Исследование мазков отпечатков. Приготовление мазков и их фиксация Интерпретация гистологического заключения

На чистое обезжиренное предметное стекло наносят каплю стерильной воды, которая должна равномерно растекаться, не разбиваясь на капельки. Не следует при этом наносить на стекло очень крупные капли воды. В каплю вносят немного исследуемого материала и тщательно его перемешивают, равномерно распределяя тонким слоем. При изготовлении мазков из жидких питательных сред взятый петлей материал не разбавляется водой. Мазки из сред, содержащих сахар, готовятся с добавлением к капле исследуемой жидкости небольшой капельки стерильного обрата или яичного белка.
Приготовленные мазки высушивают обычно при комнатной температуре. Для ускорения высыхания препараты можно подогреть, держа при помощи пинцета Корнэ предметное стекло с мазками, находящимися на их верхней стороне, в теплом воздухе высоко над пламенем горелки (рис. 41).

Осторожное высушивание препятствует быстрому и грубому осаждению белков протоплазмы бактерий и сохраняет этим самым их структуру. Правильно высушенные препараты хорошо фиксируются. Фиксация обеспечивает лучшее прилипание мазка к стеклу и делает его более восприимчивым к окраске. Самым распространенным и пригодным почти во всех случаях является способ фиксации мазков жаром. Для этого стекло с препаратом мазком вверх проводят трижды через пламя спиртовой или газовой горелки. Температура нагретого стекла должна быть такой, чтобы при соприкосновении его с кожей тыльной стороны руки ощущался бы легкий ожог. Не следует перегревать стекло, так как это портит мазок и сильно изменяет структуру бактерий. Фиксация жаром применяется при изучении отношения бактерий к окраске по Граму, выявления кислотоустойчивости и содержания липоидов. Для исследования внутренней структуры бактерий этот метод совершенно непригоден. В таких случаях для фиксации используют различные химические вещества. Наиболее употребляемыми являются следующие приемы фиксации:
- 95%-ным этиловым спиртом в течение 10–20 мин, если спирт более слабый, то время фиксации удлиняется; смесью равных объемов этилового спирта и эфира (жидкость Никифорова); на препарат наносят несколько капель смеси и дают им испариться;
- смесью этилового спирта и формалина (формалина 5 мл, спирта 95 мл) – 5–10 мин;
- безводным метиловым спиртом в течение 2–3 мин; спирт сливают, а препарат высушивают;
- парами формалина или уксусной кислоты – 5–10 мин; парами 1–2%-ного раствора осмиевой кислоты; препарат помещают на подставку в закрытую склянку с осмиевой кислотой и выдерживают 3–5 мин;
- жидкостью Карнуа (96°-ного этилового спирта – 60 мл, хлороформа – 30 мл, ледяной уксусной кислоты – 10 мл) – 15 мин;
- ацетоном в течение 5 мин;
- 10%-ным раствором азотнокислого серебра – 10 мин;
- 1%-ным раствором сулемы в течение 10–15 мин, после чего препарат промывают раствором поваренной соли и водой;
- жидкостью Буэна такого состава: насыщенного водного раствора пикриновой кислоты – 75 мл, формалина неразбавленного – 25 мл и ледяной уксусной кислоты – 5 мл.
Приготовление отпечатков
В связи с возросшим интересом в последние годы к изучению тонкого строения бактерий были разработаны разнообразные и эффективные способы фиксации бактерий, нанесенные на стекло в виде отпечатков. В таком препарате-отпечатке сохраняется более или менее точно взаимное расположение клеток в бактериальном газоне. Метод отпечатков заключается в том, что из агара в чашке Петри с засеянными на нем бактериями вырезают блок и переносят на предметное стекло. Затем берут обезжиренное предметное стекло и прикладывают его к поверхности блока, засеянного бактериями, получая таким образом первый отпечаток. Отпечатки делают до тех пор, пока не истощится слой бактерий на блоке, располагая их слева направо, начиная от левой короткой грани стекла. Затем дают отпечаткам подсохнуть и помещают стекло в жидкость Карнуа для фиксации. Хорошие результаты дает также фиксация осмиевой кислоты. В литературе описаны и другие методы фиксации отпечатков.

