Diagnóstico de la infección por VIH. Antigen R24 ¿Qué es el análisis P24?
Relevancia de la detección. Personas infectadas por el VIH En las primeras etapas de la infección, está determinada por la necesidad de realizar un examen epidemiológico más eficiente, organización oportuna de lo necesario. eventos preventivos Entre las personas de contacto también. posible aplicación El ciclo corto de la terapia antirretroviral para reducir la carga viral para mejorar el pronóstico de la enfermedad. Informar oportunamente a un paciente sobre las infecciones contribuye a una disminución en el riesgo en la transferencia de la enfermedad y su posible participación en la donación.
El diagnóstico de la infección por VIH a la aparición de un resultado positivo de la transferencia inmune (IB) se confirma cuando el antígeno P24 del paciente o (y el ácido nucleico de ácido nucleico se detecta en el suero.
La determinación del antígeno P24 con un inmunoensayo enzimático (ELISA) es una forma simple y económica de demostrar la presencia de una proteína viral en la sangre del paciente debido a la replicación intensiva del virus en las primeras semanas posteriores a la infección. La prueba de antígeno P24 está disponible para los laboratorios con características habituales para ELISA. En comparación con la determinación de la carga viral por la reacción en cadena de la polimerasa, es menos costoso y requiere mucho tiempo. A pesar del hecho de que se conoce la estrategia para definir la infección en el período seronegativo, hasta el momento, esta prueba no se incluye en el algoritmo de diagnóstico de VIH. Se sabe que el mayor porcentaje de identificación de P24 se observa en suero con un resultado dudoso del IB. Sin embargo, se demostró que los sistemas de prueba con un umbral analítico estándar de sensibilidad (10 pg / ml) tienen una sensibilidad de diagnóstico insuficiente y significación pronóstica del P24 revelado para incluir en el proceso de diagnóstico de rutina. En este sentido, el desarrollo e implementación del sistema de prueba al antígeno P24 con mayor sensibilidad analítica es de gran interés.
El objetivo del trabajo es evaluar la importancia pronóstica de la detección del antígeno P24 VIH cuando se usan sistemas de prueba con un umbral diferente de sensibilidad analítica en individuos con un resultado dudoso del IB.
Con un examen retrospectivo de los suero con un resultado indefinido en los anticuerpos contra el VIH en IB, el uso de un sistema de prueba en el antígeno P24 con un umbral de una sensibilidad analítica de 0,5 pg / ml reveló el 50% de los pacientes infectados y el uso de una prueba. Sistema que detecta 8 pg / ml - 22.9%. El uso de un conjunto adicional de reactivos para la destrucción del complejo inmunológico le permite aumentar la detección del antígeno R24 a 55.3%. La importancia pronóstica de la presencia de infección por VIH con pruebas adicionales en el antígeno P24 fue de 91.7-96%. Introducción al algoritmo de diagnóstico del VIH para una prueba adicional para el antigeno VIH P24 con una sensibilidad analítica de 0.5 pg / ml le permite confirmar el diagnóstico del VIH en etapa temprana Enfermedades de al menos el 13% de los casos en personas con un resultado IB incierto. (Ver artículo: Nehumumaev D.A. et al. "Significado pronóstico de la detección del antígeno VIH P24 al usar sistemas de prueba con una mayor sensibilidad analítica").
"Cuña. Laboratorio. Diagnóstico", 2009, № 2, p. 40 - 42.
Diagnóstico clínico y de laboratorio de infección por VIH. Tiene tres direcciones:
- Estableciendo el hecho infectado con el VIH, el diagnóstico de la infección por VIH.
- Definición de la etapa flujo clínico Enfermedades y detección de enfermedades secundarias.
- Previsión de la progresión del curso clínico de la enfermedad, control de laboratorio de la efectividad del tratamiento y efectos secundarios de los medicamentos antirretrovirales.
1. Establecimiento de la infección del VIH, diagnóstico de la infección por VIH.
Los siguientes indicadores específicos se utilizan para determinar la infección por VIH: anticuerpos contra el VIH, los antígenos del VIH, el ARN del VIH y los proveedores de ADN. Los anticuerpos contra el VIH están determinados por el método de análisis de inmunoensayo (ELISA) o inmunotransporte, que es esencialmente un tipo de ELISA. Los antígenos (proteínas) VIH están determinados por el método IFA. Con la ayuda de los métodos genéticos moleculares de la reacción de la cadena de la polimerasa (PNRR) y BDNA, se puede determinar el ARN del VIH y el ADN del Provirus. El uso de métodos adicionales para la hibridación de ácidos nucleicos con sondas específicas de ADN permite probar la especificidad de las secuencias de ADN obtenidas durante la PCR. La sensibilidad de la PCR es la detección de genes virales en una de las cinco mil células.
En la infección primaria, se observan la siguiente dinámica de los marcadores de VIH en la sangre infectada. En el primer mes, como resultado de la activación del proceso replicativo, se produce un fuerte aumento de la carga viral (contenido del ARN del VIH en plasma), luego debido a la difusión del virus y la infección masiva de las células diana en la sangre y Nodos linfáticos, se hace posible determinar el ADN proviral. Un valor de diagnóstico primario es el hecho de detectar un ADN provisional integrado en el genoma de la célula objetivo.
La carga viral refleja la intensidad del proceso replicativo en células infectadas. Durante el período de infección primaria, el nivel de carga viral es diferente cuando se infecta con diferentes subtipos de VIH, sin embargo, la dinámica de sus cambios es aproximadamente la misma. Entonces, cuando la infección con el subtipo en, por ejemplo, si en el primer mes después de la infección, el valor de la carga viral es de 700 copias / ml, entonces, en el segundo mes, hay una disminución a 600, en el 3er a 100. , en las copias 4º a 50 / ml. Dicha dinámica se observa contra los antecedentes del aumento del contenido de la sangre de los anticuerpos específicos al VIH. El contenido del ADN inclinado en el infectado por VIH mononucleares de sangre se caracteriza por una constancia relativa durante los primeros 6 meses con fluctuaciones menores en algunos subtipos. Por lo tanto, las cargas ARN y ADN no son idénticas.
En la etapa de incubación durante algún tiempo, anticuerpos específicos para el VIH en una cantidad suficiente para determinar métodos de laboratorio. Antes del registro de los anticuerpos, se observa un tiempo muy corto en la sangre de la proteína NE, que reprime el proceso replicativo y la proteína estructural P24. El antígeno P24 se puede detectar en la sangre mediante análisis inmérmopamental, después de 1-2 pedal después de la infección y se determina hasta la octava semana, entonces su contenido disminuye considerablemente. Además, en el curso clínico de la infección por VIH, se observa el segundo levantamiento del contenido de la sangre de la proteína P24. Cae por el período de formación del SIDA. La desaparición en la sangre de la sangre libre (no vinculada por los anticuerpos), las proteínas núcidas P24 y la aparición de anticuerpos específicos a las proteínas del VIH marcaron la aparición de seroconversión (Fig. 9.6).
Viryia y Antigenemia causan la formación de anticuerpos específicos de clase IgM (anti-P24, anti-GR41, anti-GR120, anti-GR160). Puede aparecer anticuerpos de IgM gratuitos y IgG IgG a la proteína P24, a partir de la 2ª semana, su contenido aumenta dentro de 2 a 4 semanas, alcanzando un cierto nivel en el que se almacena durante meses (IgM) y años (IgG) (Fig.) 9.7).
La aparición de la seroconversión completa, cuando se registra en la sangre periférica, se registra un alto nivel de anticuerpos de clase IgG SPEX a las proteínas estructurales del VIH P24, GP41, GP120, GR160, facilita significativamente el diagnóstico de la infección por VIH. Los anticuerpos contra el VIH aparecen en 90-95% infectados durante 3 meses después de la infección, en 5-9%, en el período de 3 a 6 meses desde el momento de la infección y en 0,5-1% en los plazos posteriores.
A pesar del hecho de que los anticuerpos contra el VIH aparecen por última vez, el principal indicador de diagnóstico de laboratorio al presente es la detección de anticuerpos específicos por el Método ELISA e Inmunobloting.
