Análisis P24. Valor pronóstico de la detección del antígeno p24 del VIH utilizando sistemas de prueba con mayor sensibilidad analítica

Relevancia de la identificación Personas infectadas por el VIH sobre el primeras etapas La infección se debe a la necesidad de una encuesta epidemiológica más efectiva, organización oportuna de los necesarios medidas preventivas entre las personas de contacto, así como posible aplicación Terapia antirretroviral de ciclo corto para reducir la carga viral y mejorar el pronóstico. Informar oportunamente al paciente sobre la infección ayuda a reducir el riesgo de transmisión de la enfermedad y su posible participación en la donación.

El diagnóstico de infección por VIH antes de la aparición de un resultado positivo de inmunotransferencia (IB) se confirma mediante la detección del antígeno p24 y / o ácido nucleico del VIH en el suero sanguíneo del paciente.

La determinación del antígeno p24 mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) es una forma sencilla y económica de demostrar la presencia de una proteína viral en la sangre de un paciente debido a la replicación viral intensiva en las primeras semanas después de la infección. La prueba del antígeno p24 está disponible para laboratorios con capacidades ELISA de rutina. En comparación con la determinación de la carga viral por el método de reacción en cadena de la polimerasa, es menos costoso y laborioso. A pesar de que se conoce la estrategia para detectar la infección en el período seronegativo, esta prueba aún no se ha incluido en el algoritmo para realizar el diagnóstico de VIH. Se sabe que el mayor porcentaje de detección de p24 se observa en sueros con resultados cuestionables de IB. Sin embargo, se ha demostrado que los sistemas de prueba con un umbral analítico estándar de sensibilidad (10 pg / ml) tienen una sensibilidad diagnóstica y una importancia pronóstica insuficientes de la p24 detectada para su inclusión en el proceso de diagnóstico de rutina. En este sentido, es de gran interés el desarrollo y la implementación de un sistema de prueba para el antígeno p24 con mayor sensibilidad analítica.

El objetivo de este trabajo es evaluar la importancia pronóstica de la detección del antígeno p24 del VIH utilizando sistemas de prueba con diferentes umbrales de sensibilidad analítica en personas con resultados dudosos de IB.

En un estudio retrospectivo de sueros con un resultado indefinido para anticuerpos contra el VIH en IB, el uso de un sistema de prueba para el antígeno p24 con un umbral de sensibilidad analítica de 0.5 pg / ml reveló 50% de pacientes infectados, y el uso de un sistema de prueba que detecta 8 pg / ml - 22,9%. El uso de un conjunto adicional de reactivos para la destrucción del complejo inmune permite incrementar la detección del antígeno p24 hasta en un 55,3%. El valor predictivo de la presencia de infección por VIH con pruebas adicionales para el antígeno p24 fue del 91,7 al 96%. La introducción de una prueba adicional para el antígeno p24 del VIH con una sensibilidad analítica de 0,5 pg / ml en el algoritmo de diagnóstico del VIH permite confirmar el diagnóstico de VIH en una etapa temprana de la enfermedad en al menos el 13% de los casos en individuos con resultado incierto de IB. (Ver artículo: Neshumaev D.A. et al. "Valor pronóstico de detectar el antígeno p24 del VIH cuando se utilizan sistemas de prueba con mayor sensibilidad analítica").

"Diagnóstico de laboratorio clínico", 2009, núm. 2, pág. 40 - 42.

El SIDA es una enfermedad en la que el sistema inmunológico humano no puede proteger al cuerpo de infecciones oportunistas potencialmente mortales y enfermedades oncológicas... El VIH infecta a los linfocitos T insertando una porción de ADN viral en el genoma de la persona infectada.

Sin la terapia antirretroviral, el 50% de las personas infectadas con el VIH se convertirán en SIDA 10 años después de la infección. La muerte ocurre por infecciones oportunistas (manifestadas con una disminución de la inmunidad) o enfermedades malignas.

Los anticuerpos en el VIH 1,2 generalmente aparecen en el suero 12 semanas después de la infección, rara vez (en el 5-9% de los casos), más tarde.

El antígeno p24 VIH 1,2 detectado en suero sanguíneo indica una etapa temprana de la enfermedad. Durante las primeras semanas después de la infección, la cantidad de virus y antígeno p24 en la sangre aumenta rápidamente. Tan pronto como comienzan a producirse anticuerpos contra el VIH 1,2, el nivel de antígeno p24 comienza a disminuir. La determinación del antígeno p24 permite diagnosticar la infección por VIH en las primeras etapas de la infección, antes del desarrollo de anticuerpos.

La detección simultánea de anticuerpos contra el virus VIH-1,2 y el antígeno del virus p24 aumenta el valor diagnóstico del estudio.

  • Estrictamente con el estómago vacío (al menos 12 horas después de la última comida), se realizan las siguientes pruebas:

Análisis de sangre clínico general; determinación de grupo sanguíneo y factor Rh;

Análisis bioquímicos (glucosa, colesterol, triglicéridos, ALT, ASAT, etc.);

Estudio del sistema de hemostasia (APTT, protrombina, fibrinógeno, etc.);

Marcadores tumorales.

  • Beber agua no afecta los recuentos sanguíneos, por lo que puede beber agua.
  • Los recuentos sanguíneos pueden cambiar significativamente durante el día, por lo que recomendamos realizar todas las pruebas por la mañana. Es para los indicadores de la mañana que se calculan todas las normas de laboratorio.
  • Un día antes de la donación de sangre conviene evitar actividad física, ingesta de alcohol y cambios significativos en la dieta y la rutina diaria.
  • Dos horas antes de donar sangre para investigación, debe abstenerse de fumar.
  • Cuando investigación de laboratorio hormonas (FSH, LH, prolactina, estriol, estradiol, progesterona) solo se debe donar sangre ese día ciclo menstrualque fue recetado por un médico.
  • Todos los análisis de sangre se realizan antes de las radiografías, las ecografías y la fisioterapia.

    Antígeno del VIH: ¿qué es, qué papel juega en el diagnóstico?

    El diagnóstico del virus de la inmunodeficiencia se realiza de diversas formas. Sin embargo, los más populares en los últimos años están ganando sistemas de prueba hipersensibles. Con su ayuda, es posible identificar esta dolencia en las primeras etapas. Para esto, se usa el antígeno del VIH, cuya presencia en el cuerpo está garantizada para indicar un diagnóstico desagradable y peligroso. Se utilizan varios estudios diferentes para detectarlo.

    ¿Por qué la respuesta antígeno-anticuerpo del VIH 1, 2 es el indicador más fiable de la presencia de un virus de inmunodeficiencia?

    Comprobación del virus de la inmunodeficiencia en el gobierno instituciones medicas está libre. Pero se hace en dos etapas, si es necesario. Inicialmente, los AG para el VIH no se prueban. El primer análisis de la presencia o ausencia de una determinada enfermedad tiene como objetivo la detección de anticuerpos. Esta es la prueba ELISA. El ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas le permite identificar a las personas que tienen la garantía de no enfermarse con el virus de la inmunodeficiencia (si el control se realizó de acuerdo con todas las reglas).

    Además de infectado condicionalmente. ¿Por qué condicionalmente? El hecho es que los anticuerpos del VIH 1,2, a diferencia del AH de este virus, se secretan en el organismo por otras razones. De qué se trata exactamente. En primer lugar, esto es posible con enfermedades del sistema inmunológico. En caso de problemas con este sistema vital, el organismo produce anticuerpos como defensa, los cuales son determinados por inmunoensayo enzimático, como los que aparecen con esta peligrosa dolencia. Si el resultado de ELISA es positivo, se deriva al paciente para un estudio adicional, que se basa en la detección de la reacción AH - AT tipo 1,2. En las clínicas, la inmunotransferencia se usa con mayor frecuencia. Este es el tipo de prueba más común para detectar el virus de la inmunodeficiencia. Con su ayuda, el antígeno y los anticuerpos contra el VIH 1 y 2 no solo se detectan, sino que también se prueban para determinar la fuerza de la reacción.

    ¿Qué es el antígeno p24 del VIH?

    Antes de hablar sobre qué métodos se pueden utilizar para detectar el antígeno del VIH ag del VIH, conviene explicar qué es. Los científicos han podido descubrir durante mucho tiempo que AG, que está etiquetado como p24 en formas de prueba y en laboratorios, es una cápside de un retrovirus. Hablando en palabras simples, es una proteína del virus de la inmunodeficiencia. La determinación del antígeno del VIH es imposible sin la detección de anticuerpos del primer y segundo tipo. Después de todo, los AG están estrechamente unidos a los anticuerpos. Se forman en el organismo como una respuesta inmune a la aparición de anticuerpos, los cuales, a su vez, son una especie de "invasores" destinados a destruir el sistema inmunológico y producir material biológico peligroso.

    АТ y АГ a los tipos 1 y 2 del VIH se detectan en reacción entre sí. Los primeros desempeñan el papel de moléculas extrañas en el cuerpo humano. Estos últimos sirven como una especie de desarrolladores de proteínas o polisacáridos. En el caso del virus de la inmunodeficiencia, AH induce una respuesta inmune. En consecuencia, en medicina y ciencia relacionada con el estudio de esta enfermedad, se clasifican como inmunógenos.