Наши преимущества:

• Недорого прием врача от 900 рублей
• Срочно анализы в день обращения от 20 минут до 1 дня
• Близко 5 минут от метро Варшавская и Чистые пруды
• Удобно работаем каждый день с 9 до 21 каждый день (включая праздники)
• Анонимно!

Все привыкли, что при обследовании мужчины у венеролога и уролога на инфекции, передающиеся половым путем, берут мазок из уретры и анализ крови на ИППП. Но бывает, что ведущую роль в диагностике играют и другие способы забора материала для исследования.

К таким методам относится мазок-отпечаток с головки и кожи крайней плоти полового члена мужчины.

Воспалительный процесс не всегда имеется в мочеиспускательном канале, и инфекция соответственно попадает и размножается не только в нем. При различных видах бактериальных и грибковых баланопоститов, генитальном герпесе, сифилисе, фимозе, папилломо-вирусной инфекции патологический процесс мы наблюдаем именно на коже полового члена и его головке.

Соответственно, закономернее будет взять мазки и соскобы непосредственно с очага поражения, а потом уже исследовать кровь и уретру.

Техника забора материала при анализе мазка-отпечатка достаточно проста. Существует 4 вида диагностики, при которой применяется этот метод:

1. Чистое предметное стекло просто прикладывается к воспаленному участку на коже члена. И при помощи небольшого скользящего движения происходит нанесение поверхностных слоев эпителия с имеющимися в нем возбудителями ИППП на стекло. Далее препарат высушивается, красится и микроскопируется. Так можно определить количество лейкоцитов, слизи, эпителия, грибов и бактерий с головки полового члена. Причем делается этот мазок-отпечаток достаточно быстро. Через полчаса ответ готов.
2. При помощи урогенитального зонда с поверхности головки, крайней плоти, с каких-то высыпаний и язвочек делается соскоб более глубоких слоев эпителия и помещается в пробирку эпендорф для проведения ПЦР анализа. Так определяют герпесы, сифилис, ВПЧ, кандиду, гарднереллу и других возбудителей венерических заболеваний кожи головки и крайней плоти полового члена мужчины.
3. Если же ватной стерильной палочкой снять налет или слизь с головки и поместить материал в транспортную или питательную среду, то можно провести посев на флору и чувствительность к антибиотикам той микрофлоры, которая вызвала воспаление кожи члена.
4. При наличии долго незаживающих язвочек, эрозий, пятен и подозрении на злокачественный процесс берется соскоб на атипичные клетки - цитологическое исследование.

Анализ мазка-отпечатка, наверное, самый безболезненный метод исследования мужской половой системы. Поэтому нет причин затягивать с обращением к врачу урологу и венерологу для сдачи этого анализа при появлении каких-то пятен и других патологических высыпаний на коже головки и крайней плоти полового члена.

Стоимость этого вида мазка - 900 рублей. Работает экспресс-лаборатория ежедневно. По результатам анализа Вас обязательно проконсультирует специалист по мужским болезням и ИППП.

Мазок отпечаток – исследование, о котором, в отличие от стандартного мазка, слышали далеко не все. Сегодня этот способ диагностики активно применяется , гинекологами, урологами, онкологами. А также некоторыми другими специалистами.

Как проводится взятие мазков отпечатков, интересуются пациенты у своих лечащих врачей.

Какие есть разновидности этого анализа?

Как правильно подготовиться к взятию отпечатка и как проводится расшифровка?

• Мазок отпечаток: особенности забора материала

Мазок отпечаток: что это за исследование

Многие пациенты часто интересуются о том, что это такое – исследование мазков отпечатков, и в чем особенности этого исследования. На самом деле исследование выполняется довольно просто. Все, что необходимо сделать – это приложить к предметному стеклу орган, который необходимо исследовать. Затем, когда отпечаток будет получен, окрашивают полученный материал специальным раствором и изучают с помощью микроскопа.