Los datos presentados en la Tabla 9.2. [show] y 9.3. [show] Esto demuestra claramente la alta sensibilidad de los sistemas de prueba de inmunoodheraperapia modernos al determinar los anticuerpos contra el VIH, superior a la sensibilidad de la inmunoteca. En algunos casos, al recibir un resultado positivo principal en ELISA, es posible confirmarlo en inmunotransferencia solo después de 2 a 3 semanas.
| Tabla 9.3. Ejemplo de monitoreo de seroconversión (n.fleury, 2000) | |||||
| Momento de determinación | Antigen P24, PG / ML | Anticuerpos para proteínas VIH. | |||
| ELISA, OP OP / OP KR ** | Inmunoteca | ||||
| VIH. Dúo. | Pantalla GEN. | Uniforme | |||
| Paciente 1. | |||||
| Primario | 17 | 1,24 | menos que 1 | menos que 1 | * |
| Después de 4 días | 67 | 1,36 | 1,85 | menos que 1 | - |
| En 7 dias | * | 2,33 | 6,84 | menos que 1 | - |
| Después de 2 días | * | 6,77 | 15,0 | 4,8 | gp160 |
| Paciente 2. | |||||
| Primario | 400 | 13 | menos que 1 | menos que 1 | - |
| En 5 dias | 450 | 18 | 2,11 | menos que 1 | - |
| Despues de 10 dias | * | 33 | 12,19 | 2,9 | gp160 |
| Nota: * - La definición no se llevó a cabo ** - la proporción de la densidad óptica de la muestra de prueba de suero al valor de densidad óptica (umbral) crítico |
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Al examinar a los pacientes con infección por VIH (infectados por el VIH) utilizando los sistemas de prueba de las empresas líderes de inmunocublación en todos los casos, se detectan anticuerpos a GP160 y P24 / 25, a otras proteínas de los anticuerpos, en 38.8-93.3% de los casos (Tabla. 9.4. [show] ).
Las dificultades con la detección de anticuerpos en pacientes con infección por VIH pueden ocurrir durante períodos de viremia masiva y antígena, cuando los anticuerpos específicos disponibles en la sangre se asocian con partículas virales, y el proceso replicativo está por delante de la producción de nuevos anticuerpos antivirales. Dicha situación puede ocurrir y desaparecer durante el proceso infeccioso.
En pacientes con un sistema inmunológico debilitado por el seno, los virems y la antigenemia aparecen anteriormente y persisten en nivel alto Antes del resultado de la enfermedad. En tales pacientes, existe un bajo contenido de anticuerpos gratuitos al VIH, debido a dos razones: productos insuficientes de anticuerpos en los linfocitos y la unión de anticuerpos por viriones y proteínas de VIH solubles, se requieren sistemas de prueba para determinar la infección aumento de la sensibilidad o modificando los métodos de análisis, proporcionando la etapa de liberación de los anticuerpos de los complejos inmunes.
La reducción más a menudo en el contenido de los anticuerpos al VIH a las razones especificadas se produce en la etapa terminal, cuando los anticuerpos contra el VIH en suero Croweim no se pueden capturar utilizando los métodos de análisis inmununimal, ni el método imumumoblet (Western Blot). Además de la aparición de anticuerpos específicos al VIH, la respuesta inmune en los primeros 4 meses se caracteriza por una disminución en el contenido de la sangre de un CD4 + infectado y un aumento en CD8 + -cells. A continuación, el contenido de los receptores de CD4 y CD8 que transporta celdas se estabiliza y permanece sin cambios durante algún tiempo. Un aumento en el contenido de los linfocitos CD8 es una reacción protectora, porque La tipotoxicidad dependiente de la célula se implementa con CD8 + -limphocytes, que están dirigidos a la destrucción de las células infectadas por el VPH. Inicialmente, los linfocitos citotóxicos (CTL) reaccionan a la proteína reguladora del virus NEF, que desempeña un papel importante en la reducción de la carga viral (ARN) en el plasma del infectado por el VIH en los primeros meses. Luego se forma la respuesta de CTL y a otros, incl. Las proteínas estructurales, del VIH, lo que resulta en 12 meses después de la infección, el efecto zpotoxico aumenta significativamente.
Esquemas diagnóstico de laboratorio Infecciones por VIH
Teniendo en cuenta la dinámica de marcadores de infección por VIH específicos en la práctica, es recomendable adherirse a los siguientes esquemas de diagnóstico de laboratorio en adultos (Fig. 9.8-9.10).
Los esquemas reflejan las tres fases principales del diagnóstico de laboratorio primario de la infección por VIH:
- Poner en pantalla.
- Referencia.
- Experto.
La necesidad de varias etapas de diagnóstico de laboratorio se debe principalmente a consideraciones económicas. Por ejemplo, el costo del método de inmunotransferencia con la ayuda de los sistemas de prueba nacionales de un estudio de expertos es de hasta $ 40, la selección (método IFA) es de aproximadamente 0,2, es decir, la relación es 1: 200.
En la primera etapa (Fig. 9.8), las encuestas se determinan mediante la definición de anticuerpos contra el VIH con un solo sistema de prueba de inmunoensayo diseñado para detectar anticuerpos a ambos tipos de virus - VIH-1 y VIH-2.
Los fabricantes en los sistemas de prueba propuestos, lisado viral, proteínas recombinantes, péptidos sintéticos se utilizan como base antígeno. Cada uno de los portadores enumerados del VIH determinantes antigénicos tiene sus propias ventajas y desventajas. Por lo tanto, al elegir los sistemas de prueba de aproximadamente el mismo costo, debe preferir conjuntos con la mayor sensibilidad (preferiblemente el 100%). Entre los sistemas de prueba del mismo costo y sensibilidad, es recomendable detenerse en tener la máxima especificidad.
Basado en el lisado de virus, se crearon los primeros sistemas de prueba para el diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH. En la década de 1980, dichos sistemas de prueba se caracterizaron por una sensibilidad de menos del 100% y una especificidad baja manifestada por una gran cantidad (hasta un 60%) de resultados falsos positivos.
En la formación del virión en la cultura de los linfocitos, su cáscara se crea a partir de la membrana externa y, por lo tanto, contiene antígenos de las principales clases complejas de histocompatibilidad I y II. Esta circunstancia determina las reacciones falsas positivas si los anticuerpos contra la histocompatibilidad alichánica están presentes en la sangre de los pacientes.
Más tarde, para obtener un virus, se propuso utilizar la cultura de los macrófagos, en los que las partículas virales se forman principalmente intracelularmente al tipo no desde la membrana externa de la célula, sino de las membranas del retículo endoplásmico. Dicha tecnología ha reducido el número de resultados falsos positivos.
Algunos de los mejores en las características más importantes: la sensibilidad y la especificidad: las enzimas se reconocen como una combinación de lisado viral purificado con péptidos sintéticos, que representan los segmentos más antigenos de las proteínas de virus, o proteínas recombinantes.
La sensibilidad del sistema de prueba también depende de las características de otros componentes de los conjuntos. Por lo tanto, los sistemas de prueba que utilizan conjugados que reconocen los anticuerpos, no solo de clase IgG, sino también IgM, y IgA, le permiten identificar una fase anterior de seroconversión. El uso de los sistemas de prueba es prometedor, con el que puede determinar simultáneamente los anticuerpos antivirales y el antígeno P24, lo que hace que los diagnósticos de laboratorio más tempranos de la infección por VIH.
El resultado positivo principal debe ser rechazado por reexaminar la muestra en el mismo sistema de prueba, pero preferiblemente otra serie y otro asistente de laboratorio. Si se obtuvo un resultado negativo durante el reexaminamiento, el estudio se realiza por tercera vez.
Después de confirmar el resultado positivo, es deseable volver a instalar la sangre y explorarla sobre los anticuerpos contra el VIH como primaria. La sangre repetida le permite evitar el error debido a la inexactitud del etiquetado de los tubos y completar las formas de direcciones.
La etapa seropositiva seropogénica se envía a los estudios de referencia realizados utilizando dos o tres sistemas de prueba IFA altamente específicos. En el caso de dos resultados positivos, un estudio experto se lleva a cabo por inmunotransferencia.
La aplicación en los diagnósticos de referencia de los sistemas de prueba de Immunoopimen, con los que puede diferenciar anticuerpos específicos al VIH-1 y el VIH-2, facilita el trabajo adicional y le permite investigar una muestra positiva en la etapa de expertos inmediatamente usando la inmunoteca apropiada (VIH-1 o VIH-2).