    El antígeno P24 de los tipos VIH 1 y 2 se detectan únicamente mediante un estudio exhaustivo del material biológico. Muy a menudo, se usa sangre venosa para el análisis. En algunos casos, los espermatozoides o el líquido secretor secretado por los órganos genitales femeninos son adecuados para esto. Análisis combinado para Antígeno del VIH producido de tres formas conocidas. ¿De qué estudios concretos estamos hablando? Se trata de una inmunotransferencia, una prueba combinada (combinación de VIH y vih) y un ensayo de inmunoquimioluminiscencia. Cada uno de ellos debe discutirse por separado.

    Transferencia inmunológica: anticuerpos y antígenos del VIH 1 y 2

    Como se mencionó anteriormente, la inmunotransferencia es una de las pruebas más comunes que detectan el antígeno del VIH. ¿Cómo se produce? Inicialmente, se extrae sangre de la vena del paciente. El examen se realiza con el estómago vacío. Treinta y cuarenta minutos antes de esto, no se recomienda fumar al paciente. La esencia del estudio es que si una persona tiene un virus de inmunodeficiencia tipo 1 o 2 en el cuerpo, la reacción antígeno-anticuerpo es persistente e indisoluble. El material biológico del sujeto se divide primero en un reactivo especial y luego se coloca en una tira que, por regla general, es una ampolla con células de poliestireno. Como resultado de la adición de reactivos especiales, el asistente de laboratorio primero descubre si esta reacción ocurrirá y luego, con la ayuda de lavados de sangre repetidos, saca conclusiones sobre cuán persistente es. Esto permite comprender si existe un virus de inmunodeficiencia en el organismo, que en el futuro es el factor más importante para realizar un diagnóstico.

    Se recomienda que la prueba de VIH AG-AT, producida mediante inmunotransferencia, no se realice antes de cuatro a cinco semanas después de la supuesta infección. A pesar de que esta prueba es un sistema de cuarta generación, no es hipersensible y tiene un error de varios por ciento (de dos a tres).

    Análisis de hipersensibilidad: dúo de anticuerpos contra el VIH (combo) tipo 1, 2

    El ensayo combinado de VIH (vih) ag-ab (AG-AT), a diferencia de la inmunotransferencia, es hipersensible. Los expertos médicos dicen que su uso es aconsejable tan pronto como dos semanas después de la supuesta infección. Está dirigido al estudio de anticuerpos específicos, que son una especie de respuesta inmune del cuerpo humano a un invasor como el virus de la inmunodeficiencia, así como AG p24. Los anticuerpos anti-VIH Нiv duo de los tipos 1 y 2 también están destinados a detectar anticuerpos contra esta peligrosa dolencia. Con su ayuda, es posible no solo detectarlos en la sangre, sino también determinar el tipo de enfermedad.

    La prueba combinada de antígenos del VIH es una prueba combinada. También verifica la reacción antígeno-anticuerpo, que indica la presencia de una enfermedad terrible en el cuerpo.

    Ensayo de inmunoquimioluminiscencia: vih 1,2 combinado HIV AT-AG IHLA

    La prueba IHLA para VIH at-ag también es hipersensible. Dicho estudio se basa en una especie de reacción AG-AT. La especificidad del método es de aproximadamente el noventa y dos por ciento, mientras que su confiabilidad varía de noventa y ocho a noventa y nueve. A partir de esto, podemos concluir que dicho análisis tiene un error, pero es relativamente pequeño. Y, si es necesario, se puede cubrir fácilmente con un control repetido. Dicho análisis se aplica tan pronto como dos o tres semanas después de la supuesta infección.

    Esta prueba combinada del VIH tiene como objetivo examinar la sangre venosa, en el caso de verificar la presencia de un virus de inmunodeficiencia en el cuerpo. Cuando se detectan otras enfermedades y patologías, se utiliza orina o líquido secretor, que se secreta desde los genitales. AT y AG para el virus de inmunodeficiencia en IHLA también se prueban para la reacción. Para ello, se utilizan reactivos especiales y tiras con células. Un estudio realizado en varias etapas le permite establecer un diagnóstico o refutarlo de manera rápida y precisa.

    Todos los métodos anteriores para diagnosticar el virus de la inmunodeficiencia por medio de una reacción AT-AG persistente son eficaces. Se diferencian solo en términos del tiempo de investigación permitido. Depende del médico decidir qué método utilizar.

    Prueba de VIH / SIDA - antígeno p24 en sangre

    El antígeno p24 está ausente en el suero.

    El antígeno p24 es una proteína de la pared de nucleótidos del VIH. La etapa de las manifestaciones primarias después de la infección por VIH es consecuencia del inicio del proceso replicativo. El antígeno p24 aparece en la sangre 2 semanas después de la infección y puede detectarse mediante ELISA en el período de 2 a 8 semanas. Después de 2 meses desde el inicio de la infección, el antígeno p24 desaparece de la sangre. Más tarde curso clínico Las infecciones por VIH marcan un segundo aumento en los niveles de proteína p24 en sangre. Cae sobre la formación del SIDA.

    Los sistemas de prueba ELISA existentes para la detección del antígeno p24 se utilizan para la detección temprana del VIH en donantes de sangre y niños, para determinar el pronóstico del curso de la enfermedad y controlar la terapia. El método ELISA tiene una alta sensibilidad analítica, lo que permite detectar el antígeno p24 del VIH-1 en suero sanguíneo a concentraciones de 5-10 pg / ml y menos de 0,5 ng / ml de VIH-2, y especificidad. Al mismo tiempo, debe tenerse en cuenta que el contenido del antígeno p24 en la sangre está sujeto a variaciones individuales, lo que significa que solo el 20-30% de los pacientes pueden identificarse utilizando este estudio en período temprano después de la infección.

    Los anticuerpos contra el antígeno p24 de las clases IgM e IgG aparecen en la sangre a partir de la segunda semana, alcanzan un pico en 2-4 semanas y permanecen en este nivel durante diferentes momentos: anticuerpos IgM durante varios meses, desapareciendo dentro de un año después de la infección, y los anticuerpos IgG pueden durar años.

    Editor médico experto

    Alexey Portnov

    Educación: Universidad Médica Nacional de Kiev. AUTOMÓVIL CLUB BRITÁNICO. Bogomolets, especialidad - "Medicina general"

    Métodos para diagnosticar la infección por VIH.

    Actualmente, las nuevas tecnologías de diagnóstico permiten identificar las causas etiológicas y patogénicas de muchas enfermedades y afectan radicalmente los resultados del tratamiento. Quizás los resultados más impresionantes de la introducción de estas tecnologías en la práctica clínica se hayan logrado en el campo de la inmunología y el diagnóstico. enfermedades infecciosas.

    Los sistemas de prueba basados \u200b\u200ben el inmunoensayo enzimático y el análisis de inmunoquimioluminiscencia permiten la detección de anticuerpos de varias clases, lo que aumenta significativamente el contenido de información de los métodos de sensibilidad y especificidad clínica, analítica para el diagnóstico de enfermedades infecciosas. Cabe señalar que los avances más significativos en el diagnóstico de infecciones están asociados con la introducción del método de reacción en cadena de la polimerasa en la práctica de laboratorio, que se considera el "estándar de oro" en el diagnóstico y evaluación de la efectividad del tratamiento de una serie de enfermedades infecciosas.

    Para el estudio se pueden utilizar diversos materiales biológicos: suero, plasma sanguíneo, raspado, biopsia, pleural o fluido cerebroespinal (LCR). Primero que nada, los métodos diagnóstico de laboratorio Las infecciones están destinadas a identificar enfermedades como hepatitis viral B, C, D, infección por citomegalovirus, infecciones de transmisión sexual (gonorrea, clamidia, micoplasma, ureaplasma), tuberculosis, infección por VIH, etc.

    Infección por VIH: una enfermedad causada por el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH). largo tiempo persistiendo en linfocitos, macrófagos, células del tejido nervioso, como resultado de lo cual el daño progresivo lento al sistema inmunológico y sistema nervioso el cuerpo, que se manifiesta por infecciones secundarias, tumores, encefalitis subaguda y otros cambios patológicos.

    Los agentes causantes de la infección, virus de inmunodeficiencia humana del primer y segundo tipo (VIH-1, VIH-2), pertenecen a la familia de los retrovirus, la subfamilia de los virus lentos. Los viriones son partículas esféricas de 100-140 nm de diámetro. La partícula viral tiene una envoltura fosfolipídica externa que incluye glicoproteínas (proteínas estructurales) con un cierto peso molecular, medido en kilodaltons. En el VIH-1, estos son gpl60, gpl20, gp41. La envoltura interna del virus que cubre el núcleo también está representada por proteínas con un peso molecular conocido: p17, p24, p55 (el VIH-2 contiene gpl40, gpl05, gp36, p16, p25, p55).

    El genoma del VIH incluye ARN y la enzima transcriptasa inversa (transcriptasa inversa). Para que el genoma del retrovirus se conecte con el genoma de la célula huésped, el ADN se sintetiza primero en la plantilla de ARN viral usando transcriptasa inversa. Luego, el ADN del provirus se inserta en el genoma de la célula huésped. El VIH tiene una variabilidad antigénica pronunciada que es significativamente mayor que la del virus de la influenza.

