нугасны шингэнийг бүхэлд нь ашиглан урвалыг тогтооно.

4. Урвал RIF-abs-IgM IgM ангиллын антитрепонемаль эсрэгбиемийг эрт илрүүлэхэд зориулагдсан. Энэ урвал нь төрөлхийн тэмбүү, тэмбүүгийн эрт үеийн хэлбэрийг оношлох, дахин халдвар авсан болон сероралапсыг ялгахад ашиглаж болно.

Энэ урвалын хоёр өөрчлөлт мэдэгдэж байна:

– Хүний эсрэг флюресцент глобулины оронд урвалын хоёр дахь үе шатанд IgM-ийн эсрэг коньюгат (хүний ​​IgM-ийн флюресценээр тэмдэглэгдсэн эсрэгбие) хэрэглэхэд үндэслэсэн FTA-ABS-IgM;

- RIF-abs-IgM-ийн орос хувилбар нь сорбентыг цусны ийлдсэнд нэмж, IgG эсрэгбиемүүдийг зайлуулж, RIF-abs-ийг үлдсэн IgM эсрэгбиемүүдтэй хамт байрлуулдаг.

Үндсэн заалтууд RIF-abs-IgM-ийн найрлагад дараахь зүйлс орно.

- хүүхдийн арьс, салст бүрхэвч дээр төрөлхийн тэмбүүгийн илэрхий илрэл байхгүй тохиолдолд төрөлхийн тэмбүүгийн серодиагностик;

- RIF-abs-IgM сөрөг, RIF-abs эерэг байх тэмбүүгийн дахин халдвар, эмнэлзүйн ийлдэс судлалын эсвэл ийлдэс судлалын дахилтыг ялгах оношлогоо;

- эрт олдмол буюу төрөлхийн тэмбүүгийн эмчилгээний үр дүнг үнэлэх: хангалттай эмчилгээ хийсний дараа RIF-abs-IgM дараагийн 3-6 сарын дотор сөрөг болно.

Энэ урвалыг төрөлхийн тэмбүүг илрүүлэхэд ашиглаж болно. Том IgM молекулууд эрүүл ихэсээр дамжиж чадахгүй гэдгийг мэддэг. Тиймээс, цайвар трепонема өвчний эсрэг M ангиллын эсрэгбие нь ихэсийн саад тотгорыг зөрчсөний улмаас эсвэл тэмбүүтэй хүүхдийн бие махбодид үүсдэг. IgM ангиллын эсрэгбие нь тэмбүүтэй өвчтөний цусанд өвчний эхний долоо хоногт аль хэдийн илэрч, IgG ангийн эсрэгбиемүүд хожим гарч ирдэг. Хоёр ангиллын эсрэгбиемийг тусад нь тодорхойлох нь хүүхдийн төрөлхийн тэмбүүг оношлоход маш их хэрэгтэй байдаг, учир нь амьдралын эхний сард хүүхдэд IgM ангиллын эсрэгбие байгаа нь тэмбүүтэй хүүхдийн бие махбодоос үүсдэг болохыг илтгэнэ. Харин зөвхөн IgG эсрэгбие илэрсэн нь эхээс сүүлчийнх нь гарал үүслийг илтгэнэ.

Урвалын мэдэгдэл 19S(IgM)-RIF-абсҮүнээс илүү том 19S IgM молекулуудыг гель шүүлтүүрээр урьдчилан ялгах үйл ажиллагаа орно

жижиг 7S IgG молекулуудын фракцууд. Зөвхөн 19S IgM фракц агуулсан цусны ийлдсийн RIF-abs урвалын цаашдын судалгаа,

алдааны бүх боломжит эх үүсвэрийг арилгадаг. Гэхдээ энэ урвалыг бий болгох техник нь нарийн төвөгтэй бөгөөд цаг хугацаа их шаарддаг бөгөөд тусгай тоног төхөөрөмж, мэргэжилтнүүдийн сургалтыг шаарддаг.

Дархлааны наалдамхай урвал (RIP, TPIA - Treponema pallida immunoadherence).

Энэ урвал нь 1912 онд Рикенбергийн тодорхойлсон үзэгдлийг ашиглахад суурилдаг. RIP нь тэмбүүтэй өвчтөний ийлдэсээр мэдрэмтгий болсон эд эсийн хоруу чанартай трепонема нь комплемент ба эритроцитуудын дэргэд эритроцитын гадаргууд наалдаж, центрифугийн явцад тэдэнтэй хамт тунадас руу аваачиж алга болдогт суурилдаг. супернатант.

Урвалыг бий болгохын тулд дараахь бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг ашиглана: сорилтын ийлдэс, эсрэгтөрөгч, комплемент, донорын эритроцит, натрийн хлоридын изотоник уусмал. Антиген болгон Николсын омгийн цайвар трепонемийн суспензийг ашигладаг.

Тэмбүүгийн серодиагностикийн хувьд энэ тестийг 50-60-аад оны үед дотоодын болон гадаадын зохиолчид судалж байжээ. Оношлогооны тест болох RIP-ийн үнэ цэнийн талаарх мэдээлэл хоорондоо зөрчилдөж байна. Урвал нь хамгийн дээд нарийвчлалыг шаарддаг, учир нь найрлагыг буруу асгасан, бэлдмэл дэх туршилтын материалын илүүдэл эсвэл дутагдалтай тул найдваргүй үр дүн гарсан.

Орос улсад өргөн хүрээний судалгааг Л.В. Сазонова, Николсын омгийн эмгэг төрүүлэгч цайвар трепонемийн шинэхэн бэлтгэсэн суспензийг ашиглан RIP ба RIT-д ижил төстэй үр дүнд хүрсэн. Гэсэн хэдий ч фенолоор халаасан эсвэл хадгалсан эсрэгтөрөгчийг хэрэглэх нь урвалын үр дүнг эрс гажуудуулж, эсрэгтөрөгчийг тогтворгүй болгосон. RIT L.V. орлуулахын тулд энэ туршилтыг санал болгож байна. Сазонова үүнийг боломжгүй гэж үзсэн.

Г.П. Авдеева эсрэгтөрөгчийг бэлтгэхдээ бусад температур, цаг хугацааны горимыг ашиглан RIP-ийн судалгаанд өөр өөр үр дүнд хүрсэн. Түүний хэлснээр энэ урвалын мэдрэмж нь KCP ба RIT-ийн мэдрэмжээс өндөр боловч RIF-ээс бага зэрэг доогуур, RIP, RIT, RIF-ийн өвөрмөц чанар ойролцоо байна.

Гэсэн хэдий ч RIP-ийн эсрэгтөрөгчийн үйлдвэрлэлийн дутагдал нь энэхүү туршилтыг илүү өргөн хүрээнд судалж, практикт нэвтрүүлэх боломжийг олгосонгүй.

Идэвхгүй гемагглютинацийн RPHA урвал

Идэвхгүй гемагглютинацийн урвал (RPHA)лабораторийн практикт баттай үндэслэсэн ийлдэс судлалын нийтлэг шинжилгээ юм. судалгааны үр ашгийн нэлээд өндөр түвшинд байна.

1. RPGA аргын түүх

Г.Блюментал, В.Бахман (1932) нар анх удаа тэмбүүгийн оношлогоонд RPHA-г ашигласан тухай мэдээлсэн. 1965 онд тэмбүүгийн оношлогоонд шууд бус буюу идэвхгүй гемагглютинацийн урвалыг санал болгосон. Өөр өөр антиген ашиглан урвалын өөрчлөлтийг 1965 - 1967 онд Т.Ратлев мэдээлсэн. RPGA-ийн бичил өөрчлөлтийг Сох Р.М. болон 1969 онд хамтран зохиогчид. Анхны арилжааны туршилтын системийг Японы эрдэмтэд Томисава нар боловсруулсан. аль. 1969 онд

2. RPGA аргын зарчим

Антигенээр "ачаалагдсан" эритроцитуудын бэлтгэсэн нэгэн төрлийн суспензээс эсрэгбие агуулсан туршилтын ийлдсийг нэмэхэд ширхэгтэй тунадас үүснэ. Үүссэн тунадас нь эсрэгбиемүүдээр "наасан" эритроцитуудаас тогтдог бөгөөд үүнийг "наалдсан" гэж нэрлэдэг. "гемагглютинат". Эритроцитын суспензийг урьдчилан бэлтгэж, оношлогооны шинжилгээний системийн нэг хэсэг болгон нийлүүлдэг.

Цусны улаан эсийг нааж, гадаргуу дээр нь эсрэгтөрөгч агуулагдах үйл явцыг "гемагглютинаци" гэж нэрлэдэг. Холболт нь тусгай эсрэгбие (агглютинин) -ийн нөлөөн дор үүсдэг. урвал гэж нэрлэдэг "идэвхгүй", учир нь Эритроцитуудын эсрэгтөрөгч нь хариу үйлдэл үзүүлэхгүй бөгөөд эритроцитууд нь зөвхөн туслах функцийг гүйцэтгэдэг.

Идэвхгүй (шууд бус) гемагглютинацийн урвал нь эритроцитыг (Грек хэлнээс háima - цус) бусад бөөмс биш харин эсрэгтөрөгчийн тээвэрлэгч болгон ашигладаг наалдуулах урвалын нэг төрөл юм. Ерөнхийдөө эсрэгбиеийн нөлөөн дор наалдуулах урвалын үед микроб эсвэл бусад эсүүд хоорондоо наалдаж, тунадас үүсгэдэг - заавал эритроцитууд биш, жишээлбэл, латекс тоосонцор, бактери эсвэл бусад антиген агуулсан корпускуляр хэсгүүд.

Тэмбүү өвчнийг оношлох идэвхгүй гемагглютинацийн урвалын хувьд цайвар трепонемийн эсрэгтөрөгчөөр бүрсэн хуц эсвэл шувууны эритроцитыг эсрэгтөрөгч болгон ашигладаг. Тодорхой эсрэгбие агуулсан ийлдэс нэмэхэд эритроцитууд хоорондоо наалддаг (агглютинаци).

RPHA-ийн урвалыг дархлаа судлалын арга гэж нэрлэдэг, учир нь. Энэ нь эмгэг төрүүлэгч цайвар трепонемагийн эсрэгтөрөгчийн эсрэгбиетэй өвөрмөц харилцан үйлчлэлд суурилдаг. "Түлжээний онол"-ын дагуу наалдуулах нь гадаргуугийн эсрэгтөрөгчийн молекулуудыг эсрэгбиеийн молекулуудтай (иммуноглобулин) "хөндлөн холбох" үр дүн юм.

3. Идэвхгүй гемагглютинацийн урвалын тухай мэдэгдэл

RPHA-ийг хуванцар шахмал эсвэл өвчтөний цусны ийлдсийг шингэлсэн туршилтын хоолойд хийж, эритроцитын оношилгоо нэмдэг.

Антигенийг эритроцитуудтай нэгтгэх үйл явцыг мэдрэмтгий болгох ба ийм аргаар гаргаж авсан хиймэл корпускуляр антигенийг мэдрэмтгий эритроцит гэж нэрлэдэг. Эритроцитийн оношилгоог эсрэгтөрөгчөөр мэдрэмтгий эритроцит гэж нэрлэдэг.

Оношлогоо бэлтгэхийн тулд эхлээд формалин, дараа нь таннинаар эмчилсэн хуц эсвэл шувууны эритроцитыг (ихэвчлэн тахианы мах) ашигладаг бөгөөд тэдгээр нь эмгэг төрүүлэгч цайвар трепонема (Николсын омог) эсвэл рекомбинант цайвар трепонема уураг (TpN15, TpN17) -ийн хэт авианы антигенээр мэдрэмтгий байдаг. TpN47). Өсгөвөрлөсөн treponema pallidum-ийн хэт авианы эсрэгтөрөгчөөр мэдрэмтгий хонины эритроцитыг мөн ашиглаж болно.

Зөвхөн ийлдэс (плазмыг бүү хэрэглээрэй). Цус задарсан, үүлэрхэг дээж нь тохиромжгүй. Мэдрэмжгүй эритроцитууд нь сөрөг хяналт болдог (эритроцитын эсрэг эсрэгбие байгаа эсэхийг үгүйсгэх). Цуврал бүрд эерэг ба сөрөг хяналтыг ашигладаг.

Судалгаанд хамрагдсан цусны ийлдэс, эритроцитуудын дээжийг дархлаа судлалын шахмал дахь нүхэнд (эсүүд) оруулна. Хэрэв өвчтөний цусны ийлдэс нь өвөрмөц анти-трепонемаль эсрэгбие агуулсан бол туршилтын ийлдэсийг эсрэгтөрөгчтэй цооногоор нэмэхэд тээвэрлэгчдийн гадаргуутай (эритроцит) холбоотой эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолбор үүсдэг. Харааны хувьд энэ нь цусны улаан эсийг наалдуулж, өөрөөр хэлбэл нүцгэн нүдэнд харагдах гемагглютинацаар илэрдэг. Таталцлын нөлөөн дор аажмаар доошилдог "эсрэгбие-эсрэгтөрөгч-эритроцит" дархлааны цогцолборууд нь худгийн ёроолын бүх гадаргуу дээр тархаж, "урвуутай шүхэр" -ийн онцлог шинж чанарыг бүрдүүлдэг.