La opinión de expertos en laboratorio sobre la infección por VIH se realiza solo sobre la base del resultado positivo de la inmunotransferencia (Western Blot). Al realizar diagnósticos de expertos, es necesario utilizar la nomenclatura de genes genéticos y VIH propuestos en 1990 (Tabla 9.5 [show] ).
La especificidad de las bandas de inmunotrablot debe evaluarse con mucho cuidado y cuidadosamente el uso de los resultados de la prueba del suero (positivo y negativo), que se llevan a cabo en paralelo con el estudio de las muestras experimentales y la muestra de inmunotranse con la designación de proteínas VIH. (Adjunto por el fabricante al sistema de prueba). La interpretación de los resultados obtenidos debe llevarse a cabo de acuerdo con las instrucciones adjuntas al sistema de prueba. Como regla general, el criterio de positividad es la presencia obligatoria de anticuerpos a dos proteínas (predecesor, externa o transmembrana), codificada por el gen ENV, y la posible presencia de anticuerpos a los productos de otros dos genes de VIH estructurales - GAG y POL (Tabla 9.6 [show] ).
| Tabla 9.6. Criterios para la interpretación de los resultados de inmunotransferencia para el VIH-1 y el VIH-2 (OMS, 1990) | |||
| Resultado | VIH-1. | VIH-2. | |
| Positivo | +/- Strip Pol. +/- gag. | 2 tiras AV (predecesor, GP externo o transmembrana GP) +/- Strip Pol. +/- gag. |
|
| Negativo | No hay ventas específicas de VIH-1 | Faltan las tiras específicas del VIH-2. | |
| Incierto | Otros perfiles no considerados como positivos o negativos. | ||
En caso de un resultado dudoso, es necesario disfrutar de la lista de recomendaciones para la aclaración final de los resultados de la inmunoteca (Tabla 9.7 [show] ).
| Tabla 9.7. Recomendaciones para la aclaración final de resultados inmunotécnicos inciertos (OMS, 1990) | |
| La presencia de bandas correspondientes a las proteínas VIH. | Interpretación del resultado, acciones adicionales. |
| VIH-1. | |
| Solo p17 | |
| Sólo P24 y GP160 | Así que una imagen inusual puede ocurrir al comienzo de la seroconversión. Se debe realizar un reexamen inmediato de la muestra. Si se obtiene el mismo perfil, es necesario después de 2 semanas después de tomar la primera muestra para tomar una segunda muestra para las pruebas en inmunotransferencia |
| Otros perfiles | Estos perfiles (GAG y / o ROL sin ENT) pueden indicar reacciones de seroconversión o no alberadas |
| VIH-2. | |
| Solo p16 | Se puede clasificar como negativo, las definiciones adicionales no requieren |
| Tengo una tira en la presencia o ausencia de gag / rol | Debe volver a probar la misma muestra, pero utilizando otra serie de reactivos |
| Solo P24 o GP140 | Este perfil inusual puede ocurrir al comienzo de la seroconversión. Se debe realizar un reexamen inmediato de la muestra. Si se obtiene el mismo perfil, 2 semanas después de tomar la 1ª muestra, es necesario tomar una segunda muestra para las pruebas en inmunotransferencia |
| Otros perfiles | Estos perfiles (GAG y / o ROL sin ENT) pueden indicar seroconversión o reacciones no específicas. |
Sobre las recomendaciones del Centro Científico y Metodológico ruso para la prevención y el control del SIDA, el resultado es positivo en presencia de anticuerpos al menos una de las proteínas GP41, GP120 en combinación con anticuerpos a otras proteínas específicas del VIH-1 o sin anticuerpos. Estas recomendaciones se realizan en la base de la experiencia de trabajar con sueros de niños de los focos hospitalarios, que a menudo definían anticuerpos solo a una de las proteínas de la cáscara de virus.
La parte principal de los pacientes seropositivos encuestados primarios se relaciona con la fase de la linfadenopatía generalizada persistente (PGL) oa la fase asintomática. Por lo tanto, en inmunotoblo (tira nitrocelulósica, sobre la cual se determina las proteínas del VIH), como regla general, la siguiente combinación de anticuerpos a VIH-1: anticuerpos a las proteínas de la cáscara GP160, GP120 y GP41, codificadas por el genoma ENV, en combinación con anticuerpos a las proteínas núcleas P24 (proteína la nucleocápside, codificada por el genoma de la gag) y P31 / 34 (endonucleasa, codificada por el genoma POP).
Las reacciones positivas solo con gag y / o proteínas RL pueden ocurrir en el caso de una fase temprana de seroconversión, así como indicar una infección causada por el VIH-2, o una reacción no específica.
En caso de obtener un resultado dudoso, el uso de diversas técnicas metodológicas se puede aclarar por el hecho de la infección por VIH.
Dependiendo de las capacidades técnicas (la presencia de conjuntos de diagnóstico y reactivos, el equipo de equipos especiales y capacitación del personal), un laboratorio experto realiza estudios de diagnóstico adicionales (Fig. 9.10).
En algunos casos, es aconsejable utilizar métodos genéticos moleculares, lo que permite determinar las secuencias genéticas del VIH en suero, en los linfocitos sanguíneos o los nodos de LEMPH. La verificación de la especificidad de las secuencias de ADN obtenida como resultado de la PCR se puede llevar a cabo mediante hibridación de ácidos nucleicos con sondas específicas de ADN.
Los métodos de radioinmunoprecipitación (RIP) y la inmunofluorescencia indirecta (IFL) también se pueden usar para la verificación final de los suero con resultados dudosos en inmunotransferencia.
La detección del ARN del VIH en el plasma sanguíneo no es un método de alta calidad o cuantitativo no es significativo para el diagnóstico de la infección por VIH. Este resultado debe ser confirmado métodos estándar, como inmunotransporte, 2-4 meses después de recibir la respuesta dudosa o negativa principal.
La liberación del VIH en el cultivo celular es la verdad en la última instancia. Sin embargo, el método es complicado, las carreteras y se realiza solo en laboratorios de investigación especialmente equipados.
El contenido de CD4 + - Las células sanguíneas son un indicador no específico, pero en casos controvertidos (IFA + ", ImmunoBlot" - ", signos clínicos Infección / SIDA del VIH) Puede utilizarse como punto de referencia para la adopción de una decisión de expertos. Si el laboratorio tiene la capacidad de realizar solo la inmunoteca, se deben seguir las recomendaciones establecidas en la tabla. 9.7 y en la FIG. 9.9.
Las personas, con una prueba de expertos de suero cuyos resultados dudosos (inciertos), excepto en los casos de detección de anticuerpos solo a P17 (VIH-1) o P16 (VIH-2), deben re-probarse durante 6 meses (después de 3 meses ). En el caso de una verdadera infección por VIH después de 3 a 6 meses, se observa el altavoz "positivo" en el espectro de anticuerpos: formación adicional de anticuerpos a otras proteínas de virus. La falsa reacción se caracteriza por preservar durante mucho tiempo de un patrón dudoso de transferencia inmune o la desaparición de rayas sospechosas. Si después de la expiración del período especificado, los resultados de la inmunotransferencia repetida serán negativos o permanecerán dudosos, entonces, en ausencia de factores de riesgo, síntomas clínicos u otros factores asociados con la infección por VIH, una persona puede considerarse seronegativa con respecto a los anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2.
Los resultados falsos positivos debido al contenido de la sangre de los anticuerpos a la histocompatibilidad alloantigénica, que forma parte de la cáscara del VIH, se manifiesta en el inmunotipo en forma de una banda en el nivel GP41 y GP31. Las causas de otras reacciones no específicas (por ejemplo, a P24, que se encuentran a menudo que se encuentran en las personas con procesos autoinmunes) aún no están clarificados.
Mejorar la tecnología de producción de los sistemas de prueba de Immunodermen hizo posible lograr una alta sensibilidad, hasta el 99.99%, mientras que la sensibilidad del método de inmunotransferencia es del 97%. Por lo tanto, el respeto negativo en la inmunoteca en resultados positivos en IFA puede indicar el período inicial de seroconversión, caracterizado por un bajo nivel de anticuerpos específicos. Por lo tanto, es necesario repetir el estudio después de 1,5 a 2 meses., Es decir, el período de tiempo requerido para completar la seroconversión, lograr la concentración de anticuerpos específicos en la sangre suficiente para detectar el método de inmunotransferencia.