Интересно, что мазки отпечатки применяют не только для постановки диагнозов в медицинской сфере. Их широко применяют в судебно-медицинской экспертизе, микробиологии, патологической анатомии. Широко применяться подобное исследование стало только в последние годы. Да и то до сих пор далеко не все пациенты знают, что подразумевается под этим анализом.

Как правильно подготовиться к нему и какие бывают разновидности обследования.

Разновидности мазка отпечатка

Сегодня выделяют несколько вариантов забора мазка отпечатка. Пациенты спрашивают у своих врачей, какие есть разновидности исследования.

Вариантов несколько:

Исследование может быть применено, чтобы диагностировать различные инфекции на половых органах. Его выполнение рекомендуется при различных подозрениях на инфекционные процессы как специфического, так и неспецифического типа. Исследование с язвы может выполняться, например, при . При этой патологии на половом органе, особенно у мужчин появляется неприятная, болезненная язва. С нее и берется отпечаток, чтобы потом при темнопольной микроскопии обнаружить бледных трепонем.

Еще один вариант диагностики – это обнаружение заражения герпесом. Особенно он эффективен после того, как образуются эрозии после прорыва папул.

• Мазок отпечаток головки члена

Отпечаток рекомендуется выполнять мужчинам, которые страдают от неспецифических инфекций. Особенно часто его стоит проводить при баланопостите или баланите. С помощью исследования можно выявить неспецифичные патогены, такие как кокковая палочка, кишечная палочка, грибки.

• Мазок отпечаток с эрозии шейки матки

Женщинам рекомендуют сдавать анализ в том случае, если у них есть эрозия на шейке матки. Это необходимо чтобы убедиться, что в органе нет признаков злокачественного перерождения. Если такие признаки обнаруживаются, представительнице прекрасного пола рекомендуется обратиться к онкологу.

Показания к выполнению мазка отпечатка

Мазок отпечаток головки, с шейки матки или иных частей может выполняться по различным показаниям. Чаще всего врач направляет пациента на это исследование в том случае, если есть подозрение на инфекционный процесс.

Симптомы, с которыми больной может получить направление на анализ, следующие:

Всем хорошо известно, что мазок из уретры – болезненная процедура для представителей сильного пола. У женщин эта процедура проходит несколько легче, но все равно неприятна. Мазок отпечаток отличается от мазка из уретры полной безболезненностью выполнения.

Правда, к сожалению, показания для выполнения этих процедур не одинаковы, а потому заменить одну другой чаще всего нельзя.

Техника выполнения очень проста. Мужчину просят раздеться ниже пояса. Затем с помощью специальной щеточки собирают биологический материал. Особенно важно собрать достаточное количество материала, но при этом не переборщить.

Если материала будет недостаточно, нельзя будет получить хоть какие-то результаты. Избыток же биоматериала может привести к получению ложноположительных или ложноотрицательных результатов.

Полученный с помощью щеточки биологический материал наносят на предметное стекло. И закрепляют специальными методами для исследования с помощью микроскопа. Либо помещают в специальную пробирку.

Пробирку или стекло направляют в лабораторию, где проводятся дальнейшие исследования по необходимости. В качестве аналогии забора материала щеточкой можно приложить половой член к предметному стеклу или аккуратно собрать предметным стеклом выделения. Но, как считают врачи, использование щеточки – более правильный вариант.

Как готовятся мазки отпечатки

Приготовление мазка отпечатка – задача, которую должен выполнять грамотный врач или лаборант. Дело в том, что мало просто нанести биологический материал на предметное стекло. Его необходимо еще и правильно зафиксировать.