Туршилтын дээжинд агуулагдах эсрэгбиеийн хэмжээнээс хамааран "урвуутай шүхэр" дүрс нь худгийн ёроолын бүх гадаргууг эзэлдэг дээд хэмжээнээс түүний төв, хамгийн доод хэсэгт байрлах жижиг хэсэг хүртэл (гэгээрсэн байдлаар) өөрчлөгддөг. төв ба захын дагуу суурьшсан эритроцитуудын илүү эрчимтэй цагираг үүсэх).

Дээжинд тусгай эсрэгбие байхгүй эсвэл урвалд хяналтын (бүрэн бүтэн) эритроцитыг нэмсэн тохиолдолд дархлааны цогцолбор үүсдэггүй. Үүний зэрэгцээ, эритроцитууд аажмаар худгийн ёроолын хамгийн доод цэгт цугларч, авсаархан цэг эсвэл "товчлуур" хэлбэрээр дүрсийг үүсгэдэг, заримдаа төвд бага зэрэг гэгээрсэн байдаг.

Хэрэв хүний ​​цусны ийлдэс нь эритроцитын эсрэг эсрэгбие агуулдаг бол "шүхэр" нь ямар ч тохиолдолд - эритроцитууд болон хяналтын эритроцитуудтай урвалд орно. Энэ тохиолдолд өвөрмөц антитрепонемаль эсрэгбиемийг илрүүлэхийн тулд бусад эмнэлгийн технологийг ашиглахыг зөвлөж байна.

Сийвэнгийн шингэрүүлэлтээр арилдаг прозоны үзэгдэл (илүүдэл эсрэгбиеийн улмаас хариу үйлдэл үзүүлэх боломжгүй) боломжтой.

4. Идэвхгүй гемагглютинацийн урвалын үр дүнг тооцох

RPGA-ийн үр дүнг микро аргыг тохируулахдаа 60-120 минутын дараа, макровариантыг тохируулахдаа 2-4 цагийн дараа эсвэл дараагийн өдөр нь нүдээр харгалздаг. Илүү том (цөмтэй) шувууны эритроцитыг хэрэглэх үед илүү тодорхой дүр зургийг олж авах бөгөөд үр дүнг эрт дээр нь тэмдэглэнэ.

Титрийг тодорхойлох боломжтой (өндөр титр TPHA ≥ 1:2 560).

Судалгааны үр дүнг 4+ системийн дагуу ("-" -ээс "++++" хүртэл) үүссэн хальсны хэмжээгээр үнэлдэг. Аглютинаци үүсэх үед эритроцитууд нүхний гадаргуу дээр "шүхэр" хэлбэрээр байрладаг бөгөөд сөрөг үр дүнд эритроцитууд чөлөөтэй доошоо гулсаж, нүхний төвд "товчлуур" хэлбэрээр хуримтлагддаг. ".

RPGA-ийн үр дүнгийн нийтээр хүлээн зөвшөөрөгдсөн үнэлгээ:

4+ - эерэг RPHA. "Шүхэр" хэлбэрийн наалдсан эритроцитууд нь нүхний бүх гадаргууг жигд жигдрүүлдэг;

3+ - эерэг RPHA. Эритроцитууд нүхний гадаргууг бүхэлд нь хамардаг боловч тэдгээрийн зарим нь төв рүү "гулсдаг". Үүний зэрэгцээ ордын захын дагуу мэдэгдэхүйц цагираг үүсдэг;

2+ - сул эерэг RPHA. Эритроцитууд нь худгийн доод хэсгийн жижиг хэсэгт хальс үүсгэж, төв хэсэгт мэдэгдэхүйц гэгээрсэн эритроцитийн тунадасны өтгөн цагираг үүсгэдэг;

1+ - тодорхойгүй RPHA, эритроцитууд нь худгийн ёроолд бүрхэг ирмэг бүхий сул тунадас үүсгэдэг, төвд нь бага зэрэг люмен;

(–) - сөрөг RPHA, бүх эритроцитууд худгийн ёроолд нягт тунадас ("товчлуур" эсвэл цагираг) хэлбэрээр оршдог, цэвэр орчны дэвсгэр дээр (хүрээлэн буй мөхлөгт тунадасгүй).

Гадаадын практикт RPGA-ийн үр дүнг реактив (агглютинат үүсэх тохиолдолд), сул реактив (хэрэв тогтоц нь ач холбогдолгүй бол) болон урвалд ордоггүй (хэрэв наалдац ажиглагдаагүй бол) гэж үнэлдэг.

Урвалын үр дүнгийн бүртгэлийг тусгай анализатор ашиглан автоматаар хийж болно. Чанарын судалгаанаас гадна бүх тестийн систем нь титр тодорхойлох тоон шинжилгээг өгдөг.

5. Өвчний ямар үед RPHA хэрэглэх нь дээр

RPHA нь анхдагч үеийн дундуур эерэг болж (халдвар авснаас хойш 7-8 долоо хоног, хатуу шанкр илэрсэнээс 3-4 долоо хоног) эмчилгээ хийлгэснээс хойш олон жилийн турш эерэг хэвээр байна.

Судалгаанд хамрагдсан ийлдэс дэх трепонемийн эсрэгбие нь маш өндөр байвал (энэ нь хоёрдогч тэмбүүгийн хамгийн онцлог шинж юм) TPHA-ийн хуурамч сөрөг үр дүн ("прозон" үзэгдэл гэж нэрлэгддэг) боломжтой байдаг.

Тэмбүү өвчнөөр удаан эдгэрсэн хүмүүсийн цусанд агглютинины өвөрмөц эсрэгбиемүүд илэрдэг тул дахин халдварын ялгавартай оношлогоо, халдварт үйл явцын хүнд байдлыг тодорхойлох зорилгоор RPGA-ийг хэрэглэхийг зөвлөдөггүй.

RPGA нь эдгэрэлтийг хянахад ашиглагддаггүй, учир нь. эдгэрснээс хойш олон жилийн дараа эерэг хэвээр байж болно. Үүний зэрэгцээ эмчилгээний үр дүнг хянах, эсрэгбиеийн титрийн бууралтын динамикийг судлах нэмэлт (RMP эсвэл RPR-д) арга болгон ашиглаж болно. Үүний урьдчилсан нөхцөл нь өвчтөний анхны (эмчилгээний өмнөх) үзлэг, мөн ижил лабораторид хийсэн судалгаатай ижил RPHA тестийн системийг ашиглах явдал юм.

6. RPHA-ийн мэдрэмж ба өвөрмөц байдал

RPHA нь өндөр мэдрэмжтэй, өвөрмөц тест гэж тооцогддог. Энэ урвал нь тэмбүүгийн бүх хэлбэрийн оношлогооны үнэ цэнэтэй тест боловч өвчний дэвшилтэт хэлбэрт онцгой мэдрэмжтэй байдаг. RPHA-ийн мэдрэмж нь өвчний үе шатаас хамаарч өөр өөр байдаг. Анхдагч тэмбүүгийн үед RPHA-ийн мэдрэмж 76% (ба түүнээс дээш), хоёрдогч тэмбүүтэй бол 100% хүртэл байдаг. Далд эрт - 97%, хожуу тэмбүү - 94%, өвөрмөц байдал 98-100% байна. Өвчний шинэ хэлбэрийн мэдрэмж бага байгаа нь хожуу агглютинин үүсдэгтэй холбоотой юм.

"TsNIKVI Roszdrav" төрийн байгууллагын мэдээлснээр тэмбүүгийн янз бүрийн хэлбэрийн оношлогоонд RPHA-ийн мэдрэмж 99.4% байна. Ихэнх судлаачид RPHA-ийн өвөрмөц байдлыг 98-99% гэж тэмдэглэдэг.

Мэдрэмж, өвөрмөц байдлын хувьд RPHA нь дутахгүй, хожуу хэлбэр, төрөлхийн тэмбүүгийн хувьд RIF болон RIBT-ээс ч давж гардаг.

7. RPGA аргын хэрэглээний хамрах хүрээ

TPHA нь скрининг болон баталгаажуулах тест болгон ашиглаж болно; эсрэгбиеийн титрийг тооцоолох хагас тоон хувилбарт хэрэглэж болно. RPHA-г тохируулах тоон арга, микрометод, түүнчлэн автомат микрогемагглютинацийн урвалыг боловсруулсан.

8. RPGA-ийн онцлог, давуу болон сул талууд

Уран зохиолын дагуу RPGA нь дэлхийн ихэнх оронд эмнэлзүйн практикт тэргүүлэх байр суурийг эзэлсээр ирсэн. TPHA нь гадаадад БЗДХ-ын эмнэлгүүдэд хамгийн өргөн хэрэглэгддэг шинжилгээ юм.

RPGA техникийг гүйцэтгэхэд хялбар, тусгай тоног төхөөрөмж шаарддаггүй: үүнийг тохируулахын тулд зөвхөн гемагглютинацийн хавтан хэрэгтэй. Судалгаа нь удаан хугацаа шаарддаггүй; урвал нь маш мэдрэмтгий бөгөөд өвөрмөц юм. Эмнэлзүйн практикт энэ аргыг туршиж үзэхэд энэ нь маш энгийн, хямд, мэдрэмжтэй болохыг харуулсан. ELISA-ийн нэгэн адил RPHA нь гүйцэтгэхэд хялбар, өндөр мэргэшсэн боловсон хүчин, тусгай тоног төхөөрөмж шаарддаггүй, автоматжуулалт хийх боломжтой.

RPGA тестийн давуу талууд:

• тохируулах, тайлбарлахад хялбар,
• тусгай тоног төхөөрөмж шаарддаггүй;
• үр дүнд хүрэх хугацаа - 45 минут,
• масс скрининг хийхэд тохиромжтой (1:20-ийн шингэрүүлэлтэнд ердөө 25 мкл ийлдэс хэрэгтэй),
• стандартчиллын өндөр түвшин,
• дотоод хяналт байгаа эсэх,
• удаан хадгалах хугацаа
• зөвшөөрөгдөх үнэ
• нягтлан бодох бүртгэлийг автоматжуулах боломж.

Мөн RPGA-ийн сул талуудыг тэмдэглэх нь зүйтэй.

• эритроцитын эсрэг эсрэгбие байгаа тохиолдолд өвөрмөц бус урвал үүсэх магадлал;
• тэмбүүгийн үе шат ба титр хоорондын хамаарал байхгүй;
• дараа нь тэмбүүгийн эхний үе шатанд эерэг хариу үйлдэл үзүүлэх;
• архи, мансууруулах бодис донтсон хүмүүст хуурамч эерэг хариу үйлдэл үзүүлэх магадлал;
• лабораторид чичиргээ, температурт мэдрэмтгий байдал.

RIBT болон RIF-тай харьцуулахад RPGA-ийн давуу талууд нь:

• үйлдвэрлэлийн туршилтын системийг ашиглах,
• урвалыг автоматжуулах боломж;
• амьд цайвар трепонематай ажиллах шаардлагагүй,
• вивариумын хэрэгцээг арилгадаг.

9. RPHA-ийн тохиргоонд гарсан алдааны эх үүсвэр, шалтгаан, хуурамч эерэг, хуурамч сөрөг үр дүн

Идэвхгүй гемагглютинацийн урвал нь харьцангуй энгийн судалгаа юм; Үүнийг хийхдээ оношилгооны үйлдвэрлэгчдийн бүх зөвлөмж, клиник оношлогооны лабораторид ажиллах дүрмийг дагаж мөрдөх шаардлагатай. Хийсэн алдаа нь хариу урвалын хуурамч сөрөг, худал эерэг үр дүнгийн аль алиныг нь харуулах, бүртгэхэд хүргэдэг. RPGA-ийн хуурамч эерэг үр дүн нь хүний ​​хүчин зүйл, биологийн хүчин зүйлийн нөлөөллөөс шалтгаалж болно.

Хуурамч эерэг үр дүнг авч болно

• бэлгийн замын бус трепонематоз бүхий өвчтөнүүдийн цусны ийлдэсийг судлахад;
• ревматоид хүчин зүйлийн улмаас
• Төрөл бүрийн системийн болон эм, эмээс үүдэлтэй бодисын солилцооны эмгэгийн үед үүсдэг трепонемын эсрэгтөрөгчтэй эсрэгбие нь харилцан үйлчилдэг тул;
• иммуноглобулины хэвийн бус түвшинтэй холбоотой;
• нярайд - ураг эсвэл хүүхдийн биед эхийн IgG-тэй IgM эсрэгбие үүссэнтэй холбоотой бөгөөд энэ нь үр дүнг тайлбарлах, төрөлхийн тэмбүүгийн оношлогоонд хүндрэл учруулдаг.