Resultado positivo (resultados) de la investigación sobre la referencia o solo la etapa de detección de diagnósticos de laboratorio de la infección por VIH, es decir, un resultado positivo en cualquier sistema de prueba de inmunooperMentComo resultado, no confirmado por métodos de expertos, se interpreta como la presencia de anticuerpos de respuesta cruzada en la sangre. Bajo la reacción cruzada implica la unión de áreas no específicas en proteínas o péptidos de VIH utilizados como una base antigénica en el sistema de prueba en el que se obtuvo un resultado positivo.
En ausencia de inmunodeficiencia y signos clínicos de infección por VIH, estas personas se consideran seronegativas con respecto a los anticuerpos contra el VIH y deben interrumpirse.
El diagnóstico final del infeccioso del VIH se establece solo sobre la base de todos los datos clínicos, epidemiológicos y de laboratorio. Informar que el diagnóstico de infección por VIH del paciente es correcto solo asistir a un médico.
El principal método de confirmación de diagnóstico de laboratorio (experto) de la infección por VIH es la inmunoteca. Sin embargo, dada su menor sensibilidad en comparación con la IFA, se han propuesto a una serie de investigadores para usar una combinación de varios sistemas de prueba para la determinación final de la presencia de anticuerpos específicos al VIH. Por ejemplo, G. van der Groen et al. Ofreció una inmunoteca alternativa. Un método para verificar los resultados positivos de la etapa de detección del diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH. Implica el estudio del material en paralelo en tres sistemas de prueba, que se basan en varios métodos de detección de anticuerpos específicos al VIH (varias variantes de EIFA, reacción de aglutinación) utilizando antígeno de diversas naturaleza. Los autores lograron elegir tales combinaciones de sistemas de prueba, el uso cuyo uso proporciona una sensibilidad al 100% de la especificidad de N en comparación con los resultados obtenidos en inmunotransferencia.
La barato de este método de diagnóstico de expertos es una ventaja indudable, pero la falta de información, que específicamente las proteínas de virus tienen anticuerpos en la sangre del paciente, no permite evaluar la especificidad de la reacción en cada caso individual, así como la pista. Cambios en el espectro de anticuerpos en una etapa temprana de seroconversión.
El diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH en niños nacidos de madres infectadas por el VIH tiene sus propias características. Desde el momento del nacimiento durante mucho tiempo (hasta 15 meses) en la sangre de tales niños puede circular anticuerpos maternos al VIH. Las únicas inmunoglobulinas de la clase IgG se penetran a través de la barrera placentaria, por lo que los nmmmpoglobulinos específicos de IgM y IgA de las clases IgM y IgA permiten confirmar la infección, pero el resultado negativo no puede indicar la ausencia de VIH.
En niños menores de 1 mes de 1 mes, la replicación de VPH aún no está aún, y el único método de verificación es PCR. La determinación del antígeno P24 en niños mayores de 1 mes también es un método de confirmación.
La ausencia de anticuerpos contra el VIH en los recién nacidos no significa que el virus no se penetre a través de la barrera placentaria. En cualquier caso, los niños de las madres infectadas por el VIH están sujetas a encuestas de laboratorio y diagnóstico y observación dentro de los 36 meses desde el nacimiento.
resultados estudios de laboratorio sobre los marcadores de infección por VIH requieren una interpretación cautelosa y solo deben considerarse junto con los datos de epidemiológicos y exámenes clínicos. Por otro lado, se debe tener en cuenta que a pesar de la alta sensibilidad de los métodos modernos, los resultados negativos de la investigación no pueden eliminar completamente la presencia de la infección por VIH. Por lo tanto, el resultado negativo del estudio, por ejemplo, por inmunotransferencia, solo se puede formular como la ausencia de anticuerpos específicos al VIH-1 y el VIH-2.
Diagnóstico de la infección por VIH en pacientes seronegativos.
La calidad de los sistemas de prueba utilizados en el diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH se mejora cada año, su sensibilidad aumenta. Sin embargo, la alta variabilidad del VIH puede llevar a nuevos tipos, los anticuerpos a los que pueden no ser reconocidos por los sistemas de prueba existentes. Además, hay casos de una respuesta humoral atípica del sistema inmunológico del organismo anfitrión al virus. Entonces, L.Montagnier en 1996 informó que dos pacientes con SIDA, que durante los años anteriores no se han identificado en la sangre de anticuerpos específicos, el diagnóstico se realiza sobre la base de los datos clínicos y se confirma mediante el laboratorio solo para liberar el VPH- 1 en la cultura celular. En tales casos, es necesario usar las recomendaciones de la OMS de acuerdo con las cuales diagnóstico clínico Las infecciones por VIH en adultos y niños son posibles en presencia de una de las 12 enfermedades indicadoras del SIDA:
- candidiasis del esófago, tráquea, bronquios, pulmones;
- criptocococosis extraválica;
- criptosporidia con diarrea más de un mes;
- derrota de citomegalovirus de cualquier órgano (excepto y además del hígado, el bazo y ganglios linfáticos En el paciente mayor de 1 mes):
- la infección causada por un virus de un herpes simple es persistente más de 1 mes en un paciente mayor de 1 mes;
- linfoma cerebral en paciente menores de 60 años;
- neumonía intersticial linfocítica en un niño menor de 13 años;
- infección disimular causada por las bacterias del Grupo Intracelulare de Micobacterium avium o M.Kansassii;
- neumonía neumática;
- lEUKO-encefalopatía progresiva de múltiples calificaciones;
- toksoplasasmosis central sistemas nerviososlos pacientes con mayores de 1 mes.
La presencia de una de estas enfermedades le permite diagnosticar la infección por VIH en ausencia de una prueba de laboratorio de sangre para la presencia de anticuerpos contra el VIH o incluso al recibir un resultado seronegativo.
Una fuente: Diagnóstico de laboratorio médico, programas y algoritmos. Ed. profe. Karpischenko a.i., San Petersburgo, Intermedica, 2001
Actualmente, las nuevas tecnologías de diagnóstico permiten identificar las causas etiológicas y patogénicas de muchas enfermedades y afectan radicalmente los resultados del tratamiento. Quizás los resultados más impresionantes de la introducción de estas tecnologías en la práctica clínica se logran en el campo de la inmunología y los diagnósticos. enfermedades infecciosas.
Los sistemas de prueba basados \u200b\u200ben análisis inmunoamenados e inmunoheminientes permiten identificar los anticuerpos de varias clases, lo que aumenta significativamente el contenido de la información de los métodos de la sensibilidad clínica, analítica y la especificidad para el diagnóstico de enfermedades infecciosas. Cabe señalar que los éxitos más significativos en el diagnóstico de infecciones están relacionados con la implementación del método de la reacción en cadena de la polimerasa a la práctica del laboratorio, que se considera el "estándar de oro" en el diagnóstico y la evaluación de la efectividad de El tratamiento de una serie de enfermedades infecciosas.
Para el estudio, se puede usar varios materiales biológicos: suero, plasma sanguíneo, raspado, bioptat, fluido pleural o espinal (SMG). En primer lugar, los métodos de diagnóstico de laboratorio de infecciones están dirigidos a identificar enfermedades como hepatitis viral En, s, d, infección de citomegalovirus, infecciones de transmisión sexual (gonorreica, clamidia, micoplasma, ureagrasmen), tuberculosis, infección por VIH, etc.
Infección por VIH: una enfermedad causada por un virus de inmunodeficiencia humana (VIH), por mucho tiempo Persistentes en linfocitos, macrófagos, células de tejido nervioso, lo que resulta en daños lentamente progresivos a los sistemas inmunes y nerviosos del cuerpo, manifestados por infecciones secundarias, tumores, encefalitis subcionada y otros cambios patológicos.