    En el cuerpo humano, el objetivo principal del VIH son los linfocitos T, que transportan la mayor cantidad de receptores CD4 en la superficie. Después de que el VIH penetra en la célula con la ayuda de la revertasa, siguiendo el patrón de su ARN, el virus sintetiza el ADN, que se incorpora al aparato genético de la célula huésped (linfocitos CD4) y \u200b\u200bpermanece allí de por vida en estado provirus. Además de los linfocitos T auxiliares, se ven afectados macrófagos, linfocitos B, células de neuroglia, mucosa intestinal y algunas otras células. La razón de la disminución del número de linfocitos T (células CD4) no es solo el efecto citopático directo del virus, sino también su fusión con células no infectadas. Junto con la derrota de los linfocitos T en pacientes con infección por VIH, hay una activación policlonal de los linfocitos B con un aumento en la síntesis de inmunoglobulinas de todas las clases, especialmente IgG e IgA, y el posterior agotamiento de esta parte del sistema inmunológico. La alteración de la regulación de los procesos inmunitarios también se manifiesta por un aumento en el nivel de α-interferón, β2-microglobulina y una disminución en el nivel de IL-2. Como resultado de la disfunción del sistema inmunológico, especialmente cuando la cantidad de linfocitos T (CD4) disminuye a 400 células en 1 μl de sangre o menos, surgen condiciones para la replicación incontrolada del VIH con un aumento significativo en la cantidad de viriones en varios ambientes del cuerpo. Como resultado de la derrota de muchas partes del sistema inmunológico, una persona infectada con el VIH se vuelve indefensa contra los patógenos de diversas infecciones.

    En el contexto del aumento de la inmunosupresión, se desarrollan enfermedades progresivas graves que no ocurren en una persona con un funcionamiento normal. sistema inmunitario... Se trata de enfermedades que la Organización Mundial de la Salud (OMS) ha definido como marcadores o indicadores del SIDA.

    El primer grupo: enfermedades inherentes solo a la inmunodeficiencia grave (CD4<200). Клинический диагноз ставится при отсутствии анти-ВИЧ-антител или ВИЧ-антигенов.

    El segundo grupo: enfermedades que pueden desarrollarse tanto en el contexto de una inmunodeficiencia grave como, en algunos casos, sin ella.

    Por tanto, en estos casos es necesaria la confirmación del diagnóstico por laboratorio.

    • candidiasis del esófago, tráquea, bronquios;
    • criptococosis extrapulmonar;
    • criptosporidiosis con diarrea durante más de 1 mes;
    • lesiones por citomegalovirus de varios órganos distintos del hígado, el bazo o los ganglios linfáticos en un paciente mayor de 1 mes;
    • una infección causada por el virus del herpes simple, que se manifiesta por úlceras en la piel y mucosas, que persisten durante más de 1 mes, así como bronquitis, neumonía o esofagitis de cualquier duración, que afectan a un paciente mayor de 1 mes;
    • sarcoma de Kaposi generalizado en pacientes menores de 60 años;
    • linfoma del cerebro (primario) en pacientes menores de 60 años;
    • neumonía intersticial linfocítica y / o displasia linfoide pulmonar en niños menores de 12 años;
    • infección diseminada causada por micobacterias atípicas (complejo mycobacterium M. aviumintracellulare) con localización extrapulmonar o localización (además de los pulmones) en la piel, ganglios linfáticos cervicales, ganglios linfáticos de las raíces de los pulmones;
    • neumonía por pneumocystis;
    • leucoencefalopatía multifocal progresiva;
    • toxoplasmosis del cerebro en pacientes mayores de 1 mes.
    • infecciones bacterianas, combinadas o recurrentes, en niños menores de 13 años (más de dos casos en 2 años de observación): sepsis, neumonía, meningitis, daño en huesos o articulaciones, abscesos causados \u200b\u200bpor bastoncillos hemofílicos, estreptococos;
    • coccidioidomicosis diseminada (localización extrapulmonar);
    • Encefalopatía por VIH (demencia por VIH, demencia por SIDA);
    • histoplasmosis con diarrea que persiste durante más de 1 mes;
    • isosporosis con diarrea que persiste durante más de 1 mes;
    • sarcoma de Kaposi a cualquier edad;
    • linfoma del cerebro (primario) en personas de cualquier edad;
    • otros linfomas de células B (a excepción de la enfermedad de Hodgkin) o linfomas de inmunofenotipo desconocido: linfomas de células pequeñas (como el linfoma de Burkitt, etc.); sarcomas inmunoblásticos (linfomas inmunoblásticos, de células grandes, histiocíticos difusos, difusos indiferenciados);
    • micobacteriosis diseminada (no tuberculosis) con lesiones además de los pulmones de la piel, ganglios linfáticos cervicales o hiliares;
    • tuberculosis extrapulmonar (con daño a los órganos internos, además de los pulmones);
    • septicemia por salmonella, recurrente;
    • Distrofia del VIH (agotamiento, pérdida de peso dramática).

    Hay muchas clasificaciones de SIDA.

    De acuerdo con la nueva clasificación propuesta por los Centros para el Control de Enfermedades de EE. UU. (Tabla 2 - ver enlace fuente arriba), el SIDA se diagnostica en personas con un recuento de células CD4 de menos de 200 / μL, incluso en ausencia de enfermedades definitorias del SIDA.

    La categoría B incluye varios síndromes, de los cuales los más importantes son angiomatosis bacilar, candidiasis orofaríngea, candidiasis vulvovaginal recurrente, difícil de tratar, displasia cervical, carcinoma cervical, púrpura trombocitopénica idiopática, listeriosis, neuropatía periférica.

    Anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2 en la sangre

    Los anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2 normalmente están ausentes en el suero sanguíneo.

    La determinación de anticuerpos contra el VIH es el principal método de diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH. El método se basa en un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA): la sensibilidad es superior al 99,5%, la especificidad es superior al 99,8%. Los anticuerpos contra el VIH aparecen en 90 a 95% de las personas infectadas dentro de un mes después de la infección, en 5 a 9%, después de 6 meses, en 0,5 a 1%, en una fecha posterior. En la etapa del SIDA, la cantidad de anticuerpos puede disminuir hasta desaparecer por completo.

    El resultado de la investigación se expresa cualitativamente: positivo o negativo.

    Un resultado negativo de la prueba indica la ausencia de anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2 en el suero sanguíneo. El laboratorio emite un resultado negativo inmediatamente después de su preparación. Tras la recepción de un resultado positivo (detección de anticuerpos contra el VIH) para evitar resultados falsos positivos en el laboratorio, el análisis se repite 2 veces más.

    Inmunotransferencia de anticuerpos a proteínas virales del VIH en suero sanguíneo

    Los anticuerpos contra las proteínas virales del VIH normalmente están ausentes en el suero sanguíneo.

    El método ELISA para la determinación de anticuerpos contra el VIH es un método de detección. Cuando se obtiene un resultado positivo, para confirmar su especificidad, se utiliza el método de inmunotransferencia - Western-blot - contraprecipitación en un gel de anticuerpos en el suero sanguíneo del paciente con diversas proteínas virales separadas por peso molecular mediante electroforesis y aplicadas sobre nitrocelulosa. Se determinan los anticuerpos contra las proteínas virales gp41, gp120, gp160, p24, pi8, p17, etc.

    De acuerdo con las recomendaciones del Centro Ruso para la Prevención y el Control del SIDA, la detección de anticuerpos contra una de las glicoproteínas gp41, gpl20, gpl60 debe considerarse un resultado positivo. Si se detectan anticuerpos contra otras proteínas del virus, el resultado se considera dudoso, tal paciente debe ser examinado dos veces, después de 3 y 6 meses.

    La ausencia de anticuerpos contra proteínas específicas del VIH significa que el inmunoensayo enzimático dio un resultado falso positivo. Al mismo tiempo, en el trabajo práctico, al evaluar los resultados del método de Western blot, es necesario guiarse por las instrucciones proporcionadas por la empresa al "Kit para Western blot" usado.

    El método de inmunotransferencia se utiliza para el diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH.

    Antígeno P24 en suero

    El antígeno p24 está ausente en el suero sanguíneo.

    El antígeno p24 es una proteína de la pared de nucleótidos del VIH. La etapa de las manifestaciones primarias después de la infección por VIH es una consecuencia del inicio del proceso de replicación. El antígeno p24 aparece en la sangre 2 semanas después de la infección y puede detectarse mediante ELISA en el período de 2 a 8 semanas. Después de 2 meses desde el momento de la infección, el antígeno p24 desaparece de la sangre. Posteriormente, en el curso clínico de la infección por VIH, se produce un segundo aumento del contenido de proteína p24 en la sangre. Cae sobre la formación del SIDA. Los sistemas de prueba ELISA existentes para la detección del antígeno p24 se utilizan para la detección precoz del VIH en donantes de sangre y niños, para determinar el pronóstico del curso del SIDA y para controlar la terapia en pacientes con SIDA. ELISA tiene una alta sensibilidad analítica, lo que permite detectar el antígeno p24 del VIH-1 en suero a una concentración de 5-10 pkg / ml y el VIH-2 - menos de 0,5 ng / ml, y especificidad. Sin embargo, debe tenerse en cuenta que el nivel de antígeno p24 en la sangre está sujeto a variaciones individuales, lo que significa que solo el 20-30% de los pacientes pueden detectarse usando este estudio en el período temprano después de la infección (Rose N.R. et al., 1997).