Судалгаанд хүний ​​оролцооны хүчин зүйлийн нөлөөллөөс үүдэлтэй алдаа:

• бохирдсон микроплитууд
• буруу соруул
• лабораторид чичиргээ
• лабораторийн агаарын температур температурын хязгаараас гадуур байна: 18-25 градус

RPGA-ийн тохиргоонд найдваргүй үр дүнд хүргэдэг хамгийн нийтлэг техникийн алдаанууд нь:

• найрлагыг буруу шингэлэх,
• температурын зөрчил,
• урвалжийн инкубацийн хугацааг зөрчих,
• таблетад урвалж хэрэглэх нөхцлийг зөрчсөн,
• уусмалын рН нь шаардлагатай хэмжээтэй нийцэхгүй байх;
• лабораторийн шилэн савны бохирдол.

Дараах техникийн цэгүүд нь RPGA тохируулах үед алдааны эх үүсвэр байж болно.

• хяналтын цусны ийлдсийн урвалын томъёололд оруулахгүй байх;
• хэрэглэхийн өмнө хангалтгүй холилдсоны улмаас оношлогооны хэсэгт эритроцитуудын жигд бус концентраци;
• оношлогоо, хяналтын эритроцитыг хадгалах нөхцөл, нөхцлийг зөрчсөн; хугацаа нь дууссан иж бүрдэл ашиглах;
• урвал үүсгэх үед бохирдсон туршилтын хоолой, пипеткийн үзүүр, соруур, дархлаа судлалын хавтан, уусмалыг ашиглах;
• цусны ийлдсэн дээжийн анхны шингэрүүлэлтийн алдаа;
• дараалсан давхар шингэрүүлэлт хийхэд хангалтгүй нарийвчлал;
• температурын горим, инкубацийн хугацааг дагаж мөрдөхгүй байх;
• инкубацийн үед гадны чичиргээ, дархлаа судлалын хавтанг сэгсрэх;
• хяналтын эритроцитуудтай судалгаа хийхээс татгалзсанаар илэрхийлэгдсэн RPGA-ийг тогтоох аргыг зөрчсөн.

Өвөрмөц бус эритроцит агглютинацийг (RPHA) үүсгэх чадвартай антикоагулянт агуулсан цусны сийвэнг хэрэглэх нь тайлбарлах боломжгүй үр дүнд хүргэж болзошгүй юм.

Хуурамч эерэг ба хуурамч сөрөг үр дүнгийн тоо бусад ийлдэс судлалын сорилтой харьцуулахад бага байна. RPHA-ийн нөхцөлд LPR нь ховор тохиолддог бөгөөд трепонематоз (яв, бежель, пинт) боломжтой байдаг. Түүнчлэн, хуурамч эерэг үр дүн (нийт 1% -иас бага) хар тамхинд донтсон хүмүүс, халдварт мононуклеоз, боррелиоз, уяман өвчтэй өвчтөнүүд, коллагеноз, элэгний хатуурал, лимфосаркома, мөн жирэмсэн эмэгтэйчүүдэд бүртгэгдсэн.

Урвалын хуурамч сөрөг үр дүн нь IgM ба IgG эсрэгбиемүүдийн хоорондын өрсөлдөөнөөс үүдэлтэй байж болно. ХДХВ-ийн халдвартай өвчтөнүүдэд хуурамч сөрөг үр дүн гарах боломжтой.

10. RPHA аргын өөрчлөлтүүд

RPGA тохиргооны микро болон макро өөрчлөлтүүд байдаг бөгөөд эхнийх нь хэмнэлт, тохиргооны хурд, үр дүнг харгалзан үздэг тул ихэвчлэн ашиглагддаг.

Нэмж дурдахад зургийн дүн шинжилгээ хийх автомат оношилгооны цогцолборыг боловсруулсан бөгөөд энэ нь үр дүнгийн тоон автомат үнэлгээг хийж, олж авсан өгөгдлийг тайлбарлахдаа субъектив байдлыг арилгах боломжтой болсон. Техник хангамж-програм хангамжийн цогцолбор нь зургийг таньж, өгөгдлийг боловсруулж, хариултыг харьцангуй нэгжээр өгдөг.

Уншигчид болон автомат анализаторуудыг мөн RPGA үр дүнг автоматжуулахад ашигладаг.

TPPA (Treponema pallidum particle agglutination) - Treponema pallidum-ийн эсрэгбиемүүдийг илрүүлэх хиймэл бөөмсийг наалдуулах тест.

TPPA тестийн товч тайлбар

Одоогоор идэвхгүй гемагглютинацийн аргын өөрчлөлт - TPRA (Treponema pallidum particle agglutination) нь тэмбүү өвчнийг оношлоход хэрэглэгддэг бөгөөд цайвар трепонема эсрэгтөрөгч нь желатин хэсгүүдэд бэхлэгддэг. Хиймэл полимер тоосонцор нь биологийн идэвхийг тодорхойлдог өөрийн эсрэгтөрөгчгүй тул тэдгээрт суурилсан тэмбүүгийн серодиагнозын иж бүрдлийг илүү боловсронгуй гэж үзэх үндэслэлтэй юм. Биологийн хувьд идэвхгүй хиймэл тоосонцорыг ашиглах нь бусад зөөвөрлөгчдөд түгээмэл тохиолддог өвөрмөц бус агглютинацийг багасгадаг.

TPPA нь эмгэг төрүүлэгч трепонемийн янз бүрийн төрөл, дэд зүйлүүдийн эсрэгбиеийн ийлдэс судлалын оношлогоонд ашиглагддаг. Энэ шинжилгээгээр тэмбүү, пинт, бежел, гахайн өвчин үүсгэгч бодисуудын эсрэгбиемүүдийг илрүүлэх боломжтой.

Судалгааны процедур нь маш энгийн бөгөөд тусгай тоног төхөөрөмж шаарддаггүй - стандарт "U" хэлбэрийн микропластикуудыг ашигладаг. Туршилт нь өвчтөний цусны ийлдсэнд илэрсэн эсрэгбие болох T. pallidum эсрэгтөрөгчөөр мэдрэмтгий желатин хэсгүүдийн наалдац дээр суурилдаг.

TPPA нь цөөн тооны сорьц болон массын скрининг аль алинд нь хэрэглэхэд тохиромжтой трепонемал тест юм. TPPA-г гадаадад баталгаажуулах тест болгон ашигладаг бөгөөд MHA-TP (T. pallidum-ийн эсрэгбиеийн микрогемагглютинацийн шинжилгээ) -ийг орлуулах зорилгоор ашигладаг.

TPPA тестийн мэдрэмж нь 85% -аас 100% хооронд байдаг бол өвөрмөц байдал нь 98% -аас 100% хооронд байдаг. Анхдагч тэмбүүгийн TPPA-ийн мэдрэмж 88%, хоёрдогч болон хожуу үеийн тэмбүүгийн хувьд 98%-100% байна.

Хэрэв TPPA-ийг тэмбүүг оношлоход ашигладаг бол бусад төрлийн трепонема (T. pallidum endemicum, pertenue, carateum гэх мэт) эсрэгбие нь хуурамч эерэг үр дүнг үүсгэж болзошгүй. Туршилтыг эхлүүлэхийн өмнө ийлдсийн дээжээс эдгээр эсрэгбиемүүдийг арилгах хэд хэдэн арга байдаг.

TPPA тестийн зарчим

TPPA нь хүний ​​ийлдэс эсвэл сийвэн дэх желатин хэсгүүдийг идэвхгүй наалдуулах арга юм. Эмгэг төрүүлэгч трепонемийн эсрэгбие агуулсан ийлдэс нь хэт авиан шинжилгээнд хамрагдсан Николсын омгийн цайвар трепонемийн эсрэгтөрөгчтэй мэдрэмтгий желатин хэсгүүдтэй урвалд ордог. Урвалын үр дүнд микротитр хавтангийн нүхэнд наалдсан желатин хэсгүүдийн гөлгөр хальс үүсдэг.

Хэрэв эсрэгбие байхгүй бол хэсгүүд нь хавтангийн худгийн ёроолд суурьшиж, наалдаагүй хэсгүүдийн нягт "товчлуур" үүсгэдэг. Мэдрэмжгүй желатины тоосонцор бүхий хяналтын цооногууд нь ийлдэс тус бүрт ийм нягт "товчлуур" харуулах ёстой, өөрөөр хэлбэл наалдуулахгүй.

TPPA тестийн хэрэглээ

TPPA нь хүн амын бүлгүүдийг тэмбүүгээс урьдчилан сэргийлэх зайлшгүй үзлэг (скрининг) болон арьс-венерологийн мэргэшсэн байгууллагуудад адилхан амжилттай ашиглаж болох бүх нийтийн тест юм. TPPA сорилын давуу тал нь өндөр мэдрэмжтэй байдаг бөгөөд энэ нь саяхныг хүртэл тэмбүүгийн серодиагнозын "алтан стандарт" байсан сонгодог сорилтуудаас дутахгүй юм. Туршилтын бусад давуу талууд нь өндөр давтагдах чадвар, түүнчлэн урвалыг тохируулах энгийн, хурдтай байдаг.

TPPA тестийг VDRL тест гэх мэт тэмбүүгийн трепонемал бус скрининг шинжилгээний эерэг үр дүнг баталгаажуулах, трепонемаль бус тест сөрөг гарсан боловч хожуу тэмбүүгийн шинж тэмдэг илэрсэн өвчтөнүүдийг үнэлэхэд ашигладаг. TPPA-ийг тэмбүүгийн скринингийн цорын ганц тест болгон ашиглахыг зөвлөдөггүй.

Нэмж дурдахад TPPA наалдуулах тестийг мэдрэлийн тэмбүүгийн оношлогоонд тархи нугасны шингэний дээжийг судлахад ашиглаж болно. Энэ тохиолдолд бусад ийлдэс судлалын шинжилгээний нэгэн адил үр дүнг тайлбарлахдаа өвчний бусад үзүүлэлт, шинж тэмдгүүдтэй заавал хослуулан хийх ёстой.

TPPA туршилтын үр дүн

Үр дүнг "нэмэх" системийн дагуу (-) -ээс (2+) үнэлнэ. Туршилтын үр дүн нь нүцгэн нүдэнд харагдах бөгөөд дараах байдлаар тайлбарлагдана.

Аглютинацийн зэрэг	Туршилтын оноо	Тайлбар
Аглютинжуулсан тоосонцор нь хавтангийн ёроолыг сайтар тэгшлэнэ	2+	Эерэг
Гадна талын тэгш бус ирмэг ба захын наалдуулалт бүхий мэдэгдэхүйц том цагираг	1+	Эерэг
Бөөмүүд нь төв хэсэгт цоорхойтой, гөлгөр гөлгөр авсаархан цагираг үүсгэдэг гадаад хил	±	сул эерэг
Бөөмүүд нь цооногийн төвд авсаархан цагираг үүсгэдэг бөгөөд төвд нь бага зэрэг завсарлагатай, гөлгөр гаднах хил хязгаартай байдаг.	–	Сөрөг
Бөөмүүд нь гөлгөр гаднах хил бүхий нүхний төвд "товчлуур" үүсгэдэг	–	Сөрөг

Дээрх тайлбартай нийцэж байгаа эсэхийг тодорхойлохын тулд үр дүнг бүртгэнэ. Тодорхой бус үр дүн (±) харуулсан дээжийг дахин шалгах шаардлагатай. Хэрэв дээж нь хэд хэдэн TPPA туршилтанд тодорхойгүй үр дүн үзүүлсэн тохиолдолд бусад аргыг ашиглан судалгаа хийхийг зөвлөж байна.

Шинжилгээний үр дүнг тусад нь авч үзэх ёсгүй. Жишээлбэл, халдварын эхний үе шатанд эсрэгбиеийн тоо хэтэрхий бага хэвээр байгаа тул TPPA болон бусад олон аргууд нь мэдрэмжгүй байдаг. Тиймээс тэмбүүгийн сэжигтэй тохиолдолд шинжилгээний хариу сөрөг гарсан ч дээжийг дахин шинжлүүлэх шаардлагатай. Оношийг тогтоохын тулд өвчтөнд байгаа эмнэлзүйн шинж тэмдгүүд, эмнэлзүйн түүх болон бусад өгөгдлийг харгалзан үзэх шаардлагатай.

TPHA тестийн нэгэн адил сийвэнгийн дээжинд эсрэгбиеийн титр хэт өндөр байвал TPPA-ийн хувьд прозоны үзэгдэл ба хуурамч сөрөг үр дүн ажиглагдаж болно.