Если биоматериал не будет зафиксирован, то исследовать его с высокой степенью достоверности не удастся. Для окраски могут использоваться различные красители. Чаще всего применяют окраску по Граму. С ее помощью выявляют нормальную и патологическую микрофлору, которая может наносить пациенту вред.

Правда, стоит иметь в виду, что отпечаток не позволяет выявить вирусы, так как окрасить их невозможно. Зато с помощью этого диагностического метода можно обнаружить не только патогенные микроорганизмы, но и . Чаще всего диагностируется кандида.

Мазок отпечаток: базовые правила подготовки

Ни мужчине, ни женщине нельзя прийти на обследование и сразу получить достоверные результаты, сдав анализ просто так. Необходимо провести минимальную подготовку, которая позволит получить достоверные данные.

Если подготовка будет проводиться правильно, то результаты удастся получить наиболее точные и достоверные. Если же пациент нарушит рекомендации, велика вероятность того, что ему придется проходить диагностическое исследование повторно. Так как врач сможет поставить их достоверность под сомнение.

Расшифровка результатов мазка отпечатка

Расшифровка результатов мазка отпечатка должна проводиться врачом. Только медицинский работник сможет достоверно оценить результаты. Ориентируясь не только на то, что написано в справке, но и на то, как себя ощущает пациент. По сути, только благодаря врачу можно отделить достоверные результаты от ложноположительных и ложноотрицательных.

При оценке результатов в первую очередь обращают внимание на:

• наличие в мазке бактерий, которые могут быть как патогенными, так и нормальными;
• обнаружение в результатах патогенных грибков, которые могут негативно влиять на здоровье пациента;
• наличие эпителия, слизи и других частиц, которые могут оцениваться как положительно, так и отрицательно.

Пациентам не рекомендуется самостоятельно проводить расшифровку анализов даже в том случае, если кажется, что сделать это можно легко. Необходимо принести полученные результаты врачу. Чтобы он оценил итоги и, опираясь на них и объективные данные от исследования, мог поставить точный диагноз.

Мазок отпечаток: что делать, если результаты плохие

Если результаты мазка отпечатка оказались плохими, в первую очередь пациент не должен впадать в панику. Необходимо, посетив врача, получить от него направление на повторный анализ. При положительных результатах необходимо обязательно перепроверять итоги.

Чтобы исключить ложноположительные варианты поставки диагноза. Далее, после того как будут получены повторные результаты, если они все еще положительны, нужно обратиться к врачу.

Медицинский работник сможет:

• дать рекомендации относительно прохождения дополнительных исследований, чтобы поставить окончательный диагноз;
• дать рекомендации относительно правильного лечения заболевания;
• проконтролировать ход терапии и назначить контрольную диагностику, чтобы понять, насколько в итоге эффективно лечение;
• при необходимости поменять подход к лечению, чтобы получить надежные результаты.

Если у пациента выявлены инфекции, передающиеся половым путем, это может грозить нарушением репродуктивной функции. Именно бесплодие в основном заставляет людей обращаться к врачу для проведения диагностики. В которую, в том числе, может входить и выполнение мазка отпечатка.

Часто пациенты интересуются, где можно сдать цитологию мазка отпечатка или пройти альтернативу этому исследованию. Обратиться можно как в государственный кожно-венерологический диспансер, так и в частную клинику при необходимости. Сдать биоматериал на исследование можно на бесплатной основе. Если проходить диагностику по месту жительства по рекомендации врача. Также и платно.

Сдача мазка отпечатка – это хороший диагностический метод, позволяющий поставить диагноз во многих случаях. Если же этого подхода будет недостаточно для определения болезни, врач сможет после оценки результатов подобрать наиболее оптимальные варианты уточняющей диагностики. А затем выбрать способы терапии, которые дадут положительный эффект, а также проконтролировать ход лечения.

При необходимости сделать мазок отпечаток обращайтесь к грамотным венерологам и гинекологам.

Мазок-отпечаток может быть использован для диагностики инфекционных поражений половых органов. Они назначаются при подозрении на специфические или неспецифические инфекции.