    Los anticuerpos contra el antígeno p24 de las clases IgM e IgG aparecen en la sangre a partir de la segunda semana, alcanzan un pico en 2-4 semanas y permanecen en este nivel varias veces: anticuerpos IgM: durante varios meses, desapareciendo dentro de un año después de la infección, y los anticuerpos IgG pueden durar años.

    El algoritmo para diagnosticar la infección por VIH depende de la fase de la enfermedad y se caracteriza por un cambio en la dinámica de detección de anticuerpos de varias clases (Fig. 1, 2 - consulte el enlace a la fuente anterior).

    El resultado de la investigación se expresa cualitativamente: positivo o negativo. Un resultado negativo de la prueba indica la ausencia de anticuerpos contra el VIH-1 y el antígeno VIH-2 y p24 en el suero sanguíneo.

    El laboratorio emite un resultado negativo inmediatamente después de su preparación. Tras la recepción de un resultado positivo (detección de anticuerpos contra VIH-1 y VIH-2 y / o antígeno p24) para evitar resultados falsos positivos en el laboratorio, el análisis se repite 2 veces más.

    Independientemente de los resultados de la prueba obtenidos, el laboratorio envía la muestra de sangre del paciente y los resultados de 3 pruebas al centro regional de SIDA para confirmar un resultado positivo o para verificar un resultado indefinido. En tales casos, el centro regional de SIDA proporcionará la respuesta final para esta encuesta.

    Detección de VIH por reacción en cadena de la polimerasa (cualitativo)

    La detección del VIH mediante reacción en cadena de la polimerasa - PCR (cualitativamente) se lleva a cabo para:

    • resolución de resultados cuestionables de estudios de inmunotransferencia;
    • para el diagnóstico temprano de la infección por VIH;
    • monitorear la efectividad del tratamiento antiviral;
    • determinar la etapa de la enfermedad del SIDA (transición de la infección a la enfermedad).

    En el caso de la infección primaria por VIH, el método de PCR permite detectar el ARN del VIH en la sangre ya entre 10 y 14 días después de la infección.

    El resultado de la investigación se expresa cualitativamente: positivo o negativo. Un resultado negativo de la prueba indica la ausencia de ARN del VIH en la sangre.

    Un resultado positivo, la detección de ARN del VIH, indica que el paciente está infectado.

    Detección de VIH por reacción en cadena de la polimerasa (cuantitativa)

    El VIH normalmente está ausente en la sangre.

    La cuantificación directa del ARN del VIH por PCR permite una predicción más precisa de la tasa de desarrollo del SIDA en personas infectadas por el VIH que la determinación del recuento de células CD4 y, por lo tanto, una evaluación más precisa de su supervivencia. Los recuentos altos de partículas virales generalmente se correlacionan con un estado inmunológico gravemente deteriorado y recuentos bajos de células CD4. Los recuentos bajos de partículas virales generalmente se correlacionan con un mejor estado inmunológico y recuentos más altos de células CD4. El contenido de ARN viral en sangre permite predecir la transición de la enfermedad al estadio clínico. Cuando el ARN-1 del VIH es\u003e copias / ml, casi todos los pacientes desarrollan cuadro clinico SIDA (Senior D., Holden E., 1996).

    Las personas con VIH-1 en sangre\u003e copias / ml tienen 10,8 veces más probabilidades de desarrollar SIDA que aquellas con VIH-1 en sangre<копий/мл. При ВИЧ-инфекции прогноз непосредственно определяется уровнем виремии. Снижение уровня виремии при лечении улучшает прогноз заболевания.

    Un grupo de expertos de EE. UU. Ha desarrollado una indicación para el tratamiento de pacientes con VIH. El tratamiento está indicado para pacientes con recuento de células CD4 en sangre.<300/мкл или уровнем РНК ВИЧ в сыворотке >copias / ml (PCR). La evaluación de los resultados de la terapia antirretroviral en personas infectadas por el VIH se lleva a cabo reduciendo el nivel de ARN del VIH en suero.

    Con un tratamiento eficaz, el nivel de viremia debería disminuir 10 veces durante las primeras 8 semanas y estar por debajo del límite de detección del método (PCR) (<500 копий/мл) через 4–6 месяцев после начала терапии.

    Así, hasta la fecha, se han introducido y utilizado muchos métodos de investigación en la práctica clínica para el diagnóstico de la infección por VIH, como para todas las demás infecciones virales. Entre ellos, el papel principal se da a la investigación serológica. Los principales métodos para diagnosticar infecciones por el VIH se presentan en la Tabla 3 (ver el enlace a la fuente anterior), donde se dividen según la importancia de cada método para detectar virus en cuatro niveles:

    • A - la prueba se usa generalmente para confirmar el diagnóstico;
    • B - la prueba es útil en determinadas circunstancias para el diagnóstico de determinadas formas de infección;
    • C - la prueba rara vez se utiliza con fines de diagnóstico, pero es de gran importancia para las encuestas epidemiológicas;
    • D: los laboratorios no suelen utilizar la prueba con fines de diagnóstico.

    Dado que para el diagnóstico de infecciones virales, además de elegir el método de análisis óptimo, no es menos importante identificar correctamente y tomar un biomaterial para la investigación, la Tabla 4 (ver el enlace a la fuente anterior) brinda recomendaciones para elegir el biomaterial óptimo para investigar la infección por VIH.

    Para monitorear a los infectados por el VIH, se deben utilizar las capacidades de un estudio integral del estado inmunológico: determinación cuantitativa y funcional de todos sus vínculos: inmunidad humoral, celular y resistencia inespecífica en general.

    En condiciones de laboratorio modernas, el principio de múltiples etapas de evaluación del estado inmunológico incluye la determinación de una subpoblación de linfocitos, inmunoglobulinas sanguíneas. Al evaluar los indicadores, debe tenerse en cuenta que la infección por VIH se caracteriza por una disminución en la proporción de células T CD4 / CD8 menor a 1. El índice CD4 / CD8 1.5-2.5 indica un estado normal, más de 2.5 indica hiperactividad, menos 1.0 - indica inmunodeficiencia. Además, la relación CD4 / CD8 puede ser inferior a 1 en la inflamación grave.

    Esta relación es de fundamental importancia a la hora de evaluar el sistema inmunológico en pacientes con sida, porque el VIH infecta y destruye selectivamente los linfocitos CD4, por lo que la relación CD4 / CD8 disminuye a valores significativamente inferiores a 1.

    La evaluación del estado inmunológico también se basa en la identificación de defectos generales o "graves" en el sistema de inmunidad celular y humoral: hipergammaglobulinemia (aumento de la concentración de IgA, IgM, IgG) o hipogammaglobulinemia en la etapa terminal; un aumento en la concentración de complejos inmunes circulantes; disminución de la producción de citocinas; debilitamiento de la respuesta de los linfocitos a los antígenos y mitógenos.

    La violación de la proporción de poblaciones en el grupo total de linfocitos B es característica de una inmunidad humoral insuficiente. Sin embargo, estos cambios no son específicos de la infección por VIH y también pueden ocurrir en otras enfermedades. En una evaluación integral de una serie de otros parámetros de laboratorio, debe tenerse en cuenta que la infección por VIH también se caracteriza por: anemia, linfa y leucopenia, trombocitopenia, un aumento en el nivel de β2-microglobulina y proteína C reactiva, un aumento en la actividad de las transaminasas en el suero sanguíneo.

    Antígeno P24 en suero

    Ag p24 en el suero falta en la norma.

    Ag p24 es una proteína de la pared de nucleótidos del VIH. La etapa de las manifestaciones primarias después de la infección por VIH es una consecuencia del inicio del proceso de replicación. Ag p24 aparece en la sangre 2 semanas después de la infección y puede detectarse mediante ELISA en el período de 2 a 8 semanas. Después de 2 meses desde el inicio de la infección, Ag p24 desaparece de la sangre. Posteriormente, en el curso clínico de la infección por VIH, se observa un segundo aumento en el contenido de proteína p24 en sangre. Cae sobre la formación del SIDA. Los sistemas de prueba ELISA existentes para la detección de Ag p24 se utilizan para la detección temprana del VIH en donantes de sangre y niños, para determinar el pronóstico del curso de la enfermedad y controlar la terapia. El método ELISA tiene una alta sensibilidad analítica, lo que permite detectar VIH-1 p24 Ag en suero a concentraciones de 5-10 pg / ml y menos de 0,5 ng / ml VIH-2, y especificidad. Al mismo tiempo, debe tenerse en cuenta que el contenido de Ag p24 en la sangre está sujeto a variaciones individuales, lo que significa que solo el 20-30% de los pacientes pueden detectarse utilizando este estudio en el período temprano después de la infección.

    Los anticuerpos IgM e IgG anti-Ag p24 aparecen en la sangre a partir de la segunda semana, alcanzan un pico en 2-4 semanas y permanecen en este nivel durante diferentes momentos: los anticuerpos IgM durante varios meses, desaparecen al año de la infección y los anticuerpos IgG pueden persistir durante años.