ЭЛИЗА - ЭЛИЗА

Enzyme immunoassay (ELISA; The enzyme linked immunosorbent assay, ELISA) нь халдварт өвчний ийлдэс судлалын оношлогооны олон аргуудын нэг юм. Тэмбүүгийн серодиагностик дахь ферментийн дархлааны шинжилгээ (ELISA) нь цайвар трепонемийн эсрэгтөрөгчийн эсрэг M, G, A ангиллын эсрэгбие (IgM, IgG, IgA) илрүүлэх шинжилгээ юм. Тархи нугасны шингэнээр ELISA хийх боломжтой.

Вассерманы урвал болон бусад кардиолипины шинжилгээний оронд ферменттэй холбоотой дархлааны шинжилгээг (ELISA) практикт нэвтрүүлсэн нь тэмбүүгийн лабораторийн оношлогооны чанарыг эрс сайжруулсан. Энэ аргын чухал давуу тал нь хүний ​​хүчин зүйлийн нөлөөллийг бууруулдаг судалгааны үйл явцыг автоматжуулах боломж юм.

1. ELISA аргын түүх

Хатуу фазын зөөвөрлөгчийн гадаргуу дээрх ферментийн дархлаа судлалын үндсэн зарчмуудыг E. Engvar et al. (1971), Б.Ван Виман, А.Шуурс (1971). Тэдний бүтээсэн иммуно ферментийн шинжилгээг анх 1975 онд Ж.Велдкамп, А.Виссер нар тэмбүүгийн оношилгоонд зориулан санал болгосон бөгөөд тэд энэхүү автоматжуулсан шинжилгээний боломжийг үнэлжээ. 1980-аад онд оношилгооны сорилыг боловсруулж, баталгаажуулж, шинжилгээний аргуудыг стандартчилах үед ELISA нь тэмбүүгийн оношлогоонд өргөн хэрэглэгдэж эхэлсэн. ЗХУ-д тэмбүүгийн оношлогооны ELISA аргыг В.Н.Беднова, А.В.Бабий, А.В.Котровский нар (1982, 1983) боловсруулсан.

2. ELISA аргын зарчим

Урвалын механизмын дагуу ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ (ELISA) нь RIF-тэй ойролцоо байна (ижил эсрэгбие илэрсэн). Ферментийн дархлаа судлалын урвалыг тэмбүүтэй өвчтөний эсрэгбиемүүдтэй цайвар трепонемагийн эсрэгтөрөгчийн харилцан үйлчлэлд үндэслэн дархлаа судлалын урвал гэж ангилдаг.

Тэмбүү судлалын практикт ELISA-ийн шууд бус хувилбарыг голчлон ашигладаг. Хамгийн түгээмэл хэрэглэгддэг шууд бус урвалын хувилбарын зарчим нь дараах байдалтай байна. Полистирол хавтангийн нүхний гадаргуу дээр тэмбүүтэй өвчтөний эсрэгбие нь цайвар трепонемийн эсрэгтөрөгчтэй харилцан үйлчлэх явцад үүсдэг дархлааны цогцолборууд тогтдог. Үүний дараа тэдгээрийг тусгай коньюгатууд болон тохирох субстрат-хромоген нэмэлтүүдийг ашиглан өнгөт урвалаар илрүүлдэг.

Туршилтыг хийх журам нь дараах байдалтай байна: өвчтөний ийлдэс нь эсрэгтөрөгчтэй хатуу фазын тээвэрлэгч дээр байрладаг. Түүнд эсрэгбие байгаа тохиолдолд тээвэрлэгчийн гадаргуу дээр эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолбор үүсдэг. Урвалын үр дүнг "илэрхийлэх" тулд ферментийн маркеруудтай хавсарсан хүний ​​Ig-ийн эсрэг төрлийн эсрэгбиеүүдийг ашигладаг. Эерэг урвалын үед эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолбортой хавсарсан фермент нь системд нэмсэн субстратыг задалж, янз бүрийн эрчимтэй өнгөт будалт үүсгэдэг.

Урвалд хатуу фаз дээр шингэсэн AG ба AT-ийн цогцолборыг тодорхойлохдоо ферментийн субстраттай хийсэн өнгөт урвалын дагуу ферментээр тэмдэглэгдсэн антиглобулин эсрэгбиемүүдийг ашиглан гүйцэтгэдэг.

Урвалын үед хатуу үе шатанд шингэсэн эсрэгтөрөгч ба эсрэгбиеийн цогцолборыг тодорхойлохдоо ферментийн шошготой антиглобулины эсрэгбиемүүдийг ашиглан гүйцэтгэдэг.

ELISA нь янз бүрийн ангиллын ийлдэс Ig-ийг илрүүлэх боломжийг олгодог. Зах зээл дээр IgM ба IgG болон нийт эсрэгбиемүүдийг тусад нь тодорхойлох боломжийг олгодог системүүд байдаг.

ELISA-д хэрэглэдэг тусгай эсрэгтөрөгч нь өөр гарал үүсэлтэй байж болно.

хэт хоолойтой- тэдгээр нь T.pallidum бактерийн эсийг хэт авиан болон бусад аргаар устгасны үр дүнд олж авсан;

рекомбинант- тэдгээрийг генийн инженерийн технологиор бактерийн эсийн геномд (жишээлбэл, Escherichia coli E.Coli) тодорхой T.pallidum эсрэгтөрөгчийн нийлэгжилтийг хариуцдаг генийг нэвтрүүлж, дараа нь бактерийн массын өсөлтийг бий болгох замаар гаргаж авдаг. үүсгэгч бичил биетэн, эдгээр эсүүдийг устгах, эсрэгтөрөгчийг тусгаарлах, цэвэршүүлэх;

пептид- T.pallidum уургийн эсрэгтөрөгчийн эпитопуудын дараалсан химийн синтезийн үр дүнд олж авсан.

Бие махбодь нь эсрэгтөрөгчийн молекулын бараг бүх хэсэгт эсрэгбие үүсгэх чадвартай. Ердийн дархлааны хариу урвалын хувьд энэ нь ихэвчлэн тохиолддоггүй. Уургийн эсрэгтөрөгчөөс тусгаарлагдсан нэг буюу хэд хэдэн иммуноген пептид нь тусгай эсрэгтөрөгчтэй байдаг ба ихэнх эсрэгбие нь тэдгээрт тусгайлан үүсдэг. Тэд хамгийн хүчтэй дархлааны хариу урвалыг бий болгодог. ELISA-д хамгийн их мэдээлэл өгсөн нь 15 кД, 17 кД, 47 кД молекул жинтэй цайвар трепонемийн уургийн дархлаа давамгайлсан бүс нутгийг харуулсан. Николсын омгийн эмгэг төрүүлэгч трепонемийн угаалгын нунтаг эсвэл sonicate-ыг эсрэгтөрөгч болгон ашигласан.

3. Аргаар судалгаа явуулах арга

Аргын зарчим нь субстраттай өнгөт урвалын тусламжтайгаар ферментийн (пероксидаза) шошготой антиглобулин эсрэгбие бүхий хатуу фаз (хуванцар хавтангийн нүхний гадаргуу) дээр шингэсэн тодорхой эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолборыг тодорхойлох явдал юм. спектрофотометрийн аргаар хэмжигддэг.

Полистирол хавтангийн нүхийг мэдрэмтгий болгоход ашигладаг антигенууд нь:

• лизат- цайвар трепонемийг хэт авиан шинжилгээгээр устгасны үр дүнд олж авсан;
• пептид- цайвар трепонемийн уургийн хэсгүүдийн химийн нийлэгжилтийн үр дүнд олж авсан, эмгэг төрүүлэгчийн анхны уурагтай төстэй эсрэгтөрөгчийн реактив шинж чанартай;
• рекомбинант- цайвар трепонематай ижил антиген тодорхойлогч бодис агуулсан генийн инженерчлэлийн аргыг ашиглан олж авсан.

Тэмбүү судлалын практикт ихэвчлэн ELISA-ийн шууд бус хувилбарыг ашигладаг.

4. Үр дүнгийн нягтлан бодох бүртгэл

ELISA-д эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн урвалыг дүрслэн харуулахын тулд субстрат бүхий ферментийн урвалыг (шүлтлэг фосфатаза эсвэл тунхууны пероксидаза) ашигладаг бөгөөд энэ нь түүний өнгийг өөрчилдөг. Өнгөний эрч хүч нь урвалын эерэг байдлыг тодорхойлдог ("-" -ээс "++++" хүртэл). ELISA-ийн үр дүнг 4 цэгийн систем дээр нүдээр эсвэл 492 нм долгионы урттай тусгай уншигч (Multiscan гэх мэт) дээр олж авсан оптик нягтын дижитал үзүүлэлтийн хэлбэрээр багажаар үнэлж болно. Учир нь үр дүнгийн үнэлгээг спектрофотометрийн аргаар хийдэг бөгөөд энэ нь субъектив тайлбарыг оруулаагүй болно.

5. Өвчний ямар үед хэрэглэх нь дээр

ELISA-ийн эерэг нөхцөл - халдвараас хойш 4 дэх долоо хоногоос. ELISA (түүнчлэн RIF) үр дүн нь анхдагч үеийн эхний өдрүүдэд эсвэл инкубацийн төгсгөлд эерэг болж, бүх хугацаанд эерэг хэвээр байна. ELISA нь тэмбүүгийн эрт оношлоход онцгой ач холбогдолтой - эерэг эсрэгбиеийн үр дүнг өвчний инкубацийн төгсгөлд (өөрөөр хэлбэл халдвар авснаас хойш 4-6 долоо хоногийн дараа) авах боломжтой.

6. Мэдрэмж, өвөрмөц байдал

ELISA бол өндөр мэдрэмжтэй, өвөрмөц тест бөгөөд энэ нь түүний давуу тал юм. Урвалын механизм, мэдрэмж, өвөрмөц байдлын хувьд ELISA нь RIF, tk-тэй ойролцоо байна. ижил эсрэгбие нь хоёр урвалд оролцдог. Ихэнх судлаачид өвчний бүх үе шатанд өндөр өвөрмөц байдал, мэдрэмжийг тэмдэглэж байна. Г.А.Дмитриевын хэлснээр ELISA-ийн янз бүрийн хувилбаруудын мэдрэмж нь 98-100%, өвөрмөц байдал нь 96-100% байдаг. TsNIKVI-ийн мэдээлснээр тэмбүүгийн ELISA-ийн мэдрэмж нь 99.1% (ОХУ-ын 87 М3 тушаал).

Хатуу фазын ELISA (ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ, ELISA) хувилбар нь 0.0005 мкг/мл эсрэгбие, 0.000005 мкг/мл эсрэгтөрөгчийг илрүүлэх боломжийг олгодог хамгийн мэдрэмтгий ийлдэс судлалын шинжилгээний нэг юм.

7. Аргын хамрах хүрээ

Энэ аргыг жирэмсэн эмэгтэйчүүд, холбоо барих хүмүүс, донорууд, эрсдэлт бүлгийн төлөөлөгчдийг шалгаж үзэхэд ашиглахыг зөвлөж байна. ELISA-г скрининг болон баталгаажуулах тест болгон ашиглаж болно. Түүхийнхээ харьцангуй богино хугацаанд ELISA нь заагч тестээс баталгаажуулах тест болж өөрчлөгдсөн. Тэмбүүгийн оношлогоонд тестийг янз бүрийн трепонемал бус сорил, TPHA ашиглан эерэг үр дүн үзүүлсэн дээжийг баталгаажуулах тест болгон ашигладаг.

ELISA аргыг эерэг байдлын индекс буюу урвалын индексийг тооцоолоход тоон байдлаар ашиглаж болох бөгөөд энэ нь дээж дэх эсрэгбиеийн түвшинг үнэлэх боломжийг олгодог.

Одоогийн байдлаар Орос улсад тэмбүүгийн оношлогоонд ферментийн дархлааны шинжилгээг ашиглах нь ОХУ-ын Эрүүл мэндийн яамны 2001 оны 3-р сарын 26-ны өдрийн "Тэмбүүгийн ийлдэс судлалын оношлогоог сайжруулах тухай" 87 тоот тушаалаар зохицуулагддаг (Хавсралт №. 1 "Тэмбүүгийн илрүүлэлт, оношлогооны шинжилгээг зохион байгуулах"). Захиалгат сереореакцийн цогцолбор дахь RSK-ийг (SSR) ELISA ба RPHA-аар солихоор төлөвлөж байна.

8. Тайлбарын алдаа, худал эерэг, худал сөрөг байдлын эх үүсвэр, шалтгаан

Ферментийн дархлаажуулалт нь олон үе шаттай нарийн төвөгтэй судалгаа бөгөөд оношлогооны иж бүрдэл үйлдвэрлэгчдийн бүх зөвлөмж, судалгаанд ашигласан тоног төхөөрөмжийг тохируулах, тохируулах дүрмийг чанд дагаж мөрдөх шаардлагатай.