Большинство инфекционных процессов мочеполовой системы локализованы в уретре. Поэтому врач берет соскоб из мочеиспускательного канала и проверяет его теми или иными методами ( , ПЦР, бак посев). Но не для всех инфекций основной зоной поражения становится уретра.

Венерические заболевания, при которых входными воротами может быть слизистая оболочка половых органов:

• сифилис;
• генитальный герпес.

Кроме того, при тяжелом течении герпеса с образованием изъязвлений может быть взят мазок-отпечаток. Он позволяет отдифференцировать эту инфекцию от других патологий: аутоиммунных, онкологических и других патологий.

Мазок-отпечаток головки члена

Неспецифические инфекционные процессы тоже могут быть поводом для назначения исследования.

Мазок-отпечаток головки берется при баланите или баланопостите. Это воспаление головки члена и крайней плоти.

Мазок-отпечаток окрашивают и изучают под микроскопом. Таким способом можно обнаружить некоторых патогенов: кокковую флору, кишечную палочку, грибки рода кандида.

При подозрении на герпетическое происхождение баланопостита из образовавшихся везикул могут быть взяты мазки-отпечатки. Их исследуют с целью выявления клеток Тцанка. Это гигантские многоядерные клетки, образующиеся при генитальном герпесе.

Проведение исследования возможно только при везикулярной форме инфекции.

Мазок-отпечаток для цитологического исследования

Цитологическое исследование предполагает определение в клиническом материале атипичных клеток, указывающих на рак. Для этого используется клинический материал, полученный непосредственно из очага онкологического процесса.

Врач может взять мазок-отпечаток с опухоли половых органов или кожи. Он исследуется под микроскопом.

Цель диагностики: морфологическая оценка клеточного состава. Проводится определение количества ядер, размера и формы клеток, ядро-цитоплазматического соотношения и других критериев. Основное показание к проведению цитологического исследования – это подозрение на рак.

Но диагностика также позволяет выявить и другие, неопухолевые патологические процессы.

Подготовка к исследованию мазка отпечатка

Подготовка к взятию мазка зависит от цели диагностики. Если есть подозрение на инфекционные процессы, обычно врач требует не использовать антисептики и антибактериальные препараты. Они могут уменьшить концентрацию возбудителя в клиническом материале, что приведет к ложноотрицательному результату исследования.

Место, откуда будет браться мазок, не следует мыть. Если это необходимо, не нужно использовать мыло и другие средства гигиены.

Непосредственно перед взятием мазка-отпечатка может потребоваться удаление фибринозных налетов, вскрытие везикул или других морфологических элементов кожи. Как изучают мазок-отпечаток на наличие бактерий?

Мазок-отпечаток из половых органов изучают под микроскопом.

На обезжиренное предметное стекло помещается клинический материал. Высушивают его при комнатной температуре.

Фиксация препарата проводится разными методами, например:

• жаром (наименее эффективный метод);
• спиртом с формалином;
• 95% этиловым спиртом;
• метиловым спиртом;
• парами уксусной кислоты и формалина;
• сулемовым спиртом и др.

В разных лабораториях применяются разные методики.

Разработаны специальные растворы для фиксации, представляющие собой смеси нескольких химических соединений. Чем более качественный раствор, тем лучше удается сохранить структуру и расположение всех клеток в мазке, включая бактериальные клетки. После фиксации проводится окрашивание. Для этого используются разные методы, в зависимости от цели исследования.

Окраска бывает ориентировочной и дифференциальной. Среди дифференциальных окрасок чаще окрашивают по Грамму.

Где сдать анализы?

При необходимости проведения исследований обращайтесь в нашу клинику. У нас доступны все современные методы диагностики патологических процессов. Применяются анализы на инфекции и цитологию.

Мазок-отпечаток возьмет опытный специалист с соблюдением всех правил асептики и антисептики, чтобы не занести инфекцию.