Los patógenos de infección son virus de la inmunodeficiencia de la persona de los 1º y 2º TIPOS (VIH-1, VIH-2), consulte a la familia de retrovirus, las presentaciones de virus lentos. Los viriones son partículas esféricas con un diámetro de 100-140 nm. La partícula viral tiene una cubierta exterior de fosfolípido, que incluye glicoproteínas (proteínas estructurales) con un cierto peso molecular medido en kilodaltones. El VIH-1 es GPL60, GPL20, GP41. La funda interna del virus que cubre el núcleo también está representada por proteínas con un peso molecular conocido - P17, P24, P55 (VIH-2 contiene GPL40, GPL05, GP36, P16, P25, P55).
El genoma del VIH incluye ARN y enzima transcriptasa inversa (inversa). Para que el gen retrovirus se conecte con el genoma de la célula huésped, primero con la ayuda de la inversión, se produce la síntesis de ADN en la matriz del ARN viral. Luego, el ADN del Provirus está incrustado en el genoma de la célula huésped. El VIH tiene una variabilidad antigénica pronunciada, que supera significativamente un virus de influenza.
En el cuerpo humano, el objetivo principal del VIH son los linfocitos T que llevan la mayor cantidad de receptores CD4 en la superficie. Después de penetrar en el VIH en una jaula con una revertasa de acuerdo con su ARN, el virus sintetiza el ADN, que está incrustado en el aparato genético de la célula huésped (linfocitos CD4) y \u200b\u200bpermanece allí para la vida en un estado del proveido. Además de los t-linfocitos, los macrófagos se ven afectados, en los linfocitos, células de la neuroglia, la mucosa intestinal y algunas otras células. La razón para reducir la cantidad de linfocitos T (células CD4) no es solo un efecto citopático directo del virus, sino también su fusión con células no infectadas. Junto con la lesión de los linfocitos T en pacientes con infección por VIH, existe una activación policlonal de los linfocitos B con un aumento en la síntesis de las inmunoglobulinas de todas las clases, especialmente IgG e IGA, y el agotamiento posterior de este departamento de la inmune. sistema. La violación de la regulación de los procesos inmunitarios también se manifiesta por un aumento en el nivel de interferón α-interferón, β2-microglobulina, una disminución en el nivel de IL-2. Como resultado del deterioro de la función de la función del sistema inmunológico, especialmente con una disminución en el número de linfocitos T (CD4) a 400 células en 1 μl de sangre y menos, las condiciones surgen para la replicación de VIH incontrolada con un aumento significativo en El número de viriones en varios entornos. Como resultado de la derrota de muchos enlaces del sistema inmunológico, una persona infectada con el VIH se vuelve indefensa antes de los agentes causales de varias infecciones.
En el contexto de la inmunosupresión creciente, se están desarrollando enfermedades progresivas severas, que no se encuentran en humanos con un sistema inmunológico que normalmente funciona. Estas son enfermedades que la Organización Mundial de la Salud (OMS) identificó como marcador de SIDA o enfermedades indicadoras de SIDA.
Enfermedades Indicadoras del SIDA
El primer grupo: enfermedades inherentes solo por la inmunodeficiencia pesada (nivel CD4<200). Клинический диагноз ставится при отсутствии анти-ВИЧ-антител или ВИЧ-антигенов.
El segundo grupo es enfermedades que pueden desarrollarse tanto en el contexto de la inmunodeficiencia grave como en algunos casos sin ella.
Por lo tanto, en estos casos, es necesario la confirmación de laboratorio del diagnóstico.
Primer grupo:
- candidiasis del esófago, tráquea, bronquios;
- criptococosis extrapollo;
- cryptosporidia con diarrea más de 1 mes;
- lesiones de citomegalovirus de varios órganos además del hígado, bazo o ganglios linfáticos en un paciente menor de 1 mes;
- la infección causada por un velo de un herpes simple, manifestado con úlceras en la piel y la membrana mucosa, que personifican más de 1 mes, así como la bronquitis, la neumonía o la esofagitis de cualquier duración, que afectan a un paciente mayores de 1 mes;
- sarcoma generalizado Capos en pacientes menores de 60 años;
- linfoma cerebral (primario) en pacientes menores de 60 años;
- neumonía intersticial linfocítica y / o displasia linfoide pulmonar en niños menores de 12 años;
- infección diseminada causada por micobacterias atípicas (micobacterias del complejo M. Aviumintracellulare) con localización o localización extrapilente (adicionalmente a la luz) en la piel, ganglios linfáticos cervicales, ganglios linfáticos de los pulmones;
- neumonía neumática;
- leucoentefalopatía progresiva de múltiples calificaciones;
- toxoplasmosis del cerebro en pacientes mayores de 1 mes.
Segundo grupo:
- infecciones bacterianas, combinadas o recurrentes, en niños menores de 13 años (más de dos casos durante 2 años de observación): sepsis, neumonía, meningitis, hueso o articulaciones, abscesos debido a palos gemófilos, estreptococos;
- coccidioidomicosis difundida (localización extrapilente);
- VIH-encefalopatía (demencia del VIH, demencia del SIDA);
- la histoplasmosis con diarrea persistente en más de 1 mes;
- isosport con diarrea persistente más de 1 mes;
- sarcoma Caposhi a cualquier edad;
- linfoma cerebral (primario) en personas de cualquier edad;
- otros linfomas de células B (con la excepción de la enfermedad de Hodgkin) o el linfoma de un inmunofenotipo desconocido: linfoma de células finas (como el linfoma de Berkitta, etc.); Sarcoma inmunoblástica (linfoma inmunotransmal, célula grande, histiocito difuso, difuso indiferenciado);
- la micobacteriosis se difunde (no la tuberculosis) con una lesión además de la piel clara, los ganglios linfáticos cervicales o tostados;
- tuberculosis extrapulica (con órganos internos de daño, además de los pulmones);
- septicemia salmonelica recurrente;
- VIH-Distrofia (agotamiento, pérdida de peso afilada).
Tabla 1 (vea la referencia a la fuente anterior) Ayuda: se administran enfermedades de los indicadores y sus agentes etiológicos.
Hay muchas clasificaciones de SIDA.
De acuerdo con la nueva clasificación propuesta por el Centro de Control de Enfermedades (Tabla 2, consulte la referencia de origen anterior), los diagnósticos de SIDA se establecen mediante personas que tienen un nivel de linfocitos de CD4 de menos de 200 / μL incluso en ausencia de enfermedades indicadoras del SIDA .
La categoría B incluye varios síndromes, los más importantes de los cuales son la angiomatosis de bacilage, la candidiasis remolcada de Orofaring, la vulvivaginitis candidica recurrente, la terapia difícil de ser, la displasia cervical, el carcinoma cervical, el trombocitopénico idiopático púrpura, la lesteriosis, la neuropatía periférica.
Anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2 en la sangre.
Los anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2 en el suero están ausentes.
La definición de anticuerpos contra el VIH es el método principal del diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH. El método se basa en un análisis de inmunoensayo enzimático (IFA): sensibilidad de más del 99.5%, especificidad, más del 99.8%. Los anticuerpos contra el VIH aparecen en un 90-95% infectados dentro de 1 mes después de la infección, 5-9% después de 6 meses, en 0.5-1% en más adelante. En la etapa del SIDA, el número de anticuerpos puede disminuir hasta la desaparición completa.
El resultado del estudio se expresa cualitativamente: positivo o negativo.
El resultado negativo del estudio indica la ausencia de anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2 en suero. El resultado negativo de los problemas de laboratorio inmediatamente por su disposición. Al recibir un resultado positivo, detectando anticuerpos contra el VIH, para evitar resultados falsos positivos en el laboratorio, el análisis se repite 2 veces más.
Inmunoblotación para anticuerpos contra proteínas de virus VIH en suero
Los anticuerpos para proteínas virales El VIH en suero está ausente.
El método IFA para determinar los anticuerpos contra el VIH es la detección. Al obtener un resultado positivo, el método de inmunoteca se usa para confirmar su precipitación de contador de especificidad en el gel de anticuerpos en el suero del paciente con varias proteínas virales, sometidas a la separación de peso molecular utilizando electroforesis y nitrocelulosa aplicada. Se determinan anticuerpos para proteínas virales GP41, GPL20, GPL60, P24, PI8, P17, etc..
De acuerdo con las recomendaciones del Centro Ruso para la Prevención y el Control del SIDA, la detección de anticuerpos a una de las glicoproteínas GP41, GPL20, GPL60 debe considerarse un resultado positivo. En caso de detección de anticuerpos a otras proteínas de virus, el resultado se considera dudoso, tal paciente debe examinarse dos veces, después de 3 y 6 meses.