Дараахь зүйлүүд нь ELISA-г тохируулах үед алдааны эх үүсвэр байж болно.

Гиперлипидеми, цус задралын ийлдэс эсвэл бактерийн өсөлтийн шинж тэмдэг бүхий дээжийн урвалын судалгаа;

Биологийн материалын дээжийг давхар ба түүнээс дээш хөлдөөх дасгал хийхгүй байх, шаардлагатай бол дахин шинжилгээ хийх, давхардсан хуруу шилний ийлдэс хэрэглэх;

Дархлаа шингээгч, угаах уусмалыг хадгалах нөхцөл, нөхцлийг зөрчсөн; хугацаа нь дууссан туршилтын багц ашиглах;

Бусад оношлогооны иж бүрдлүүдийн урвалын бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг хэрэглэх;

Урвалын үе шатуудын хугацааг зөрчих;

Урвалын үе шатанд дархлаа судлалын хавтангийн худгийг хатаах;

Хромоген ба субстратын холимог бэлтгэхийн тулд хуванцар аяга (хуванцар тавиур) дахин ашиглах;

Ашигласан төхөөрөмжүүдийн (угаагч ба спектрофотометр) ашиглалтын параметрүүдийн хэмжилзүйн хяналтын давтамжийг дагаж мөрдөхгүй байх;

Урвал үүсгэх үед бохирдсон лабораторийн шилэн савыг ашиглах: колбо, хэмжих цилиндр, туршилтын хоолой, пипетк, пипеткийн үзүүр;

Биологийн материалын дээжийг шингэрүүлэх ажлыг бүрэн гүйцэд хийхгүй байх;

Биологийн материалын дээжийг таблетын харгалзах худагт оруулах үед гарсан алдаа;

Судалгааны үр дүнг бүртгэлийн бүртгэл, судалгааны протокол эсвэл хариултын маягт руу шилжүүлэхэд гарсан алдаа.

Оношлогооны тестийн иж бүрдэл ашиглах зааврын зөвлөмжийг сайтар дагаж мөрдөх, пипеткээр тараагч, автомат төхөөрөмжийн нарийвчлалыг тогтмол шалгаж, дотоод эерэг ба сөрөг хяналтыг ашиглах нь ELISA-ийн өндөр давтагдах үр дүнг авах боломжийг олгодог.

9. Онцлог, давуу болон сул талууд

ELISA нь энгийн, давтагдах, хүртээмжтэй байдлаас шалтгаалан тэмбүүгийн серодиагнозын орчин үеийн, ирээдүйтэй аргуудыг хэлдэг. ELISA-ийн тусламжтайгаар эсрэгбие илрүүлэх нь олон тооны дээжийг нэгэн зэрэг шалгахад тохиромжтой оношлогооны хамгийн тохиромжтой арга юм. Түүний давуу талуудын ачаар энэ нь бүх улс оронд алдартай болсон.

ELISA судалгааны технологи нь арилжааны оношлогооны шинжилгээний иж бүрдэл үйлдвэрлэгчдийн бүх зөвлөмжийг дагаж мөрдөх, судалгааны процедурын нарийвчлалыг хангах боломжийг олгодог. ELISA-д судалгаа хийхийн тулд нэмэлт тусгай тоног төхөөрөмж худалдан авах шаардлагатай. Тохируулах арга нь RMP, RPR, RPGA-тай харьцуулахад илүү урт хугацаа шаарддаг.

Хэд хэдэн үе шат эсвэл бүхэл бүтэн процессын автоматжуулалт байгаа нь судалгааны өндөр түвшний стандартчилал бүхий биологийн материалын олон тооны дээжийг нэгэн зэрэг шалгаж, үр дүнг үнэлэхэд субъектив элементийг багасгах боломжийг олгодог. Судалгааны тогтмол протоколуудыг хадгалах боломж нь судалгааны өгөгдлийг архивлах, тэдгээрийг буцаан шинжилгээнд дахин ашиглах боломжийг олгодог.

Давуу тал:

• Тэмбүүгийн үүсгэгч IgM ба IgG эсрэгбиемүүдийг ялгаж, бүрэн тодорхойлох боломжийг олгодог.
• өндөр мэдрэмж, өвөрмөц байдал 100% ойртох;
• давтах чадвар
• автоматжуулалтын боломжууд

ELISA-ийн давуу талууд нь ихэнх судлаачдын тэмдэглэсэн өндөр өвөрмөц (96-100%), мэдрэмж (98-100%) юм.

Хэд хэдэн үе шат эсвэл бүхэл бүтэн процессын автоматжуулалт байгаа нь судалгааны өндөр түвшний стандартчилал бүхий биологийн материалын олон тооны дээж бүхий урсгалыг нэгэн зэрэг шалгах боломжийг олгодог бөгөөд үнэлгээний субьектив элементийг багасгадаг. үр дүн, судалгааны өгөгдлийг архивлах, буцаан шинжилгээнд дахин хандах боломжийг олгодог тогтмол судалгааны протоколуудыг хадгалах боломж.

T. pallidum эсрэгтөрөгчийн эсрэгбиемийг ELISA аргаар тодорхойлох зэрэг гарын авлагын аргуудын мэдэгдэхүйц сул талууд нь:

~ Судалгааны явцад боловсон хүчний боломжит алдаа (хяналт, хайхрамжгүй байдал, технологийн зөрчил);

~ ELISA-ийн гарын авлагын хувилбараар судалгааны үйл явцыг бүрэн стандартчилах боломжгүй байх;

~ боловсон хүчний халдвар авах эрсдэл нэмэгддэг.

10. Аргын өөрчлөлт

Сонгодог шууд бус ELISA-ийн зэрэгцээ энэ аргыг бас мэддэг. ELISA-г барих. Үүнийг 1989 онд O. E. Ijsselmudien нар санал болгосон. Tr эсрэгтөрөгчтэй IgM ангиллын эсрэгбие илрүүлэх. цайвар. Энэ арга нь өндөр өвөрмөц, мэдрэмжтэй байдаг.

М ангиллын хүний ​​иммуноглобулины цэвэршүүлсэн эсрэгбие нь таблетын нүхний гадаргуу дээр шингэж, сорилтын ийлдэсийг инкубацийн дараа бүх IgM нь тээвэрлэгчтэй холбогддог. Tr эсрэгтөрөгчийн өвөрмөц IgM-ийн дунд байгаа эсэх. pallidum-ийг Tr антиген ашиглан илрүүлдэг. ферменттэй хавсарсан цайвар .

Энэ арга нь зөвхөн IgM ангиллын төдийгүй IgG, IgA ангиллын эсрэгбиемүүдийг илрүүлэх боломжийг олгодог. Үүнийг хийхийн тулд ялтсуудын худгийг хүний ​​иммуноглобулины эсрэг тодорхой ангиллын эсрэгбиемүүдээр мэдрэмтгий болгодог. Энэ тохиолдолд ийлдэсээс энэ ангийн эсрэгбиемүүдийг барьж авдаг бөгөөд трепонемал өвөрмөц эсрэгбиемүүдийг илрүүлэх нь трепонемал эсрэгтөрөгчийг ферменттэй хослуулсан коньюгаттай хослуулах замаар хийгддэг.

баригдсан ELISA ашиглах нь ревматоид цусны хүчин зүйлээр зуучлах хуурамч эерэг урвал, ангиллын M болон G иммуноглобулин хоорондын хөндлөн урвалын эрсдлийг бууруулдаг. Шинээр төрсөн хүүхдийг шалгаж байх үед, энэ тохиолдолд эсрэг чиглэсэн IgM илрүүлэх холбоотой туршилтын хуурамч эерэг үр дүн. эхийн антитрепонемаль IgG-ийг мөн оруулаагүй болно.

Гадаадад ELISA-ийн хувилбаруудыг өргөн ашигладаг ферментийн дархлааны шинжилгээ (EIA)болон систем ICE тэмбүү. Сүүлд нь IgM ба IgG-ийн эсрэгбиемүүдийн холимог, түүнчлэн гурван рекомбинант T. pallidum уураг нь хавтангийн нүхэнд шингэсэн байна. Эерэг үр дүнг эцсийн үр дүнг өгөхийн тулд нэг тестийн системд хоёр давталтаар туршина.

ОХУ-д дотоодын урвалж бүхий ELISA-ээр тэмбүүгийн серодиагнозын хэд хэдэн туршилтын системийг боловсруулсан. Эдгээр системүүд нь өндөр өвөрмөц, мэдрэмжтэй байдаг.

Дээрхээс гадна цусан дахь эмгэг төрүүлэгчийг шууд илрүүлэх боломжийг олгодог ELISA-ийн бусад сонголтууд (шууд ELISA), нитроцеллюлозын туузан дээрх урвал бүхий цэг-ELISA, хялгасан судасны цустай ELISA, түүнчлэн иммуноблотинг, эсвэл Western Blot, эмгэг төрүүлэгчийн янз бүрийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн эсрэгбиемүүдийг нэгэн зэрэг илрүүлэх.

ELISA-ийн орчин үеийн сайжруулсан өөрчлөлт бол иммуноблотинг юм.

ICA (иммунохемилюминесцент шинжилгээ), ICL (иммунохилюминесцент)

ОХУ-д эрүүл мэндийн шинэчлэлийн хүрээнд лабораторийн оношилгоог хөгжүүлснээр лабораторийн судалгааны автоматжуулалт нь лабораторийн практикт нэвтэрсэн нь судалгааны аналитик үе шатуудыг стандартчилах боломжийг олгож байна. Энэ нь оношлогооны чанарыг сайжруулдаг. Автоматжуулалтыг нэвтрүүлснээр өндөр мэдрэмжтэй, өвөрмөц онцлогтой шинэ өндөр технологийн аргууд, тухайлбал химилюминесценцийн дархлааны шинжилгээ (CLIA) хэрэглэж эхэлсэн.

Химилюминесценц гэдэг нь исэлдэлтийн химийн урвалын электрон өдөөгдсөн бүтээгдэхүүнийг анхны энергийн төлөвт шилжүүлэх явцад фотон ялгаруулах үйл явц юм. Хемилюминесценцийн урвалын үед ихээхэн хэмжээний энерги ялгардаг ба ялгарах гэрлийн квантын гарц нэлээд өндөр байдаг. Бүх изотопын бус аргуудаас химилюминесценц нь хамгийн өндөр мэдрэмжийг өгдөг. Иммунометрийн аргуудын хувьд химилюминесценцийн мэдрэг чанар нь радиоиммун шинжилгээний аргуудаас хамаагүй өндөр байдаг.

Immunochemiluminescence (ICL) арга нь одоо хавдрын маркер, аутоиммун өвчин, чихрийн шижин, зүрхний маркер, гормон (бамбай булчирхай, бөөрний дээд булчирхай, эмэгтэй, эрэгтэй бэлгийн даавар), бамбар халдвар, вируст гепатит, герпес бүлгийн вирусын оношлогоонд хэрэглээгээ олсон.

Иммунохемилюминесценцийн аргад үндэслэн тэмбүүгийн оношилгооны өндөр мэдрэмтгий, өвөрмөц (98-100%) хэд хэдэн тестийн системийг боловсруулсан бөгөөд эдгээрийг ихэвчлэн гадаадад ашигладаг.

Уг аргад генийн инженерчлэлийн аргаар гаргаж авсан рекомбинант липопротейнүүдийг антиген болгон ашигладаг бөгөөд эдгээр нь T.pallidum антигенийн бүрэн аналог юм.

Эмнэлзүйн судалгааны үр дүнд үндэслэн ICA аргыг хүлээн зөвшөөрч, ОХУ-д тэмбүүгийн лабораторийн оношлогоонд лабораториуд зохих тоног төхөөрөмжтэй бол илрүүлэх, баталгаажуулах шинжилгээнд ашиглахыг зөвлөж байна. 2012 онд Бэлгийн болон шээс бэлгийн замын халдварт өвчтний менежментийн эмнэлзүйн удирдамжид тэмбүү өвчнийг оношлох скрининг болон баталгаажуулах шинжилгээ болгон ICA-г оруулсан.

Ийнхүү автоматжуулалтыг нэвтрүүлснээр дэлхийн болон дотоодын лабораторийн оношлогооны практикт нэвтэрсэн өндөр технологийн ICA-г ашиглах нь дараах давуу талуудыг бий болгож байна.

• Судалгааны аналитик үе шатанд субъектив хүчин зүйлийн нөлөөллийг хасах
• халдвар авсан байж болзошгүй биологийн материалын судалгаа хийх үед ажилчдын аюулгүй байдал
• өвчтөний үр дүнд хүрэх хурдыг нэмэгдүүлэх
• судалгааны стандартчилал, судалгааны чанарын хяналт
• өвчтөнд найдвартай найдвартай үр дүнг хүргэх
• өндөр чанартай клиник лабораторийн судалгаа.