    La aparición de clases de AT en diferentes etapas de la infección por VIH se muestra en la Fig.

    Figura: Aparición de clases de AT en diversas etapas de la infección por VIH

    Anticuerpos contra el VIH 1 y 2 y antígeno del VIH 1 y 2 (VIH Ag / Ab Combo)

    Anticuerpos contra VIH 1 y 2 y antígeno VIH 1 y 2 (VIH Ag / Ab Combo): descripción completa del diagnóstico, indicaciones de implementación, interpretación de los resultados.

    Los anticuerpos contra el VIH 1 y 2 y el antígeno 1 y 2 del VIH (VIH Ag / Ab Combo) son anticuerpos que se forman en el cuerpo cuando se infecta con el virus de la inmunodeficiencia humana.

    El virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) es un miembro de la familia de los retrovirus y daña las células del sistema inmunológico. El virus es de dos tipos, el VIH-1 es más común y el VIH-2, principalmente en los países africanos.

    El VIH está incrustado en las células humanas, las partículas virales se multiplican, como resultado, los antígenos del virus aparecen en la superficie celular, contra los cuales se producen los anticuerpos correspondientes. Su detección en la sangre permite diagnosticar la infección por VIH.

    Los anticuerpos contra el virus de la inmunodeficiencia humana se pueden detectar de tres a seis semanas después de que el virus ingresa al torrente sanguíneo. Un fuerte aumento del virus en la sangre es característico de la etapa de manifestaciones primarias, este período cae de la tercera a la sexta semana desde el momento de la infección y se llama "seroconversión". En este momento, el laboratorio puede detectar la infección y, clínicamente, no se manifiesta en absoluto o avanza como una enfermedad de resfriado con ganglios linfáticos inflamados.

    Después de 12 semanas desde el momento de la infección, los anticuerpos se encuentran en casi todos los pacientes. En la última etapa de la enfermedad, llamada SIDA, la cantidad de anticuerpos disminuye.

    Cuánto tiempo desde el momento de la infección se detectará la infección por VIH depende del sistema de prueba utilizado en un laboratorio en particular. Los sistemas de prueba combinados de cuarta generación detectan la infección por VIH dos semanas después de que el virus ingresa al torrente sanguíneo. Y los sistemas de prueba de primera generación detectaron el VIH solo después de 6 a 12 semanas.

    Al realizar un análisis combinado, es posible detectar el antígeno p24 del VIH, que es la cápside del virus. Se detecta en la sangre de 1 a 4 semanas después de la infección, incluso antes de que aumente la concentración de anticuerpos en la sangre (antes de la "seroconversión"). Además, el estudio combinado revela anticuerpos contra el VIH-1, VIH-2, disponibles para diagnóstico de dos a ocho semanas después de la infección.

    Antes de la seroconversión, se detectan en la sangre tanto la p24 como los anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2. Después de la seroconversión, los anticuerpos se unen al antígeno p24, por lo que no se detecta p24 y se detectan anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2. Luego, la p24 y los anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2 se detectan nuevamente en la sangre. Cuando una persona infectada por el VIH desarrolla SIDA, la producción de anticuerpos se ve afectada, por lo que es posible que no haya anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2.

    El diagnóstico de la infección por VIH se realiza en la etapa de planificación del embarazo y con la observación actual de una mujer embarazada, ya que la infección por VIH puede transmitirse de mujer a feto durante el embarazo, el parto y la lactancia.

    Indicaciones para el diagnóstico del VIH.

    Sexo casual.

    Fiebre sin motivo objetivo.

    Ganglios linfáticos inflamados en varias áreas anatómicas.

    Preparación para la investigación

    La prueba del VIH se realiza 3-4 semanas después de la supuesta infección. Si el resultado es negativo, la prueba se repite después de tres y seis meses.

    Desde la última comida hasta la toma de muestras de sangre, el intervalo de tiempo debe ser de más de ocho horas.

    En la víspera, excluya los alimentos grasos de la dieta, no tome bebidas alcohólicas.

    No fume 1 hora antes de hacerse un análisis de sangre.

    La sangre para la investigación se toma por la mañana con el estómago vacío, incluso se excluye el té o el café.

    Está permitido beber agua corriente.

    Material de investigación

    Decodificación de los resultados del diagnóstico del VIH

    El análisis es cualitativo. Si no se encuentran anticuerpos contra el VIH, la respuesta es "negativa".

    Si se detectan anticuerpos contra el VIH, la prueba se repite con una serie diferente de pruebas. Un resultado positivo repetido requiere un estudio mediante el método de inmunotransferencia, el "estándar de oro" de los diagnósticos del VIH.

    1. La persona no está infectada por el VIH.
    2. Etapa terminal de la infección por VIH (SIDA).
    3. Variante seronegativa de la infección por VIH (formación tardía de anticuerpos contra el VIH).
    1. La persona está infectada por el VIH.
    2. La prueba no es informativa en niños menores de un año y medio, nacidos de madres infectadas por el VIH.
    3. Resultado falso positivo en presencia de anticuerpos en la sangre contra el virus de Epstein-Barr, el principal complejo de histocompatibilidad, el factor reumatoide.

    Elija los síntomas que le molesten, responda las preguntas. Descubra la gravedad de su problema y si necesita ver a un médico.

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  • Actualmente, las nuevas tecnologías de diagnóstico permiten identificar las causas etiológicas y patogénicas de muchas enfermedades y afectan radicalmente los resultados del tratamiento. Quizás los resultados más impresionantes de la introducción de estas tecnologías en la práctica clínica se hayan logrado en el campo de la inmunología y el diagnóstico de enfermedades infecciosas.

    Los sistemas de prueba basados \u200b\u200ben el inmunoensayo enzimático y el análisis de inmunoquimioluminiscencia permiten la detección de anticuerpos de varias clases, lo que aumenta significativamente el contenido de información de los métodos de sensibilidad y especificidad clínica, analítica para el diagnóstico de enfermedades infecciosas. Cabe señalar que los avances más significativos en el diagnóstico de infecciones están asociados con la introducción del método de reacción en cadena de la polimerasa en la práctica de laboratorio, que se considera el "estándar de oro" en el diagnóstico y evaluación de la efectividad del tratamiento de una serie de enfermedades infecciosas.

    Se pueden utilizar diversos materiales biológicos para la investigación: suero, plasma sanguíneo, raspado, biopsia, líquido pleural o cerebroespinal (LCR). En primer lugar, los métodos de diagnóstico de laboratorio de infecciones tienen como objetivo identificar enfermedades como la hepatitis viral B, C, D, la infección por citomegalovirus, las infecciones de transmisión sexual (gonorrea, clamidia, micoplasma, ureaplasma), tuberculosis, infección por VIH, etc.

    La infección por VIH es una enfermedad causada por el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), que persiste durante mucho tiempo en linfocitos, macrófagos, células del tejido nervioso, dando como resultado un daño lentamente progresivo a los sistemas inmunológico y nervioso del cuerpo, manifestado por infecciones secundarias, tumores, encefalitis subaguda y otras patologías. cambios.

    Los agentes causantes de la infección, virus de inmunodeficiencia humana del primer y segundo tipo (VIH-1, VIH-2), pertenecen a la familia de los retrovirus, la subfamilia de los virus lentos. Los viriones son partículas esféricas de 100-140 nm de diámetro. La partícula viral tiene una envoltura fosfolipídica externa que incluye glicoproteínas (proteínas estructurales) con un cierto peso molecular, medido en kilodaltons. En el VIH-1, estos son gpl60, gpl20, gp41. La envoltura interna del virus que cubre el núcleo también está representada por proteínas con un peso molecular conocido: p17, p24, p55 (el VIH-2 contiene gpl40, gpl05, gp36, p16, p25, p55).

    El genoma del VIH incluye ARN y la enzima transcriptasa inversa (transcriptasa inversa). Para que el genoma del retrovirus se conecte con el genoma de la célula huésped, el ADN se sintetiza primero en la plantilla de ARN viral usando transcriptasa inversa. Luego, el ADN del provirus se inserta en el genoma de la célula huésped. El VIH tiene una variabilidad antigénica pronunciada que es significativamente mayor que la del virus de la influenza.

    En el cuerpo humano, el objetivo principal del VIH son los linfocitos T, que transportan la mayor cantidad de receptores CD4 en la superficie. Después de que el VIH penetra en la célula con la ayuda de la revertasa, siguiendo el patrón de su ARN, el virus sintetiza el ADN, que se incorpora al aparato genético de la célula huésped (linfocitos CD4) y \u200b\u200bpermanece allí de por vida en estado provirus. Además de los linfocitos T auxiliares, se ven afectados macrófagos, linfocitos B, células de neuroglia, mucosa intestinal y algunas otras células. La razón de la disminución del número de linfocitos T (células CD4) no es solo el efecto citopático directo del virus, sino también su fusión con células no infectadas. Junto con la derrota de los linfocitos T en pacientes con infección por VIH, hay una activación policlonal de los linfocitos B con un aumento en la síntesis de inmunoglobulinas de todas las clases, especialmente IgG e IgA, y el posterior agotamiento de esta parte del sistema inmunológico. La alteración de la regulación de los procesos inmunitarios también se manifiesta por un aumento en el nivel de α-interferón, β2-microglobulina y una disminución en el nivel de IL-2. Como resultado de la disfunción del sistema inmunológico, especialmente cuando la cantidad de linfocitos T (CD4) disminuye a 400 células en 1 μl de sangre o menos, surgen condiciones para la replicación incontrolada del VIH con un aumento significativo en la cantidad de viriones en varios ambientes del cuerpo. Como resultado de la derrota de muchas partes del sistema inmunológico, una persona infectada con el VIH se vuelve indefensa contra los patógenos de diversas infecciones.