La ausencia de anticuerpos contra proteínas de VIH específicas significa que el método de inmunomunimen dio un resultado falso positivo. Al mismo tiempo, en el trabajo práctico, al evaluar los resultados del método de inmunotransferencia, es necesario ser guiado por la instrucción adjunta por la Compañía al "Conjunto de inmunotransferencia".
El método de inmunoblotación se utiliza para el diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH.
Antigen P24 en suero
El antígeno P24 en el suero está ausente.
El antígeno P24 es una proteína de la pared de nucleótidos del VIH. La etapa de manifestaciones primarias después de la infección por VIH es una consecuencia del comienzo del proceso replicativo. El antígeno P24 aparece en la sangre después de 2 semanas después de la infección y puede detectarse mediante el método ELISA de 2 a 8 semanas. Después de 2 meses desde el momento de la infección, el antígeno P24 desaparece de la sangre. En el futuro, en el curso clínico de la infección por VIH, se observa el segundo aumento en el contenido de la proteína P24. Viene de la formación de SIDA. Los sistemas de prueba de IFA existentes para la detección del antígeno P24 se utilizan para la detección temprana del VIH en los donantes de sangre y los niños, determinando la previsión del flujo de SIDA y controlar la terapia en pacientes con SIDA. Elisa tiene una alta sensibilidad analítica, que permite detectar el antígeno R24 del VIH-1 en suero en una concentración de 5-10 pkg / ml y el VIH-2, menos de 0.5 ng / ml, y la especificidad. Sin embargo, se debe tener en cuenta que el nivel de antígeno P24 en la sangre está sujeto a variaciones individuales, lo que significa que solo se puede detectar el 20-30% de los pacientes utilizando este estudio en el período temprano después de la infección (Rose NR et al., 1997).
Los anticuerpos contra las clases de antígeno R24 IgM e IgG en la sangre aparecen a partir de la 2ª semana, alcanzan un pico durante 2 a 4 semanas y se mantiene en un nivel de este tipo de diferentes tiempos: los anticuerpos de clase IgM, durante varios meses, desapareciendo dentro de un año después de la infección, Y los anticuerpos IgG se pueden mantener durante años.
El algoritmo para el diagnóstico de la infección por VIH depende de la fase de la enfermedad y se caracteriza por un cambio en la dinámica de los anticuerpos de detección de varias clases (Fig. 1, 2: consulte la referencia de origen arriba).
El resultado del estudio se expresa cualitativamente: positivo o negativo. El resultado negativo del estudio indica la ausencia de anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2 y el antígeno P24 en suero.
El resultado negativo de los problemas de laboratorio inmediatamente por su disposición. Al recibir un resultado positivo, detectando anticuerpos contra el VIH-1 y el VIH-2 y / o el antígeno P24, para evitar resultados falsos positivos en el laboratorio, el análisis se repite 2 veces más.
Independientemente de los resultados del estudio de la muestra de sangre del paciente y los resultados de 3 estudios se envíen al Laboratorio al Centro Regional de SIDA para confirmar un resultado positivo o verificación de un resultado indefinido. En tales casos, la respuesta final a este estudio emite el Centro Regional para el SIDA.
Detección del VIH por reacción en cadena de la polimerasa (cualitativamente)
La detección del método de VIH de la reacción en cadena de la polimerasa: la PCR (cualitativamente) se lleva a cabo para:
- permiso de dudosos resultados de la investigación de inmunotransferencia;
- para el diagnóstico temprano de la infección por VIH;
- control de la efectividad del tratamiento antiviral;
- definiciones de la etapa de la enfermedad del SIDA (infección por transición en la enfermedad).
Cuando la infección primaria, el VIH, el método PCR le permite identificar el ARN del VIH en la sangre después de 10 a 14 días después de la infección.
El resultado del estudio se expresa cualitativamente: positivo o negativo. El resultado negativo del estudio indica la falta de ARN del VIH.
Un resultado positivo es la identificación del ARN del VIH: testifica a la infección del paciente.
Detección del VIH por reacción en cadena de polimerasa (cuantitativamente)
El VIH en la sangre está ausente.
Una determinación cuantitativa directa del ARN del VIH con PCR permite más precisamente que la determinación del contenido de células CD4, predice la velocidad del desarrollo del SIDA en las personas infectadas con el VIH, por lo tanto, evalúe con mayor precisión su supervivencia. El alto contenido de las partículas virales generalmente se correlaciona con un estatus inmunológico deteriorado pronunciado y las bajas células CD4. El bajo contenido de partículas virales generalmente se correlaciona con un estado inmunológico más próspero y un mayor contenido de células CD4. El contenido del ARN viral en la sangre permite predecir la transición de la enfermedad en la etapa clínica. Al mantener el VIH-1 RNA-1\u003e 74 100 copias / ml, casi todos los pacientes se desarrollan cuadro clinico SIDA (Senior D., Holden E., 1996).
La probabilidad de que el desarrollo del SIDA es de 10.8 veces mayor en personas con el contenido del VIH-1 en la sangre\u003e 10,000 copias / ml que aquellas con VIH-1 en la sangre.<10 000 копий/мл. При ВИЧ-инфекции прогноз непосредственно определяется уровнем виремии. Снижение уровня виремии при лечении улучшает прогноз заболевания.
El equipo de expertos de los Estados Unidos ha desarrollado indicaciones para la terapia de pacientes con VIH. El tratamiento se muestra a los pacientes con células CD4 en la sangre.<300/мкл или уровнем РНК ВИЧ в сыворотке >20,000 copias / ml (PCR). La evaluación de los resultados de la terapia antirretroviral en individuos infectados con VIH se llevan a cabo para reducir el nivel de ARN de suero de VIH.
Con un tratamiento efectivo, el nivel de virhia debe disminuir 10 veces durante las primeras 8 semanas y estar por debajo del límite de sensibilidad (PCR) (<500 копий/мл) через 4-6 месяцев после начала терапии.
Por lo tanto, hoy en día, muchos métodos de investigación se introducen en la práctica clínica para diagnosticar la infección por VIH, así como para todas las demás infecciones virales. Entre ellos, el papel principal está asignado a estudios serológicos. Los principales métodos para diagnosticar las infecciones por VIH se presentan en la Tabla 3 (consulte la Referencia a la fuente anterior), donde se dividen dependiendo de la importancia de cada método para detectar virus a cuatro niveles:
- A - prueba se usa generalmente para confirmar el diagnóstico;
- B - La prueba es útil en ciertas circunstancias para el diagnóstico de formas individuales de infección;
- C: la prueba se usa rara vez para fines de diagnóstico, pero es de gran importancia para las encuestas epidemiológicas;
- D - La prueba generalmente no utiliza los laboratorios para fines de diagnóstico.
Dado que diagnosticar las infecciones virales, además de elegir el método de análisis óptimo, es igualmente importante para la definición correcta y la toma de biomateriales para el estudio, en la Tabla 4 (consulte la referencia a la fuente anterior) Proporcionar recomendaciones para la elección de la biomaterial óptima para el estudio del VIH.
Para monitorear los infectados por el VIH, es necesario utilizar las posibilidades de un estudio integral del estado inmunológico: la definición cuantitativa y funcional de todos sus enlaces: humoral, inmunidad celular y resistencia no específica en general.
En las modernas condiciones de laboratorio, el principio de múltiples etapas de evaluación del estado inmunológico incluye la determinación de la subpoblación de los linfocitos, las inmunoglobulinas de la sangre. Al evaluar los indicadores, debe tenerse en cuenta que para la infección por VIH se caracteriza por una disminución en la relación en la relación de células T CD4 / CD8 menos que 1. El índice CD4 / CD8 1.5-2.5 muestra el estado normérgico, más de 2.5 - indica La hiperactividad, menos 1.0 - indica la inmunodeficiencia. Además, la relación CD4 / CD8 puede ser inferior a 1 con un flujo severo del proceso inflamatorio.
De la importancia de principios, esta relación tiene en la evaluación del sistema inmunológico en pacientes con SIDA, ya que el VIH afecta y destruye selectivamente los linfocitos CD4, como resultado de los cuales la relación CD4 / CD8 se reduce a valores, significativamente menor que 1.