Мэдрэмжийн хувьд ICA аргыг радиоиммун шинжилгээний аргатай харьцуулах боломжтой бөгөөд гүйцэтгэлийн хялбар байдал, ажилтнуудын аюулгүй байдал, бусад олон үзүүлэлтээр үүнийг давж гардаг.

Мэдрэмж, өвөрмөц чанар өндөртэй (98-100%) ICA арга нь тэмбүүгийн үүсгэгчийн эсрэгбиеийн түвшинг тодорхойлох боломжийг олгодог бөгөөд тэмбүүгийн халдварыг баталгаажуулах, скрининг хийхэд ашиглаж болно. Хэрэглэх хязгаарлалт: эмчилгээний үр дүнг хянахад ашиглах боломжгүй, хуурамч эерэг үр дүн өгч болно.

Иммунохроматографи (ICH).

ОХУ-д хэрэглэхэд харьцангуй шинэ зүйл бол иммунохроматографийн (ICH) аргууд дээр суурилсан трепонемийн өвөрмөц эсрэгбиемийг илрүүлэх аргууд юм. ICA аргын нэгэн адил генийн инженерчлэлийн аргаар олж авсан рекомбинант липопротейн (жишээ нь: Tp15, Tp17, Tp47 антиген) ба биосинтетик TmpA пептидийг антиген болгон ашигладаг. Жагсаалтад орсон эсрэгтөрөгчийг мөн ELISA болон иммуноблотинг дахь иммуносорбентуудын нэг хэсэг болгон янз бүрийн хослуулан хэрэглэдэг.

ICG арга нь тусгай лабораторийн тоног төхөөрөмж ашиглахгүйгээр ийлдэс болон цусны дээжинд агуулагдах тэмбүүгийн үүсгэгч бодистой трепонемийн өвөрмөц эсрэгбиеийн агуулгыг хурдан тодорхойлох боломжийг олгодог бөгөөд эрүүл мэндийн анхан шатны тусламж үйлчилгээ, түүний дотор эпидемиологийн заалтад ашиглагддаг.

Хэрэглэх хязгаарлалт: эмчилгээний үр дүнг хянахад ашиглах боломжгүй, хуурамч эерэг үр дүн өгч болно.

PBT (орны дэргэдэх энгийн хурдан туршилт)

Харьцангуй саяхан тэмбүүгийн серодиагностикийн хувьд энгийн түргэн шинжилгээ (PBT) гэж нэрлэгддэг өвчтөний орны дэргэдэх шинжилгээг боловсруулах чиглэл гарч ирэв (Тусгай үйлчилгээний цэг - ROC). Орны дэргэдэх энгийн түргэн шуурхай шинжилгээ буюу иммунохроматографийн шинжилгээ нь лабораторийн тусгай төхөөрөмж ашиглахгүйгээр ийлдэс болон бүхэл цусны дээж дэх тэмбүүгийн үүсгэгч бодистой трепонемийн өвөрмөц эсрэгбиеийн агуулгыг хурдан тодорхойлох, эрүүл мэндийн анхан шатны тусламж үйлчилгээ, түүний дотор ашиглах боломжтой болгодог. эпидемиологийн шинж тэмдгийн хувьд. Хэрэглэх хязгаарлалт: эмчилгээний үр дүнг хянахад ашиглах боломжгүй, хуурамч эерэг үр дүн өгч болно.

Эдгээр туршилтууд нь цайвар трепонемийн трепонемын эсрэгтөрөгчийн эсрэгбиемүүдийг иммунохроматографийн аргаар илрүүлэхэд үндэслэсэн бөгөөд туузан дээр хийгддэг; энэ тохиолдолд бүхэл бүтэн цус болон ийлдэс хоёуланг нь хэрэглэж болно (Herring A., Ballard R. et al, 2006). Туршилтын хэлбэр нь тусгай төхөөрөмж байхгүй, цахилгаан эрчим хүч ашиглахгүйгээр судалгаа хийх боломжийг танд олгоно. Гэсэн хэдий ч харьцангуй бага мэдрэмж, өвөрмөц байдлаас шалтгаалан эдгээр туршилтууд практикт өргөн хэрэглэгдэхүүнийг хараахан олж чадаагүй байна.

Immunoblotting (Western Blot)

Сүүлийн жилүүдэд эсрэгбиеийн агуулгыг илрүүлэх, шинжлэхэд чиглэсэн судалгааны аргууд гарч ирэв. эсрэгтөрөгч бүрийн хувьдцайвар трепонема тус тусад нь. Ийм аргуудын нэг нь цайвар трепонемийн эсрэг IgG эсвэл IgM эсрэгбиемийг тодорхойлоход хэрэглэгддэг дархлаа арилгах арга (эсвэл blotting, immunoblotting, Western blot) юм. Immunoblotting арга нь ферментийн дархлааны шинжилгээний өөрчлөлт юм - ELISA-ийн хувилбар.

Immunoblotting нь тэмбүүгийн серодиагнозын хамгийн орчин үеийн аргуудын нэг бөгөөд гадаадад идэвхтэй ашиглагддаг. Энэ нь ДНХ илрүүлэх техник ("Өмнөд Blotting") болон РНХ ("Хойд Blotting")-ийн нэрэнд хошин хариу үйлдэл болгон ("Western blotting") нэрээ авсан.

1. Аргын түүх

Immunoblotting (Western blot) нь цайвар трепонемийн эсрэгтөрөгчийн эсрэг IgG эсвэл IgM эсрэгбиемүүдийг тодорхойлоход хэрэглэгддэг (Herremans M. et al., 2007).

2. Сонгодог иммуноблот

Сонгодог иммуноблот(Western Blot Analysis) нь ферментийн дархлааны шинжилгээ болон электрофорезийн аргыг хослуулсан. Тэмбүүгийн үүсгэгч уургийн эсрэгтөрөгчийг электрофорезоор урьдчилан ялгаж, тээвэрлэгч - нитроцеллюлозын мембран (тууз) руу шилжүүлдэг. Энэ шилжүүлгийг blotting гэж нэрлэдэг. Дараа нь тусгаарлагдсан цэгүүд (блот) бүхий энэ зөөвөрлөгчийг фермент эсвэл цацраг идэвхт бодисоор тэмдэглэсэн IgG эсвэл IgM-ийн эсрэгбие болон туршилтын ийлдэсээр эмчилнэ. Энэ арга нь байгалийн буюу рекомбинант трепонемийн уургийг ашиглах явдал юм.

электрофорезнь электрофорезийн талбар дахь хөдөлгөөнт байдалд үндэслэн цэнэгтэй нэгдлүүдийг салгах явдал юм. Зарим орчинд потенциалын зөрүүг хэрэглэх үед эерэг цэнэгтэй молекулууд сөрөг цэнэгтэй электрод руу, сөрөг цэнэгтэй молекулууд эерэг электрод руу шилжинэ.

Ихэнх бөмбөрцөг уургууд нь уургийн гадаргуу дээр ихэнх цэнэгтэй бүлгүүд, тухайлбал гидрофиль байдаг, харин цэнэггүй, гидрофобик үлдэгдэл нь бөмбөрцөг дотор дүрэгдсэн байдлаар угсардаг. Цахилгаан талбарт уургууд нь цэнэгийнхээ дагуу эсрэг цэнэгтэй электрод руу шилждэг.

Уургийг электрофорезоор тусгаарлах нь полиакриламид дээр суурилсан синтетик гель орчинд явагддаг. Уургийг молекулын жингээр нь ялгахын тулд электрофорезын өмнө уургийн хольцыг натрийн додецил сульфат (SDS) байлцуулан урьдчилан өсгөвөрлөнө.

Гадаадын эрдэмтэд Вебер, Осборн нар (1969) нарийвчилсан судалгаагаар ийм эмчилгээ хийсний дараа полиакриламид гель (PAAG) дахь уургийн хөдөлгөөнд нөлөөлж болох цорын ганц хүчин зүйл бол уургийн хэмжээ, эс тэгвээс молекулын жин юм. Энэ нь уураг ба пептидийн молекулын жинг нэлээд нарийвчлалтай тодорхойлохын тулд SDS-ийн оролцоотойгоор SDS-PAGE-д электрофорезын аргыг хэрэглэх боломжтой болсон. Гадаадын уран зохиолд энэ аргыг SDS-PAGE (натрийн додецил сульфат-полиакриламидын гель электрофорез) гэж нэрлэдэг.

Байгалийн антиген бүхий сонгодог ДБ сорил дахь урвалын профайл (натри додецил сульфаттай полиакриламидын гель электрофорезийн арга). (1) - эерэг үр дүнг хянах, (2) - сөрөг үр дүнг хянах, (3-6) - эмнэлзүйн дээж.

Энэ аргыг ашиглан тэмбүүгийн шинжилгээнд өмнө нь цэвэршүүлж, бүрдэл хэсгүүдэд нь устгасан цайвар трепонема нь полиакриламид эсвэл агароз гель дэх электрофорезд өртдөг. Үүний зэрэгцээ түүний найрлагад орсон эсрэгтөрөгчийг молекулын жингээр тусгаарладаг.

Дараа нь босоо электрофорезын тусламжтайгаар эсрэгтөрөгчийг нитроцеллюлозын туузанд шилжүүлдэг бөгөөд энэ нь одоо цайвар трепонемийн шинж чанартай эсрэгтөрөгчийн туузны үл үзэгдэх спектрийг агуулдаг.

Шинжилгээний явцад туршилтын материалыг (ийлдэс, өвчтөний цусны сийвэн гэх мэт) нитроцеллюлозын тууз (тууз) дээр хэрэглэнэ. Хэрэв дээжинд өвөрмөц эсрэгбие байгаа бол инкубацийн явцад тэдгээр нь тэдгээрт хатуу нийцдэг (нэмэлт) эсрэгтөрөгчийн зурвасуудтай хүчтэй холбогдож, "эсрэгтөрөгч-эсрэгбие" цогцолбор үүсгэдэг.

Туузыг угаах явцад холбогдоогүй иммуноглобулиныг зайлуулсны дараа хүний ​​иммуноглобулины (хүний ​​IgG эсвэл IgM-ийн эсрэгбие) ферментээр тэмдэглэгдсэн эсрэгбиемүүдийг коньюгатаар өсгөвөрлөх ба энэ үед ферментээр тэмдэглэгдсэн эсрэгбие нь одоо байгаа эсрэгтөрөгч-эсрэгбиемтэй холбогддог. мембраны гадаргуу дээрх цогцолборууд.

Субстратын уусмалаар инкубацийн үед холбоогүй коньюгатыг зайлуулсны дараа фермент нь субстраттай харилцан үйлчлэлцэж, өнгөт урвал үүсдэг - цайвар трепонемийн бие даасан антигенүүд байрладаг мембраны хэсгүүдэд (тууз хэлбэрээр) толбо үүсдэг. туршилтын ийлдсэнд байсан. Будгийн эрч хүч нь ийлдэсээс холбосон эсрэгбиеийн хэмжээнээс хамаарна. Урвалын үр дүнг нүдээр үнэлдэг.

Нитроцеллюлозын хавтангийн тодорхой хэсэгт тууз байгаа нь судлагдсан ийлдэс дэх цайвар трепонемийн хатуу тодорхойлогдсон эсрэгтөрөгчийн эсрэгбие байгааг баталж байна.

Энэ аргыг ашиглан тодорхойлсон дархлаа тогтоогч 15, 5, 17, 44.5, 47 кД нь тэмбүүгийн оношлогооны ач холбогдолтой. Ig G immunoblotting нь шингээлттэй RIF (RIF abs)-тай мэдрэмж, өвөрмөц онцлогтой төстэй. Ig M-immunoblotting нь төрөлхийн тэмбүүгийн оношлогооны тест болж чаддаг.

3. Шугаман immunoassay формат дахь иммуноблот

Шугаман immunoassay (linear immunoassay, LIA) нь хүний ​​ийлдэс эсвэл сийвэн дэх цайвар трепонемийн эсрэгтөрөгчийн эсрэгбиемүүдийг нэгэн зэрэг тодорхойлох боломжийг олгодог. Арилжааны оношлогооны иж бүрдлийн нэг хэсэг болгон нийлүүлдэг туршилтын тууз (тууз) дээр эсрэгтөрөгчийг урьдчилан хэрэглэнэ.

Тууз нь нитроцеллюлозын мембран, хуванцар дэвсгэртэй полиамид мембран эсвэл хуванцар дэвсгэртэй нейлон мембранаар хийгдсэн. Үйлдвэрлэлийн явцад туршилтын туузан дээр хэд хэдэн салангид эсрэгтөрөгчийг тусдаа эсрэгтөрөгчийн шугам хэлбэрээр байрлуулна. Эдгээр тэмбүүгийн эсрэгтөрөгчөөс гадна эгнээ бүрт дөрвөн хяналтын шугамыг хэрэглэнэ: стрептавидин ба хяналт (3+, 1+ ба ± зүсэлтийн шугам).