    En el contexto del aumento de la inmunosupresión, se desarrollan enfermedades progresivas graves que no ocurren en una persona con un sistema inmunológico que funciona normalmente. Se trata de enfermedades que la Organización Mundial de la Salud (OMS) ha definido como marcadores o indicadores del SIDA.

    Enfermedades indicadoras del SIDA

    El primer grupo: enfermedades inherentes solo a la inmunodeficiencia grave (CD4<200). Клинический диагноз ставится при отсутствии анти-ВИЧ-антител или ВИЧ-антигенов.

    El segundo grupo: enfermedades que pueden desarrollarse tanto en el contexto de una inmunodeficiencia grave como, en algunos casos, sin ella.

    Por tanto, en estos casos es necesaria la confirmación del diagnóstico por laboratorio.

    Primer grupo:

    • candidiasis del esófago, tráquea, bronquios;
    • criptococosis extrapulmonar;
    • criptosporidiosis con diarrea durante más de 1 mes;
    • lesiones por citomegalovirus de varios órganos distintos del hígado, el bazo o los ganglios linfáticos en un paciente mayor de 1 mes;
    • una infección causada por el virus del herpes simple, que se manifiesta por úlceras en la piel y mucosas, que persisten durante más de 1 mes, así como bronquitis, neumonía o esofagitis de cualquier duración, que afectan a un paciente mayor de 1 mes;
    • sarcoma de Kaposi generalizado en pacientes menores de 60 años;
    • linfoma del cerebro (primario) en pacientes menores de 60 años;
    • neumonía intersticial linfocítica y / o displasia linfoide pulmonar en niños menores de 12 años;
    • infección diseminada causada por micobacterias atípicas (complejo mycobacterium M. aviumintracellulare) con localización extrapulmonar o localización (además de los pulmones) en la piel, ganglios linfáticos cervicales, ganglios linfáticos de las raíces de los pulmones;
    • neumonía por pneumocystis;
    • leucoencefalopatía multifocal progresiva;
    • toxoplasmosis del cerebro en pacientes mayores de 1 mes.

    Segundo grupo:

    • infecciones bacterianas, combinadas o recurrentes, en niños menores de 13 años (más de dos casos en 2 años de observación): sepsis, neumonía, meningitis, daño en huesos o articulaciones, abscesos causados \u200b\u200bpor bastoncillos hemofílicos, estreptococos;
    • coccidioidomicosis diseminada (localización extrapulmonar);
    • Encefalopatía por VIH (demencia por VIH, demencia por SIDA);
    • histoplasmosis con diarrea que persiste durante más de 1 mes;
    • isosporosis con diarrea que persiste durante más de 1 mes;
    • sarcoma de Kaposi a cualquier edad;
    • linfoma del cerebro (primario) en personas de cualquier edad;
    • otros linfomas de células B (a excepción de la enfermedad de Hodgkin) o linfomas de inmunofenotipo desconocido: linfomas de células pequeñas (como el linfoma de Burkitt, etc.); sarcomas inmunoblásticos (linfomas inmunoblásticos, de células grandes, histiocíticos difusos, difusos indiferenciados);
    • micobacteriosis diseminada (no tuberculosis) con lesiones además de los pulmones de la piel, ganglios linfáticos cervicales o hiliares;
    • tuberculosis extrapulmonar (con daño a los órganos internos, además de los pulmones);
    • septicemia por salmonella, recurrente;
    • Distrofia del VIH (agotamiento, pérdida de peso dramática).

    La Tabla 1 (ver enlace fuente arriba) enumera las enfermedades definitorias del SIDA y sus agentes etiológicos.

    Hay muchas clasificaciones de SIDA.

    De acuerdo con la nueva clasificación propuesta por los Centros para el Control de Enfermedades de EE. UU. (Tabla 2 - ver enlace fuente arriba), el SIDA se diagnostica en personas con un recuento de células CD4 de menos de 200 / μL, incluso en ausencia de enfermedades definitorias del SIDA.

    La categoría B incluye varios síndromes, los más importantes de los cuales son angiomatosis bacilar, candidiasis orofaríngea, candidiasis vulvovaginal recurrente, de difícil tratamiento, displasia cervical, carcinoma cervical, púrpura trombocitopénica idiopática, listeriosis, neuropatía periférica.

    Anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2 en la sangre

    Los anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2 normalmente están ausentes en el suero sanguíneo.

    La determinación de anticuerpos contra el VIH es el principal método de diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH. El método se basa en un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA): la sensibilidad es superior al 99,5%, la especificidad es superior al 99,8%. Los anticuerpos contra el VIH aparecen en el 90-95% de los infectados dentro de un mes después de la infección, en el 5-9%, después de 6 meses, en el 0.5-1%, en una fecha posterior. En la etapa del SIDA, la cantidad de anticuerpos puede disminuir hasta desaparecer por completo.

    El resultado de la investigación se expresa cualitativamente: positivo o negativo.

    Un resultado negativo de la prueba indica la ausencia de anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2 en el suero sanguíneo. El laboratorio emite un resultado negativo inmediatamente después de su preparación. Al recibir un resultado positivo (detección de anticuerpos contra el VIH) para evitar resultados falsos positivos en el laboratorio, el análisis se repite 2 veces más.

    Inmunotransferencia de anticuerpos a proteínas virales del VIH en suero sanguíneo

    Los anticuerpos contra las proteínas virales del VIH normalmente están ausentes en el suero sanguíneo.

    El método ELISA para la determinación de anticuerpos contra el VIH es un método de detección. Cuando se obtiene un resultado positivo, para confirmar su especificidad, se utiliza el método de inmunotransferencia - Western-blot - contraprecipitación en un gel de anticuerpos en el suero sanguíneo del paciente con diversas proteínas virales, separadas por peso molecular mediante electroforesis y aplicadas sobre nitrocelulosa. Se determinan los anticuerpos contra las proteínas virales gp41, gp120, gp160, p24, pi8, p17, etc.

    De acuerdo con las recomendaciones del Centro Ruso para la Prevención y el Control del SIDA, la detección de anticuerpos contra una de las glicoproteínas gp41, gpl20, gpl60 debe considerarse un resultado positivo. Si se detectan anticuerpos contra otras proteínas del virus, el resultado se considera dudoso, tal paciente debe ser examinado dos veces, después de 3 y 6 meses.

    La ausencia de anticuerpos contra proteínas específicas del VIH significa que el inmunoensayo enzimático dio un resultado falso positivo. Al mismo tiempo, en el trabajo práctico, al evaluar los resultados del método de Western blot, es necesario guiarse por las instrucciones proporcionadas por la empresa al "Kit para Western blot" usado.

    El método de inmunotransferencia se utiliza para el diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH.

    Antígeno P24 en suero

    El antígeno p24 está ausente en el suero sanguíneo.

    El antígeno p24 es una proteína de la pared de nucleótidos del VIH. La etapa de las manifestaciones primarias después de la infección por VIH es una consecuencia del inicio del proceso de replicación. El antígeno p24 aparece en la sangre 2 semanas después de la infección y puede detectarse mediante ELISA en el período de 2 a 8 semanas. Después de 2 meses desde el momento de la infección, el antígeno p24 desaparece de la sangre. Posteriormente, en el curso clínico de la infección por VIH, se produce un segundo aumento del contenido de proteína p24 en la sangre. Cae sobre la formación del SIDA. Los sistemas de prueba ELISA existentes para la detección del antígeno p24 se utilizan para la detección precoz del VIH en donantes de sangre y niños, para determinar el pronóstico del curso del SIDA y para controlar la terapia en pacientes con SIDA. ELISA tiene una alta sensibilidad analítica, lo que permite detectar el antígeno p24 del VIH-1 en suero a una concentración de 5-10 pkg / ml y el VIH-2 - menos de 0,5 ng / ml, y especificidad. Sin embargo, debe tenerse en cuenta que el nivel de antígeno p24 en la sangre está sujeto a variaciones individuales, lo que significa que solo el 20-30% de los pacientes pueden detectarse usando este estudio en el período temprano después de la infección (Rose N.R. et al., 1997).

    Los anticuerpos contra el antígeno p24 de las clases IgM e IgG aparecen en la sangre a partir de la segunda semana, alcanzan un pico en 2-4 semanas y permanecen en este nivel varias veces: anticuerpos IgM: durante varios meses, desapareciendo dentro de un año después de la infección, y los anticuerpos IgG pueden durar años.

    El algoritmo para diagnosticar la infección por VIH depende de la fase de la enfermedad y se caracteriza por un cambio en la dinámica de detección de anticuerpos de varias clases (Fig. 1, 2 - consulte el enlace a la fuente anterior).