La evaluación del estado inmunológico también se basa en la detección de defectos comunes o "gruesos" en el sistema de inmunidad celular y humoral: hipergammaglobulinemia (aumento de la concentración de IgA, IgM, IgG) o hipogammaglobulinemia en la etapa terminal; un aumento en la concentración de complejos inmunes circulantes; productos de citoquinas reducidas; El debilitamiento de la respuesta de los linfocitos en antígenos y mitógeno.
La violación de la proporción de poblaciones en la bala general en los linfocitos es característica de la insuficiencia de la inmunidad humoral. Sin embargo, estos cambios no se especifican para la infección por VIH y pueden ocurrir con otras enfermedades. En una evaluación integral de una serie de otros indicadores de laboratorio, debe tenerse en cuenta que para la infección por VIH también es característica de: anemia, linfa y leucopenia, trombocitopenia, aumentando el nivel de β2-microglobulina y proteína reactiva C, aumentando el Actividad de la transaminasa en suero.
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| Marino, Novokuznetskaya, Voikovskaya | ||
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| 12:00-20:30 | 12:00-17:00 | Al día siguiente, como se enumeró a las 8:00. |
| Butovo | ||
| 08:00-12:00 | 09:00-12:00 | 1 día |
| Podolsk | ||
| 08:00-11:00 | 09:00-10:00 | 1 día |
Significado de los análisis
El análisis sobre los anticuerpos contra el VIH (virus de la inmunodeficiencia humana, el VIH, el virus de la inmunodeficiencia humana) le permite identificar los anticuerpos que se forman en el cuerpo en respuesta a una infección por virus.
VIH - Virus de inmunodeficiencia humana: microorganismo del SIDA (SIDA (síndrome de inmunodeficiencia adquirida)).
Maneras de transferir el virus de la inmunodeficiencia humana.
- sexual - Con contacto sexual sin protección con la pareja infectada por el VIH. El mayor riesgo de infección con contacto sexual anal, el más pequeño, con el oral.
- contacto con sangre infectada - Cuando se usan agujas, herramientas no estériles, cuando la transfusión de la sangre del donante.
- trayectoria de transmisión vertical- de una madre infectada por el VIH al feto durante el embarazo, durante el parto, cuando la lactancia materna.
Testimonio de encuesta
- Hospitalización planificada
- Preparación para la operación.
- PLANIFICACIÓN EMBARAZA Y EMBARAZA (INCLUIDO EN EL ESTÁNDAR DE LA ENCUESTA)
- Contactos sexuales aleatorios sin protección, cambio frecuente de parejas sexuales
- Disponibilidad de factores de riesgo de infección (por ejemplo, trabajadores médicos)
- Quejas: un aumento en los ganglios linfáticos en varias áreas, sudores nocturnos, fiebre larga (temperatura), pérdida de peso, diarrea larga,
- Identificación de las siguientes enfermedades o sus combinaciones: tuberculosis, candidiasis, toxoplasmosis, recurrencias frecuentes de infección herpesvirus, neumonía causada por micoplasmas, legionels, neumonía neumática, capsis de sarcoma.
Cuándo tomar un análisis sobre los anticuerpos contra el VIH.
- Hospitalización planificada, preparación para la operación: verifique en la institución médica.
- Planificación del embarazo: en un programa de preparación de embarazo.
- Embarazo: al menos tres veces durante el embarazo según el calendario obstétrico.
- En presencia de factores de riesgo de infección, al menos 1 vez por año.
- Infección estimada: el tiempo promedio de la aparición de anticuerpos en la sangre: 2 semanas desde el momento de la infección, el máximo es de 6 meses. Normalmente los análisis pasan a través de 1, 3 y 6 meses.
- Si hay quejas e identificación de las enfermedades enumeradas anteriormente: inmediatamente.
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La detección prenatal no solo es una evaluación del riesgo de desarrollar defectos fetales, sino también evaluar los riesgos de las complicaciones del embarazo, en el menor tiempo posible.
¡Atención!Con reacciones positivas y dudosas, la fecha límite para emitir el resultado se puede aumentar a 10 días hábiles.
Anticuerpos contra el VIH 1, 2 tipos, Antígeno P 24 - Estudio de anticuerpos específicos que surgen en el cuerpo en respuesta a la infección con el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) 1, 2 tipos y el antígeno P 24 Virus de inmunodeficiencia humana.
VIH(Virus de inmunodeficiencia humana): un virus de una familia de retrovirus (virus con replicación lenta), que afecta a las células del sistema inmunológico humano (CD4, ayudantes de T) y causa un síndrome adquirido en la enzima.
La duración del período de incubación suele ser de 3 a 6 semanas. En casos raros, los anticuerpos contra el VIH comienzan a encontrarse solo en unos pocos meses o más después de la infección. El nivel de su concentración puede disminuir notablemente en el período terminal de la enfermedad. En casos raros, los anticuerpos contra la infección por VIH pueden desaparecer durante mucho tiempo.
Antigen R 24 VIH 1.2 El tipo, detectado en suero, testifica a la fase temprana de la enfermedad. Durante las primeras semanas posteriores a la infección, la cantidad de virus y antígeno R 24 en la sangre aumenta rápidamente. Tan pronto como los anticuerpos contra el VIH 1, 2 comienzan a producir, el nivel de antígeno P 24 comienza a disminuir.
La definición de antígeno R 24 le permite diagnosticar la infección por VIH en las primeras etapas de la infección, hasta la producción de anticuerpos.
La detección simultánea de anticuerpos contra el virus del VIH-1,2 y el antígeno del virus P 24 aumentan el valor diagnóstico del estudio.
Este análisis le permite detectar anticuerpos contra el VIH-1.2, así como el antígeno P 24 VIH-1.2. El análisis le permite diagnosticar la infección por VIH en las primeras etapas.
Infección de transmisión de ruta:
- sexual;
- cuando la transfusión de sangre;
- de la madre infectada al recién nacido.
Infección por el VIH - una enfermedad larga y pesada, que está acompañada de la derrota de las células del sistema inmunológico humano; Los métodos efectivos de tratamiento y medios de profilaxis específicos (vacunas) aún no se han desarrollado contra ella.
La fuente del virus de la inmunodeficiencia es una persona. El virus en los humanos se puede aislar del líquido semilla, los secretos del cuello uterino, los linfocitos, el plasma sanguíneo, el líquido espinal, las lágrimas, la saliva, la orina y la leche materna, pero la concentración del virus es diferente. La mayor concentración del virus está contenida en los siguientes entornos biológicos: en espermatozoides, sangre, el setenta del cuello uterino.
Los caminos que el virus se puede transmitir desde una persona infectada a un no relacionado, limitado.
Formas de transferencia de la infección por VIH
Hay 3 formas de transferir el virus de la inmunodeficiencia:
- Camino sexual - es más frecuente. La infección ocurre cuando el contacto sexual sin protección, mientras que el virus penetra en el cuerpo a través de las membranas mucosas. Rangos en la membrana mucosa, las úlceras, la inflamación son una probabilidad de infección. En las personas que sufren infecciones de transmisión sexual, el riesgo de infección durante el contacto con una persona infectada es de 2 a 5 veces mayor. No solo el grado de intimidad del contacto es importante para transmitir el virus, sino también la cantidad de patógeno. Con el sexo sin protección, la probabilidad de infección de una mujer de un hombre es aproximadamente tres veces mayor, ya que su cuerpo obtiene más virus, y una mujer tiene una superficie de superficie mucho más grande a través de la cual el virus puede penetrar en el cuerpo (vagina mucosa). El riesgo de infección es más alto con contacto sexual anal y menos, con oral.
- Contacto con la sangre infectada a la sangre: a) cuando se usa agujas comunes, jeringas, platos para la preparación de medicamentos, instrumentos médicos no estériles; b) la introducción de medicamentos, en la preparación de la sangre utilizada; c) Uso, transfusión de sangre donante infectada y hecho de preparaciones de TI (el riesgo es extremadamente bajo, ya que todos los donantes, y la sangre se verifica a fondo).
- De la madre infectada por el VIH (camino vertical) hasta el feto durante el embarazo, al pasar por los caminos genéricos, durante la lactancia.