Туузны хувьд генийн инженерчлэлийн аргаар олж авсан хиймэл антигенийг ашигладаг - рекомбинант уураг эсвэл синтетик полипептидийн бүтэц. Эдгээр нь цайвар трепонемийн гадаргуугийн антигенүүдийн аналогууд юм - TpN15, TpN17, TpN47 ба TmpA молекулын жин нь 15, 17, 47 кДа ба 44.5 (TmpA) бөгөөд kDa=kiloDaltons байна. Тэдгээрийн тусламжтайгаар эмгэг төрүүлэгчийн янз бүрийн дархлаа дарангуйлах бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн ийлдэс дэх эсрэгбиемүүдийг тодорхойлно.

Туршилтын дээжийг инкубацлах нь индикатор туузыг мөн байрлуулсан кюветт дотор явагддаг. T. pallidum-ийн эсрэгбие нь туршилтын туузан дээр хэвлэгдсэн эсрэгтөрөгчтэй холбогдож тодорхойлогддог. Хэрэв дээжинд T. pallidum-ийн өвөрмөц эсрэгбие байгаа бол тэдгээр нь бие даасан эсрэгтөрөгчийн шугамтай холбоо үүсгэдэг. Туршилтын ийлдсэнд агуулагдах эсрэгбиемүүд нь туршилтын туузан дээр байрлуулсан салангид T. pallidum эсрэгтөрөгчтэй харилцан үйлчлэлцэх үед нүдэнд харагдахуйц өнгөт тууз хэлбэрээр эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолбор үүсдэг.

Дархлаажуулалтын үр дүнг харгалзан үзэхэд ийлдсийн эсрэгтөрөгч тус бүрт үзүүлэх урвалыг тусад нь үнэлдэг. Хоёр буюу гурван эсрэгтөрөгчтэй нэгэн зэрэг үр дүн гарвал нийт эерэг хариу гарна.

Судалгааны процедурыг гараар эсвэл тусгай анализатор дээр хийж, халдварт өвчний тусгай компьютерийн програм ашиглан үр дүнг тайлбарладаг.

Рекомбинант эсрэгтөрөгчийг өндөр түвшинд цэвэршүүлж, тэмбүүгийн эмгэг төрүүлэгчийн хамгийн иммуноген тодорхойлогчдод эсрэгбиемүүдийг нэгэн зэрэг илрүүлдэг тул энэ арга нь өндөр мэдрэмж, өвөрмөц шинж чанартай байдаг.

4. Үр дүнгийн нягтлан бодох бүртгэл

Туузан дээрх эсрэгтөрөгчийн туузны будгийн эрчмийг уншихын тулд үйл ажиллагаа нь дохионы тусгал дээр суурилдаг фотометрүүдийг бүтээсэн бөгөөд энэ нь субъектив үнэлгээг арилгаж, автоматжуулалт хийх боломжийг олгодог.

5. Өвчний ямар үед хэрэглэх нь дээр

Western blot аргыг ашиглан хийсэн шинжилгээгээр Treponema pallidum эсрэгтөрөгчийн өвөрмөц эсрэгбиемийг өвчний маш эрт үе шатанд илрүүлж болно. Тэмбүүгийн оношлогоонд хамгийн чухал нь цайвар трепонема TpN15, TpN17, TmpA, TpN47-ийн эсрэгтөрөгчийн эсрэгбие юм. Эдгээр антигенууд нь 15, 17, 44.5, 47 кДа молекул жинтэй мембраны уураг юм.

Treponema pallidum-ийг хүний ​​биед нэвтрүүлэх үед тэмбүүгийн эсрэг эсрэгбие нь дараах дарааллаар гарч ирдэг: эхлээд TpN17 эсрэгтөрөгчийн эсрэг дархлааны хариу урвал үүсдэг, дараа нь TpN47, TpN15 ба дараа нь TmpA. Туршилтын үр дүнг харгалзан ийлдсийн реактив байдлыг тус тусад нь үнэлдэг. Жишээлбэл, шугаман толбо нь зөвхөн TpN17 ба TpN47 эсрэгтөрөгчийн шугамд реактив шинж чанартай байдаг бол энэ нь өвчин эрт үе шатанд байна гэсэн үг юм. Антигенийн шугамууд илүү идэвхтэй болох тусам халдвар улам бүр нэмэгддэг. Тэмбүүгийн эмчилгээнд энэ сорилын урвалын хэлбэр өөрчлөгддөг.

15.17, 41, 47 кДа молекул жинтэй уургийн IgM-ийг тодорхойлох нь хоёрдогч тэмбүүтэй өвчтөнүүдийн 29.2%, эрт далд тэмбүүтэй 12.5%, сероз тэсвэртэй 8.0% -ийг тодорхойлох боломжтой болгодог. Ижил молекулуудад IgG-ийн эрэл хайгуул нь сероз тэсвэртэй 61.6%, хоёрдогч болон эрт далд тэмбүүгийн хувьд 100% мэдрэмтгий байдаг.

6. Мэдрэмж, өвөрмөц байдал

Уран зохиолын дагуу тестийн мэдрэмж, өвөрмөц чанар нь маш өндөр байдаг - 99.6-100%, 99.3-99.5% байна. Сонгодог аргын хувьд энэ нь уураг, глико- ба липопротеины электрофоретик тусгаарлалт, дархлааны ийлдэс эсвэл моноклональ эсрэгбиемийг илрүүлэх хамгийн дээд өвөрмөц чанараар хийгддэг. Тохиромжтой нөхцөлд иммуноблотинг нь шинжилгээний эзэлхүүн дэх 1 нг-ээс бага хэмжээтэй эсрэгтөрөгчийг илрүүлэх боломжтой.

Шугаман толбоны мэдрэмж нь мөн 99.6%, өвөрмөц байдал нь 99.3% -аас 99.5% хооронд байна.

Шинжээчдийн үзэж байгаагаар, рекомбинант өндөр өвөрмөц эсрэгтөрөгчтэй иммуноблот нь RIF abs-ийн мэдрэмж, өвөрмөц онцлогтой төстэй юм.

Гадаадын уран зохиолын мэдээлэл, TsNIKVI-ийн судалгааны үр дүнгээс үзэхэд дархлаажуулалтын арга нь тэмбүүгийн оношлогоонд өндөр мэдрэмжтэй (98.8-100%), өвөрмөц шинж чанартай (97.1-100%) байдаг.

7. Аргын хамрах хүрээ

Immunoblotting (immunoblot) нь маш өвөрмөц бөгөөд маш мэдрэмтгий лавлах арга юм. Өндөр мэдрэмж, өвөрмөц чанар нь энэ аргыг тэмбүү өвчнийг баталгаажуулах шинжилгээ гэж үзэх боломжийг олгодог. Энэ аргыг оношийг батлах, түүнчлэн бусад трепонемал шинжилгээ нь эргэлзээтэй, зөрчилдөөнтэй үр дүнг өгөхөд ашиглаж болно. Western blotting нь TPHA эсвэл ELISA ашиглан олж авсан эерэг эсвэл тодорхойгүй шинжилгээний үр дүн бүхий өвчтөнүүдэд оношийг батлах боломжтой.

8. Тайлбарын алдаа, худал эерэг, худал сөрөг байдлын эх үүсвэр, шалтгаан

Хуурамч эерэг үр дүн маш ховор байдаг. Хуурамч сөрөг үр дүн нь нэлээд ховор бөгөөд дархлал хомсдолтой өвчтөнүүдэд ажиглагддаг - ихэвчлэн ХДХВ-ийн халдвартай хүмүүст, эсрэгбиеийн синтезийн саатал, түүнчлэн үе шат дахь алдаанаас болж оношлогооны "цонх" -ын нөлөөгөөр.

Орчин үеийн туршилтын системийг ашиглах нь материал болон урвалын гүйцэтгэлд тавигдах бүх шаардлагыг яг таг дагаж мөрдөхийг шаарддаг. Үндсэндээ алдааны эх үүсвэр нь судалгааны дараалал, технологийг зөрчсөн (ялангуяа сонгодог Western blot-ийн хувьд), туршилтын хэрэгсэл үйлдвэрлэгчдийн зөвлөмжийг дагаж мөрдөхгүй байх явдал юм. . Цусны сийвэнгийн дээжийг цуглуулах, хүргэх, хадгалах, түүнчлэн шинжилгээний гүйцэтгэлд алдаа гардаг. Бохирдсон дээжээс гадна бусад боломжит шалтгаанууд нь хугацаа нь дууссан тестийн багц ашиглах, шинжилгээний үр дүнг шинжлэхэд алдаа гаргах зэрэг орно.

9. Онцлог, давуу болон сул талууд

Иммуноблотын өвөрмөц чанар нь мэдээллийн өндөр агуулга, үр дүнгийн найдвартай байдалд оршдог.

Туршилтанд өндөр цэвэршүүлсэн антиген, лавлагаа, хяналтын ийлдэс шаардлагагүй. Эсрэгбиеийн зорилтыг тодорхойлох нь өвчтөний ийлдэс дэх эсрэгбиемүүдтэй урвалд ордог уургийн молекулын жин дээр суурилдаг. Нэг урвалаар хэд хэдэн эсрэгтөрөгчтэй эсрэгбиеийн холболтыг илрүүлж, тус бүрийг нарийн тодорхойлж болно. Үүнээс үүдэн иммуноблотинг нь эсрэгбиемийг илрүүлэх бусад аргуудаас хэд хэдэн давуу талтай бөгөөд үр дүн нь стандартчилал, мэдрэмж, субстратын чанар, тодорхой эсрэгтөрөгчийн тогтворгүй байдал, уусдаггүй байдлаас хамаардаг.

Энэ арга нь дахин давтагдахад хялбар, үр дүнг гүйцэтгэх, тайлбарлахад харьцангуй хялбар бөгөөд хэд хэдэн T. pallidum эсрэгтөрөгчийн эсрэгбиеийн спектрийг нэг дор тодорхойлж, ерөнхий урвалд өөр өөр өвөрмөц эсрэгбиеийн оруулсан хувь нэмрийг үнэлэх боломжтой болгодог.

Өндөр цэвэршүүлсэн рекомбинант ба пептидийн эсрэгтөрөгчийг ашиглах нь ийлдсийн өвөрмөц бус урвалыг багасгадаг. Аргын хэрэглээ нь судлаачийн хувьд аюултай, хөдөлмөр их шаарддаг, субъектив аргуудаас зайлсхийх боломжтой болгодог (G. pallidum-ийн омгийг шилжүүлэн суулгах, урвал үүсгэх үед эмгэг төрүүлэгч T. pallidum-тай ажиллах). Энэ нь тэмбүүгийн оношлогоонд бусад трепонемал шинжилгээнээс (RIF ба ялангуяа RIBT) иммуноблотын аргыг илүүд үздэг.

10. Аргын өөрчлөлт

Энэ арга дээр суурилсан хэд хэдэн арилжааны туршилтын системүүд байдаг. Тэдгээрийн зарим нь форматтай байдаг барууны толбо, өмнө нь полиакриламидын гель электрофорезоор тусгаарлагдсан T. pallidum-ийн уургийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг шилжүүлсэн туузуудаас бүрдэнэ.

Бусад нь форматтай шугаман толбо, T. pallidum, TpN15, TpN17, TpN47, TmpA-ийн гадаргуугийн эсрэгтөрөгчийн аналогууд - салангид шугам хэлбэрээр рекомбинант болон синтетик полипептидүүд шингэсэн туузуудаас бүрдэнэ.

Вестерн blot-ийн үр дүнг тайлбарлахад илүү хэцүү байдаг, учир нь туузууд нь олон төрлийн эсрэгбиемүүдийг харуулдаг бөгөөд тэдгээрийн ихэнх нь бүлгийн өвөрмөц шинж чанартай байдаг. Үүний эсрэгээр, шугаман толбоны үр дүнгийн тайлбар нь энгийн байдаг; Үүнээс гадна туузан дээр хэвлэсэн хяналтын нэмэлт шугамууд нь T. pallidum-ийн дөрвөн эсрэгтөрөгчийн эсрэгбиеийн түвшинг хагас тоон байдлаар үнэлэх боломжийг олгодог.

xMAP технологи

xMAP нь нэг биологийн дээжинд олон анализаторыг нэгэн зэрэг илрүүлэх замаар олон параметрт судалгаа хийх боломжтой орчин үеийн технологи юм. Хатуу фаз болгон барьж авах урвалжууд (олигонуклеотид, эсрэгбие, эсрэгтөрөгч) бүрсэн өнгөт микро бөмбөрцөгийг ашигладаг.