    El resultado de la investigación se expresa cualitativamente: positivo o negativo. Un resultado negativo de la prueba indica la ausencia de anticuerpos contra el VIH-1 y el antígeno VIH-2 y p24 en el suero sanguíneo.

    El laboratorio emite un resultado negativo inmediatamente después de su preparación. Al recibir un resultado positivo (detección de anticuerpos contra VIH-1 y VIH-2 y / o antígeno p24) para evitar resultados falsos positivos en el laboratorio, el análisis se repite 2 veces más.

    Independientemente de los resultados de la prueba obtenidos, el laboratorio envía la muestra de sangre del paciente y los resultados de 3 pruebas al centro regional de SIDA para confirmar un resultado positivo o para verificar un resultado indefinido. En tales casos, el centro regional de SIDA proporcionará la respuesta final para esta encuesta.

    Detección de VIH por reacción en cadena de la polimerasa (cualitativo)

    La detección del VIH mediante reacción en cadena de la polimerasa - PCR (cualitativamente) se lleva a cabo para:

    • resolución de resultados cuestionables de estudios de inmunotransferencia;
    • para el diagnóstico temprano de la infección por VIH;
    • monitorear la efectividad del tratamiento antiviral;
    • determinar la etapa de la enfermedad del SIDA (transición de la infección a la enfermedad).

    En caso de infección primaria por VIH, el método de PCR permite detectar el ARN del VIH en la sangre ya entre 10 y 14 días después de la infección.

    El resultado de la investigación se expresa cualitativamente: positivo o negativo. Un resultado negativo de la prueba indica la ausencia de ARN del VIH en la sangre.

    Un resultado positivo, la detección de ARN del VIH, indica que el paciente está infectado.

    Detección de VIH por reacción en cadena de la polimerasa (cuantitativa)

    El VIH normalmente está ausente en la sangre.

    La cuantificación directa del ARN del VIH mediante PCR permite una predicción más precisa de la tasa de desarrollo del SIDA en personas infectadas por el VIH que la determinación del recuento de células CD4 y, por lo tanto, una evaluación más precisa de su supervivencia. Los recuentos altos de partículas virales generalmente se correlacionan con un estado inmunológico gravemente deteriorado y recuentos bajos de células CD4. Los recuentos bajos de partículas virales generalmente se correlacionan con un mejor estado inmunológico y recuentos más altos de células CD4. El contenido de ARN viral en sangre permite predecir la transición de la enfermedad al estadio clínico. Cuando el contenido de ARN-1 del VIH es\u003e 74 100 copias / ml, casi todos los pacientes desarrollan un cuadro clínico de SIDA (Senior D., Holden E., 1996).

    Los individuos con VIH-1 en sangre\u003e 10,000 copias / ml tienen 10,8 veces más probabilidades de desarrollar SIDA que aquellos con VIH-1 en sangre<10 000 копий/мл. При ВИЧ-инфекции прогноз непосредственно определяется уровнем виремии. Снижение уровня виремии при лечении улучшает прогноз заболевания.

    Un grupo de expertos de EE. UU. Ha desarrollado una indicación para el tratamiento de pacientes con VIH. El tratamiento está indicado para pacientes con recuento de células CD4 en sangre.<300/мкл или уровнем РНК ВИЧ в сыворотке >20.000 copias / ml (PCR). La evaluación de los resultados de la terapia antirretroviral en personas infectadas por el VIH se lleva a cabo reduciendo el nivel de ARN del VIH en suero.

    Con un tratamiento eficaz, el nivel de viremia debería disminuir 10 veces durante las primeras 8 semanas y estar por debajo del límite de detección del método (PCR) (<500 копий/мл) через 4-6 месяцев после начала терапии.

    Así, hasta la fecha, se han introducido y utilizado muchos métodos de investigación en la práctica clínica para el diagnóstico de la infección por VIH, como para todas las demás infecciones virales. Entre ellos, el papel principal se da a la investigación serológica. Los principales métodos para diagnosticar infecciones por el VIH se presentan en la Tabla 3 (ver el enlace a la fuente anterior), donde se dividen según la importancia de cada método para detectar virus en cuatro niveles:

    • A - la prueba se usa generalmente para confirmar el diagnóstico;
    • B - la prueba es útil en determinadas circunstancias para el diagnóstico de determinadas formas de infección;
    • C - la prueba rara vez se utiliza con fines de diagnóstico, pero es de gran importancia para las encuestas epidemiológicas;
    • D: los laboratorios no suelen utilizar la prueba con fines de diagnóstico.

    Dado que para el diagnóstico de infecciones virales, además de elegir el método de análisis óptimo, no es menos importante identificar correctamente y tomar un biomaterial para la investigación, la Tabla 4 (ver el enlace a la fuente anterior) brinda recomendaciones para elegir el biomaterial óptimo para investigar la infección por VIH.

    Para monitorear a los infectados por el VIH, se deben utilizar las capacidades de un estudio integral del estado inmunológico: determinación cuantitativa y funcional de todos sus vínculos: inmunidad humoral, celular y resistencia inespecífica en general.

    En condiciones de laboratorio modernas, el principio de múltiples etapas de evaluación del estado inmunológico incluye la determinación de una subpoblación de linfocitos, inmunoglobulinas sanguíneas. Al evaluar los indicadores, debe tenerse en cuenta que la infección por VIH se caracteriza por una disminución en la proporción de células T CD4 / CD8 menor a 1. El índice CD4 / CD8 1.5-2.5 indica un estado normal, más de 2.5 indica hiperactividad, menos 1.0 - indica inmunodeficiencia. Además, la relación CD4 / CD8 puede ser inferior a 1 en la inflamación grave.

    Esta relación es de fundamental importancia a la hora de evaluar el sistema inmunológico en pacientes con sida, porque el VIH infecta y destruye selectivamente los linfocitos CD4, por lo que la relación CD4 / CD8 disminuye a valores significativamente inferiores a 1.

    La evaluación del estado inmunológico también se basa en la identificación de defectos generales o "graves" en el sistema de inmunidad celular y humoral: hipergammaglobulinemia (aumento de la concentración de IgA, IgM, IgG) o hipogammaglobulinemia en la etapa terminal; un aumento en la concentración de complejos inmunes circulantes; disminución de la producción de citocinas; debilitamiento de la respuesta de los linfocitos a los antígenos y mitógenos.

    La violación de la proporción de poblaciones en el grupo total de linfocitos B es característica de una inmunidad humoral insuficiente. Sin embargo, estos cambios no son específicos de la infección por VIH y también pueden ocurrir en otras enfermedades. En una evaluación integral de una serie de otros parámetros de laboratorio, debe tenerse en cuenta que la infección por VIH también se caracteriza por: anemia, linfa y leucopenia, trombocitopenia, un aumento en el nivel de β2-microglobulina y proteína C reactiva, un aumento en la actividad de las transaminasas en el suero sanguíneo.

    Investigación de anticuerpos específicos y antígeno p24 del virus de la inmunodeficiencia humana.

    Sinónimos Ruso

    Anticuerpos del VIH 1, 2, anticuerpos del virus de la inmunodeficiencia humana, p24 del VIH-1, antígeno del VIH-1, antígeno p24.

    Sinónimosinglés

    Anti-VIH, anticuerpos contra el VIH, anticuerpos contra el virus de la inmunodeficiencia humana, VIH-1 p24, VIH-1 Ag, antígeno p24.

    Método de investigación

    Inmunoensayo de electroquimioluminiscencia (ECLIA).

    ¿Qué biomaterial se puede utilizar para la investigación?

    Sangre venosa.

    ¿Cómo prepararse adecuadamente para el estudio?

    • La prueba del VIH se puede realizar de forma anónima y confidencial. Para un examen confidencial, es obligatorio presentar un pasaporte.
    • No fume durante 30 minutos antes del examen.

    Información general sobre el estudio

    El VIH (virus de inmunodeficiencia humana) es un virus de la familia de los retrovirus que ataca las células del sistema inmunológico humano (CD4, T-helpers). Provoca el SIDA.

    El VIH-1 es el tipo de virus más común y se encuentra con mayor frecuencia en Rusia, EE. UU., Europa, Japón y Australia (generalmente subtipo B).

    El VIH-2 es un tipo raro que es común en África occidental.

    Para diagnosticar el virus de la inmunodeficiencia humana, se utiliza un sistema de prueba combinado de cuarta generación, que puede determinar la infección por VIH tan pronto como 2 semanas después de que el virus ingresa al torrente sanguíneo, mientras que los sistemas de prueba de primera generación lo hacen solo 6-12 semanas después de la infección.

    La ventaja de este ensayo combinado de VIH es la detección, gracias al uso de anticuerpos contra VIH-1 p24 como reactivos, del antígeno específico p24 (proteína de la cápside viral), que puede ser detectado por esta prueba dentro de 1-4 semanas desde el momento de la infección, es decir. incluso antes de la seroconversión, lo que acorta significativamente el período de ventana.

    Además, dicha prueba del VIH detecta anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2 en la sangre (utilizando la reacción antígeno-anticuerpo), que se producen en cantidades suficientes para ser determinadas por el sistema de prueba 2-8 semanas después de la infección.