SIDA - Infección por el VIH de la etapa terminal
El SIDA no se está desarrollando de inmediato. En la mayoría de las personas con anticuerpos contra virus de inmunodeficiencia, los signos clínicos de SIDA pueden no aparecer de 2 a 10 años y más, y en un tratamiento exitoso, este término aumenta significativamente. Esto se debe al hecho de que hay un tiempo suficientemente largo para reducir la cantidad de células T CD4 al nivel a la que se debilita el sistema inmunológico.
El virus afecta a otros tipos de células, incluidas las células del sistema nervioso central y las células de la sangre roja y blanca, en la que el virus, aparentemente, está en el estado "inactivo" durante mucho tiempo antes de que comience a multiplicarse activamente. Los factores que afectan la progresión de la enfermedad son diversos: características genéticas, cepa de virus, condición psicológica del paciente, condiciones de vida y otros.
El curso de la enfermedad y la duración de las etapas también dependen de si una persona recibe tratamiento, y si "sí", entonces qué medicamentos.
4 etapas de infección por VIH
- El período de incubación ("período de la ventana") es el momento desde el momento de la infección antes del anticuerpo humano (proteínas protectoras del sistema inmunológico) al virus. Durante este período, la infección no aparece de ninguna manera, todos los análisis son negativos, pero la persona ya está infectada. El período de incubación puede durar hasta 3 meses (en promedio de 25 días).
- La etapa de manifestaciones primarias. Continúa en promedio durante 2 a 3 semanas y se caracteriza por un fuerte aumento en el número de virus en la sangre. Esta condición se llama "enfermedad de seroconversión", ya que en este momento el anticuerpo al virus aparece en la sangre en cantidades suficientes para detectar durante los análisis. Sin embargo, este período en la mayoría de las personas no aparece de ninguna manera, el 20-30% puede celebrarse fenómenos similares a la gripe: un aumento en la temperatura corporal, un aumento en los ganglios linfáticos, dolor de cabeza, dolor de garganta, dolencia, fatiga y dolor muscular. Este estado pasa después de 2 a 4 semanas sin ningún tratamiento.
- Período asintomático. Se produce después del final de las manifestaciones principales de la infección y duran en ausencia de tratamiento, un promedio de hasta 10 años. Durante este período en el cuerpo humano hay una lucha del sistema inmunológico con un virus: aumenta gradualmente el número de partículas virales y disminuye la inmunidad. Al final de esta etapa, las personas infectadas hay un aumento en los ganglios linfáticos, los sudores nocturnos, el malestar general y las primeras manifestaciones de infecciones oportunistas que ocurren en los humanos, con un fuerte debilitamiento del sistema inmunológico. Estas infecciones son causadas por microorganismos que nos rodean y personas no infecciosas en personas sanas. El debilitamiento del sistema inmunológico también puede conducir al desarrollo de otras enfermedades, como el cáncer.
- El SIDA es la última etapa de esta enfermedad y se caracteriza por el surgimiento de una serie de enfermedades debido al debilitamiento del sistema inmunológico del cuerpo. Como regla general, los pacientes tienen un número muy bajo de CD4 T; una o más infecciones pesadas oportunistas (neumonía neumática, infección por hongos pesados, tuberculosis, etc.), que son causados \u200b\u200bpor la muerte en ausencia de tratamiento; enfermedades oncológicas; Encefalopatía (derrota cerebral, acompañada por el desarrollo de la demencia).
El diagnóstico de la infección por VIH es un proceso integral basado en los datos del examen de laboratorio, clínico y epidemiológico, y el papel principal en la formulación del diagnóstico desempeña un estudio de laboratorio de sangre.
El principal método de diagnóstico de laboratorio es la detección de anticuerpos contra el virus utilizando un análisis de inmunoensayo enzimáticos.
El procedimiento para realizar un estudio de laboratorio para la presencia de virus de inmunodeficiencia humana y anticuerpos contra este virus está estrictamente regulada por las órdenes del Ministerio de Salud de la Federación de Rusia e incluye:
- estudio de etapa de detección (calificación) por inmunoferment (IFA) Métodos permitidos para su uso;
- la etapa del estudio de verificación (confirmación) por el método inmunotécnico en el laboratorio del centro de la ciudad para el SIDA.
Los diagnósticos de laboratorio del virus de la inmunodeficiencia en niños nacidos de sus madres infectadas con este virus tienen sus propias características. En la sangre de niños hasta 15 meses desde el momento del nacimiento, los anticuerpos maternos al virus pueden circular (clase Ig g). La ausencia de anticuerpos contra el virus en los recién nacidos no significa que no se penetre a través de la barrera placentaria. Los niños de las madres infectadas con virus de inmunodeficiencia están sujetos a encuestas de laboratorio y diagnóstico dentro de los 36 meses posteriores al nacimiento.
Antes de obtener un resultado positivo en inmunotransporte y, bajo el resultado negativo del estudio, una persona se considera saludable y los eventos anti-epidemicos no se llevan a cabo con él.
El material para el estudio sobre los anticuerpos contra el virus de la inmunodeficiencia es la sangre venosa, que es deseable para un estómago vacío.
Por supuesto, la prueba de la presencia de un virus es el caso voluntario de cada persona. Los análisis en el portador del virus de la inmunodeficiencia no se pueden aplicar forzados, sin el consentimiento del paciente. Pero debe entender que cuanto mayor sea el diagnóstico correcto, lo más probable es que vivan una vida larga y completa, incluso siendo su portador.
Indicaciones:
- un aumento en los ganglios linfáticos de más de dos regiones;
- leucopenia con linfopenia;
- sudoración nocturna;
- pérdida de peso aguda de una causa poco clara;
- diarrea por más de tres semanas de razones poco claras;
- causas poco claras de la fiebre;
- planificación del embarazo;
- preparación preoperatoria, hospitalización;
- identificación de las siguientes infecciones o sus combinaciones: tuberculosis, toxoplasmosis mancha, a menudo recurrente, herpes-infección viral, candidiasis de órganos internos, re-neuralgia herpes-zoster, causada por micoplasmas, neumión, neumonía;
- sarcoma Caposhi en edad temprana;
- contactos de sexo al azar.
Se recomienda la sangre por la mañana, de 8 a 12 horas. La sangre toma un estómago vacío o 4-6 horas de inanición. Se permite usar agua sin gas y azúcar. En la víspera del estudio, deben evitarse las sobrecargas de alimentos.
Reglas para el VIH:
El registro de solicitudes para la realización de investigaciones en el DNCC se lleva a cabo en un pasaporte o un documento que la reemplaza (tarjeta de migración, registro temporal en el lugar de residencia, certificado de un Certificado de Servicio, certificado de la tabla de pasaportes con una pérdida de pasaporte, tarjeta de registro de contabilidad del hotel). El documento presentado debe contener necesariamente información sobre el registro temporal o permanente en el territorio de la Federación Rusa y la foto. En ausencia de un pasaporte (documento que lo reemplaza), el paciente tiene derecho a emitir una solicitud anónima para la entrega de biomateriales. Con un examen anónimo, una solicitud y un cliente recibido del cliente, se le asigna una serie de biomateriales conocidos por el paciente, y el personal médico, que hizo el pedido.
Los resultados de la investigación realizados anónimamente no se pueden presentar para hospitalización, inspecciones profesionales y no están sujetas a registro en una pistola.
interpretación de resultados
La prueba de anticuerpos contra el VIH 1/2 es de alta calidad. En ausencia de anticuerpos, la respuesta es "negativa". En caso de detección de anticuerpos contra VIH, el estudio se repite en otra serie. Al repetir un resultado positivo en una prueba inmunoformal, la prueba se envía a la confirmación del método ImmunoBlot, que es el "estándar de oro" en el diagnóstico del VIH.
Resultado positivo:
- Infección por VIH;
- un resultado falso positivo que requiere estudios repetidos o adicionales *;
- el estudio no es informativo en niños menores de 18 años, nacido de madres infectadas por el VIH.
Resultado negativo:
- no infectado (análisis de tiempo de diagnóstico compatible);
- versión sernegativa del flujo de infección (los anticuerpos son tardíos);
- etapa terminal del SIDA (violó la formación de anticuerpos al VIH);
- el estudio no es informativo (el tiempo de diagnóstico no se cumple).