Туршилтын дээжийг микро бөмбөрцөг агуулсан уусмалд нэмнэ. Дээжинд илэрсэн аналитууд нь холбогдох микро бөмбөрцөгт холбогдож, дараа нь илрүүлэгч бодис (эсрэгбие илрүүлэх, флюресцент шошго) уусмалд нэмнэ. Шинжилгээнд хамрагдсан аналитийг илрүүлэхийн тулд хоёр лазерын системийг ашигладаг бөгөөд энэ нь дээжинд аналит байгаа эсэхийг чанарын үнэлгээ (үүний хувьд микро бөмбөрцөгийг өнгөөр ​​ангилдаг улаан лазер ашигладаг) болон тоон үнэлгээ хийх боломжийг олгодог. дээж дэх аналитын агууламж (үүнд ногоон лазер ашигладаг).

Програм хангамжаар тоноглогдсон Bio-Plex 200 (био-рад), Bio-Plex2200 (био-рад), Luminex100 (luminex), Luminex200 (luminex) зэрэг анализаторууд дээр судалгаа автоматаар хийгддэг.

xMAP технологийн гүйцэтгэл нь биоматериалын хэмжээ багатай сонгодог ферменттэй холбоотой дархлаа сорилтын шинжилгээний (ELISA) гүйцэтгэлээс хамаагүй давж гардаг.

Аналитик өндөр мэдрэмжтэй xMAP технологийг одоогоор эмнэлзүйн олон асуудлыг шийдвэрлэхэд ашиглаж байна. Үүний тусламжтайгаар биологийн материалын нэг дээжинд мэдэгдэж буй онкомаркер, зүрхний маркер, цочмог үе ба чихрийн шижин өвчний маркер, өргөн хүрээний цитокин, химокин, өсөлтийн хүчин зүйлсийг нэгэн зэрэг илрүүлдэг. Нэг биологийн дээжинд олон аналитыг нэгэн зэрэг илрүүлэх нь өвчтөний үзлэг хийх хугацааг эрс багасгадаг. Өнөөдрийг хүртэл xMAP аргыг ашиглан БЗДХ-ын эмгэг төрүүлэгчид, ялангуяа тэмбүүгийн халдварын эсрэгбиемийг илрүүлэх хэд хэдэн шинжилгээний системийг боловсруулсан.

ЭМНЭЛГИЙН ТӨВ"Самотехная дээр"

Цагийн дагуу хүлээн авна уу! Бямба Ням гараг.

Тэмбүү нь бэлгийн замаар дамжих халдварт өвчин юм. Өвчин үүсгэгч бодис нь дотоод эрхтэн, салст бүрхэвч, арьсанд нөлөөлдөг цайвар трепонема (спирохета) зэрэг бактери юм.

Өвчин илрүүлэхийн тулд цусны шинжилгээ, зарим тохиолдолд тархи нугасны шингэнийг хэрэглэдэг. Үр дүнг нэмэх буюу загалмайгаар 1-ээс 4 хүртэлх хэмжээгээр хэрэглэнэ.

Тэмбүүгийн дөрвөн загалмай нь хүний ​​хувьд хамгийн аюултай үе гэж тооцогддог. Туршилтын тайлбар, оношийг зөвхөн эмч тодорхойлно.

Өвчний дөрвөн үе шат, тэдгээрийн шинж чанар

Бэлгийн замын халдварт өвчний тодорхойлолт нь трепонема байгаа эсэхийг цусыг судлах замаар хийгддэг.

Серологийн урвал ашиглан тэмбүүг таних энэ арга нь олон шинжилгээний хамгийн түгээмэл арга юм.

Дархлаа судлаач өвчнийг тодорхойлох тусгай системийг бий болгосон бөгөөд загалмай нь эсрэгбиеийн хэмжээг харуулдаг. Тэд өвчин өөрөө биш, харин трепонема, шархлаа, тэмбүүгийн тууралт байдаг гэдгийг мэдэх нь чухал юм.

Эсрэгбиеийн титрийн өсөлт нь эмгэг төрүүлэгчийн идэвхтэй нөхөн үржихүйг илтгэдэг бөгөөд эсрэгбие байгаа эсэхийг эерэг үнэлгээтэй аливаа шинжилгээнд загалмайнууд агуулагддаг. Өвчний үе шат, тэдгээрийн онцлогийг авч үзье.

Нэг загалмай тэмбүү

Хэрэв загалмай байгаа бол тэмбүү эерэг боловч өвчинтэй тэмцэхийн тулд цусан дахь эсрэгбиемүүдийг ажиглахад ч эргэлзээ төрдөг.

Тиймээс эмч нар ийм шинжилгээний үр дүнг эргэлзээтэй гэж нэрлэдэг. Ихэнхдээ шинжилгээний үр дүн нь өөр өвчнийг илтгэдэг.

1+ үр дүн нь халдварын үе шатнаас хойш бага хугацаа өнгөрсөн гэсэн үг юм. Бүрэн эмчилгээ хийсний дараа эсрэгбие нь амьд үлдсэн тохиолдолд байж болно.

Хоёр загалмай тэмбүү

Хоёр загалмай нь эерэг үр дүн гэсэн үг бөгөөд энэ нь цусан дахь трепонема байгааг илтгэнэ.

Титрийн өсөлт нь цусан дахь концентраци бага байгааг илтгэнэ. Тиймээс эмчилгээг эхлэхээс өмнө 2-р дүгнэлтийг баталгаажуулахын тулд нянгийн шинжилгээг хийх хэрэгтэй.

Тэмбүү гурван загалмай

Гурван загалмайн оноотой цусны шинжилгээ нь эерэг үр дүнг харуулж байгаа бөгөөд үүнийг үгүйсгэх аргагүй юм. Цусны давтан судалгаа нь зөвхөн 3-р загалмайн оношийг баталгаажуулдаг бөгөөд энэ нь хөгжлийн II үе шатанд өвчний шинж тэмдэг юм.

Тэмбүү дөрвөн загалмай

Хамгийн тааламжгүй дүгнэлт бол 4 загалмайн үр дүн юм. Гэхдээ энэ нь өвчнийг эмчлэх боломжгүй гэсэн үг биш юм.

Энэ үе шат нь мэдэгдэхүйц тууралт, үс унах, халуурах зэргээр тодорхойлогддог. Эсрэгбиеийн тоо өндөр түвшинд байгаа тул дүгнэлт нь эргэлзээгүй юм.

Шалгалт хэрхэн явагддаг вэ?

Тэмбүүг хүлээн зөвшөөрөх нь өвчтөний үзлэгээс эхлээд эсрэгбиемийг илрүүлэх цусыг судлах хүртэл хоёр үе шаттайгаар явагддаг.

Эмч өвчтөнийг шалгаж, өвчний магадлалыг аль хэдийн тогтоодог.

• бэлэг эрхтэн эсвэл амны хөндийд шархлаа илрүүлэх;
• арьсны тууралт, лац;
• толгой дахь халзан.

Эмч нь сэжигтэй бэлгийн хавьталд орсон эсэх, эсвэл бэлгийн замын халдварт өвчний эмчилгээний талаархи асуултанд үндэслэн өвчтөний мэдээллийг тодруулдаг.

Лабораторид үзлэг хийх

Өнөөдөр тэмбүүгийн 4 загалмайг илрүүлэх судалгааг олон янзаар хийж болох бөгөөд хамгийн алдартайг нь доор үзүүлэв.

• RPR нь цитоплазмын мембраны фосфолипидын цусан дахь эсрэгбиемүүдийг тодорхойлох шинжилгээ юм;
• RIF (иммунофлуоресценцийн урвал) нь өвчтөнүүдийн 80% -д эхний шатанд аль хэдийн эерэг үр дүнг харуулдаг тул илүү мэдрэмтгий урвал юм;
• RW (Германы дархлаа судлаач Вассерманы арга) нь шинжилгээ хийх, үр дүнтэй эмийн бэлдмэлийг бичих боломжийг олгодог хурдан бөгөөд найдвартай судалгааны арга юм;
• цусны ферментийн дархлааны шинжилгээ;
• урвал нь immobilisins гэх мэт эсрэгбиемүүдээр бактерийг хөдөлгөөнгүй болгох үзэгдэл дээр суурилдаг;
• идэвхгүй гемагглютинаци нь эсрэгбие байгаа эсэх, хэмжээг харуулдаг.

Өнөөдрийг хүртэл тэмбүүг ямар ч үе шатанд эмчилж болно. Гэхдээ халдвар нь бүх биед нөлөөлөөгүй тохиолдолд өвчний анхны илрэлүүдэд эмчилгээг тэсвэрлэхэд илүү хялбар байдаг.

Эмчилгээний хугацаа, эмийг хүний ​​​​биеийн онцлог шинж чанар, гэмтлийн үе шатыг үндэслэн венерологичоор тогтооно.

Тэмбүү өвчнөөс урьдчилан сэргийлэх хамгийн сайн арга бол эрүүл мэнддээ бүрэн итгэлтэй байгаа байнгын хамтрагчтай ойр дотно харилцаатай байх явдал гэдгийг бүү мартаарай.

RPHA шинжилгээ нь бусад цусны шинжилгээний хамгийн чухал арга юм. Үүний тусламжтайгаар та гэдэсний халдварт шинж чанартай тааламжгүй өвчний хөгжлийг тодорхойлж болно. Гэхдээ ихэнхдээ шинжилгээг тэмбүүг илрүүлэхэд ашигладаг. Судалгаа нь өндөр нарийвчлал, найдвартай байдал юм.

RPHA нь идэвхгүй гемагглютинацийн урвал гэсэн үг юм.

RPHA нь эритроцитуудын агглютинацийн үзэгдэл дээр суурилдаг бөгөөд тэдгээрт тэмбүүтэй өвчтөний цусны ийлдэс нэмэхэд эсрэгтөрөгч - RPHA урвалжууд гадаргуу дээр шингэдэг.

Тэмбүүгийн халдвартай хүний ​​ийлдэсийг RPHA урвалжтай хослуулсны дараа эритроцитуудын наалдац (хавсралт эсвэл наалт) үүсч, тунадас үүснэ. Наалдацын зэрэг нь цусны ийлдэс дэх эсрэгбиеийн хуримтлал, нягтралаас шууд хамаардаг тул RPGA нь эсрэгбие байгаа эсэхийг илрүүлэхээс гадна тэдгээрийн тоог тодорхойлоход тусалдаг.

Үр дүн нь янз бүрийн эсрэгбиемүүдийн илрэлээр илэрхийлэгддэг анхдагч ба хоёрдогч халдварт хуваагддаг. Анхдагч үед IgM, хоёрдогч үед IgG идэвхждэг. Хоёрдахь үе шат хүртэлх судалгааны нарийвчлал улам бүр тодорхой болж байна. Хэрэв эхний үе шатанд энэ нь ойролцоогоор 96% байвал хоёр дахь шатанд 99% хүрч болно.

Шинжилгээ нь бие даасан судалгааны хувьд сайн боловч эерэг өвөрмөц бус судалгааны дараа үүнийг баталгаажуулах арга болгон ашиглах нь дээр.

Өндөр нарийвчлалтай тул энэ шинжилгээг өвчтөний тэмбүүгийн эмгэгийн эхлэлийг батлах эсвэл үгүйсгэхэд улам бүр ашиглагдаж байна.

Түүнчлэн, илүү найдвартай байхын тулд RPHA-ийн дараа өөр нэг баталгаажуулах сорилыг, жишээлбэл, "трепонемал" ферментийн дархлааны шинжилгээг хийж болно.

Ерөнхийдөө оношилгоог зөвхөн 1 төрлийн үзлэгээр бус, янз бүрийн нэмэлт аргуудыг хослуулан цогц байдлаар хийдэг.

Эмнэлзүйн лабораторийн оношлогооны эмчээс асуултаа асуугаарай

Анна Поняева. Тэрээр Нижний Новгородын Анагаах ухааны академийг (2007-2014), клиник лабораторийн оношлогооны чиглэлээр резидентур (2014-2016) төгссөн.

Шинжилгээний жижиг хасах, эс тэгвээс нэг онцлог шинж чанар нь өвчин эдгэрсний дараа ч түүний мэдрэмж юм. Үр дүн нь тэмбүүтэй байсан хүний ​​амьдралын туршид эерэг хэвээр байна. Энэ шалтгааны улмаас RPHA нь эрт болон хожуу өвчнийг оношлоход ашиглагддаггүй. Мөн эмчилгээний үр дүнг тодорхойлохын тулд энэ шинжилгээг ашиглах боломжгүй юм.

Ямар нэгэн эерэг үр дүн гарсан тохиолдолд халдварын сэжиг байдаг. Гэхдээ заримдаа хуурамч эерэг хариу үйлдэл үзүүлж болно. Үнэн бол түүний тоон хэмжээ нь ихэвчлэн 3% -иас хэтрэхгүй бөгөөд хэд хэдэн халдварт бус шалтгаанаас үүдэлтэй байдаг.