    Después de la seroconversión, los anticuerpos comienzan a unirse al antígeno p24, lo que da como resultado una prueba de anticuerpos contra el VIH positiva y una prueba de p24 negativa. Sin embargo, después de un tiempo, tanto los anticuerpos como el antígeno se determinarán en la sangre al mismo tiempo. En la etapa terminal, una prueba de SIDA para anticuerpos contra el VIH puede dar un resultado negativo, ya que el mecanismo de producción de anticuerpos está alterado.

    Etapas de la infección por VIH

    1. El período de incubación, o "período de ventana seronegativo", es el tiempo desde la infección hasta el desarrollo de anticuerpos protectores contra el virus en la sangre, cuando las pruebas de anticuerpos del VIH son negativas, pero una persona ya puede transmitir el virus a otras personas. La duración de este período es de 2 semanas a 6 meses.
    2. El período de infección aguda por VIH comienza en promedio 2-4 semanas después de la infección y dura aproximadamente 2-3 semanas. En esta etapa, algunas personas pueden desarrollar síntomas inespecíficos similares a los de la gripe debido a la replicación viral activa.
    3. La etapa latente es asintomática, pero durante ella hay una disminución gradual de la inmunidad y un aumento en la cantidad de virus en la sangre.
    4. El SIDA (síndrome de inmunodeficiencia adquirida) es la etapa final en el desarrollo de la infección por VIH, que se caracteriza por una severa supresión del sistema inmunológico, así como enfermedades concomitantes, encefalopatía o cáncer.

    A pesar de que la infección por el VIH es incurable, ahora existe una terapia antirretroviral (TAR) de gran actividad, que puede prolongar significativamente la vida de una persona infectada por el VIH y mejorar su calidad.

    Esta prueba tiene un valor diagnóstico particularmente alto si la infección por el VIH ocurrió poco antes de la prueba (2-4 semanas).

    ¿Para qué se utiliza la investigación?

    El análisis se utiliza para el diagnóstico precoz del VIH, lo que permite prevenir una mayor transmisión del virus a otras personas, así como iniciar rápidamente la terapia antirretroviral y el tratamiento de enfermedades que contribuyen a la progresión de la infección por VIH.

    ¿Cuándo está programado el estudio?

    • Con síntomas persistentes (durante 2-3 semanas) de etiología poco clara: fiebre baja, diarrea, sudores nocturnos, pérdida de peso repentina, inflamación de los ganglios linfáticos.
    • Con infección recurrente por herpes, hepatitis viral, neumonía, tuberculosis, toxoplasmosis.
    • Si el paciente padece enfermedades de transmisión sexual (sífilis, clamidia, gonorrea, herpes genital, vaginosis bacteriana).
    • Si la paciente ha tenido sexo vaginal, anal u oral sin protección con múltiples parejas sexuales, una nueva pareja o una pareja cuyo estado de VIH no está seguro.
    • Cuando el paciente se sometió al procedimiento de transfusión de sangre del donante (aunque los casos de infección de esta manera están prácticamente excluidos, ya que la sangre se analiza a fondo para detectar la presencia de partículas virales y se somete a un tratamiento térmico especial).
    • Si el paciente se ha inyectado drogas utilizando instrumentos no esterilizados.
    • Durante el embarazo / planificación del embarazo (tomar azidotimidina durante el embarazo, cesárea para evitar la transmisión del virus al niño en el momento de pasar por el canal de parto y negarse a amamantar reduce el riesgo de transmisión del VIH de madre a hijo del 30% al 1%).
    • Inyección accidental con una jeringa u otro objeto (como un instrumento médico) que contenga sangre infectada (en tales casos, la probabilidad de infección es extremadamente baja).

    ¿Qué significan los resultados?

    Valores de referencia

    Resultado: negativo.

    Razones de un resultado negativo:

    • ausencia de infección por VIH,
    • el período de la ventana seronegativa (ni el antígeno ni los anticuerpos se han desarrollado todavía en cantidades suficientes para ser determinadas por el sistema de prueba).

    Razones para un resultado positivo:

    • infección por VIH.
    

    Notas importantes

    • El diagnóstico de anticuerpos contra el VIH en bebés nacidos de madres infectadas por el VIH es difícil porque el bebé recibe anticuerpos de la madre a través de la sangre placentaria. Por lo general, la prueba de anticuerpos contra el VIH en estos niños se vuelve negativa a más tardar a los 18 meses si el niño no está infectado con el VIH.
    • Con esta prueba de VIH, es imposible determinar cuánto tiempo hace que ocurrió la infección o la etapa del VIH (por ejemplo, SIDA).
    • El VIH se encuentra en casi todos los fluidos corporales, pero solo en la sangre, el semen y las secreciones vaginales, la concentración del virus es suficiente para la infección. Además, el virus es inestable y solo puede vivir en los medios líquidos del cuerpo humano, por lo que la infección por VIH no se transmite a través de besos, picaduras de insectos y por contacto diario (por ejemplo, cuando se usa un baño compartido, a través de saliva, agua y comida).
    • Aunque esta prueba para el VIH acorta el "período de ventana", aún puede determinar la presencia de antígeno / anticuerpos no antes de 1-3 semanas después del momento de la posible infección.
    • Si ocurrió un evento que amenazaba la infección por VIH menos de 1 a 3 semanas antes de la prueba, se recomienda repetir la prueba.
    • Los análisis de la primera y tercera generación podrían dar un resultado falso positivo si los anticuerpos contra el virus de Epstein-Barr, el factor reumatoide, el complejo principal de histocompatibilidad HLA o anticuerpos después de la administración de la vacuna contra el VIH estuvieran presentes en la sangre del sujeto. Sin embargo, la probabilidad de un resultado falso positivo con la prueba combinada es casi imposible.
    • En caso de un resultado positivo de la prueba, se realiza un análisis de confirmación utilizando el método de inmunotransferencia (prueba de anticuerpos contra una serie de proteínas específicas del virus).

    ¿Quién asigna el estudio?

    Médico general, terapeuta, especialista en enfermedades infecciosas, dermatovenerólogo.

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    Anticuerpos contra el VIH: una prueba de detección para el diagnóstico de la infección por el VIH.


    Disponibilidad de los resultados del análisis

    Regular *: entregado antes de las 12:00 (11.00 en Podolsk) - 1 día hábil, entregado después de las 12:00 (11.00 en Podolsk) - 2 días hábiles

    Tiempo de preparación del análisis en modo expreso (Cito)

    El tiempo de entrega Preparación
    Días laborables Fin de semana
    Clínica en el laboratorio CIR en Dubrovka
    08:00-12:00 - 1 día
    12:00-20:30 -
    Maryino, Novokuznetskaya, Voikovskaya
    08:00-12:00 09:00-12:00 1 día
    12:00-20:30 12:00-17:00 Al día siguiente, entregado a las 8:00
    Butovo
    08:00-12:00 09:00-12:00 1 día
    Podolsk
    08:00-11:00 09:00-10:00 1 día

    El valor de los análisis

    Un análisis de anticuerpos contra el VIH (virus de inmunodeficiencia humana, VIH, virus de inmunodeficiencia humana) detecta anticuerpos en la sangre que se forman en el cuerpo en respuesta a la infección por el virus.

    VIH - Virus de inmunodeficiencia humana: un microorganismo que causa el SIDA (SIDA (síndrome de inmunodeficiencia adquirida)).

    Formas de transmisión del virus de la inmunodeficiencia humana.

    • sexual - durante el contacto sexual sin protección con una pareja infectada por el VIH. El riesgo de infección es mayor con el coito anal y menor con el coito oral.
    • contacto con sangre infectada - al utilizar agujas, instrumentos no esterilizados, al transfundir sangre donada.
    • ruta de transmisión vertical- de una madre infectada por el VIH a un feto durante el embarazo, el parto, la lactancia.

    Indicaciones para el examen.

    • Hospitalización planificada
    • Preparándose para la cirugía
    • Planificación del embarazo y embarazo (incluido en el estándar de examen)
    • Sexo casual sin protección, cambios frecuentes de pareja sexual
    • Presencia de factores de riesgo de infección (por ejemplo, profesionales de la salud)
    • Quejas: ganglios linfáticos inflamados en varias áreas, sudores nocturnos, fiebre prolongada (temperatura), pérdida de peso, diarrea prolongada,
    • Identificación de las siguientes enfermedades o sus combinaciones: tuberculosis, candidiasis, toxoplasmosis, recaídas frecuentes de la infección por herpesvirus, neumonía por micoplasmas, legionella, neumonía por pneumocystis, sarcoma de Kaposi.

    Cuándo hacerse la prueba de anticuerpos contra el VIH

    • Hospitalización planificada, preparación para la cirugía: consulte con el hospital.
    • Planificación de un embarazo: en el programa de preparación para el embarazo.
    • Embarazo: Al menos tres veces durante el embarazo según el calendario obstétrico.
    • Si existen factores de riesgo de infección, al menos una vez al año.
    • Presunta infección: el tiempo medio de aparición de anticuerpos en sangre es de 2 semanas desde el momento de la infección, el máximo es de 6 meses. Por lo general, las pruebas se realizan después de 1, 3 y 6 meses.
    • En presencia de quejas y detección de enfermedades enumeradas anteriormente: inmediatamente.

    ¿Cómo hacerse la prueba en los Laboratorios CIR?

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