Медицинский работник сделает все возможное, чтобы процедура доставила минимум дискомфорта. Анализы будут проведены в кратчайшие сроки. После их выполнения вы получите консультацию опытного дерматолога, венеролога или другого специалиста.

Если вам необходимо безболезненно сдать мазок отпечаток, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с 15 летним опытом работы.

Задание 1 . Цитологический анализ гнойного экссудата.

Оснащение : предметные стекла, микроскопы; стерильные ватные тампоны; термостат; спирт-ректификат (65 мл); спирт метиловый абсолютный (65 мл); краска Романовского-Гимзы (120 мл); иммерсионное масло (6 мл); подопытные животные с гнойной раной.

Постановка опыта . Цитологическую картину воспалительного экссудата изучают при получении раневых отпечатков по М. П. Покровской и М. С. Макарову. В хирургической клинике заранее подбирают больное животное с раневой поверхностью, покрытой гнойным экссудатом.

Обычным способом, так же как и для гематологических исследований, подготавливают предметные стекла. Во время проведения лабораторных занятий хорошо вымытые и обезжиренные предметные стекла опускают в спирт (96%-ный), затем вынимают, остатки спирта поджигают. После охлаждения стекло готово к использованию для приготовления раневых отпечатков. При большом количестве гноя, покрывающего рану, его удаляют с помощью стерильных влажных ватных тампончиков. После этого поверхность стекла, отступив 1 см от узкого края, прикладывают к воспаленной ткани. Передвигая стекло, последовательно наносят несколько мазков-отпечатков. На стекле остаются тканевые клетки, клетки экссудата и микроорганизмы. При получении мазков не следует проводить стеклом по поверхности раны и тем самым предупреждать возможность повреждения клеточных элементов экссудата. Чтобы не исказить картины взаиморасположения фагоцитов и микроорганизмов, иногда располагающихся гнездами, нужно слегка прикоснуться стеклом к избранному участку раны и тотчас же отнять его в положении, строго перпендикулярном к раневой поверхности. Для полноты характеристики раневого процесса отпечатки лучше делать с разных участков очага повреждения, например от центра к периферии.

Полученные раневые мазки-отпечатки сушат, затем фиксируют в течение 5 мин метиловым спиртом (этиловым спиртом в равной смеси с этиловым эфиром в течение 15 мин). Фиксированные и высушенные в термостате или на воздухе препараты окрашивают по методу Романовского-Гимзы.

При микроскопировании окрашенных мазков-отпечатков обращают внимание на наличие нейтрофилов разной степени зрелости, микро — и макрофагов, фагоцитирующих возбудителей воспалительного процесса. Устанавливают активность фагоцитов в разных участках раны.

По цитограммам раневых отпечатков можно определить активность защитных и регенераторных реакций организма, степень бактериальной обсемененности и патогенности микроорганизмов, инфицирующих рану. Перечисленные факторы обусловливают динамику заживления ран. Обнаружение полиморфно-ядерных нейтрофильных лейкоцитов, активно фагоцитирующих возбудителей инфекционного процесса, свидетельствует о высокой активности фагоцитарной реакции. В более позднем периоде заживления раны хорошим признаком считается выявление большого числа макрофагов - моноцитарных клеток.

Оформление протокола опыта . Записывают методику приготовления мазков-отпечатков. Отмечают результаты цитологического анализа испытуемого экссудата, обсуждают их и делают выводы.

Вопросы для контроля знаний:

1. Воспаление. Определение понятия. 2. Этиологические факторы, вызывающие воспаление. 3. Внешние признаки воспаления и их характеристика. 4. Расстройства кровообращения и микроциркуляции в зоне воспаления. 5. Характеристика нарушений обмена веществ в очаге воспаления. 6. Роль биологически активных веществ в патогенезе воспаления. 7. Классификация воспалений. 8. Виды экссудата. 9. Виды гнойного воспаления. 10. Эмиграция лейкоцитов при воспалении, основные теории, объясняющие это явление. 11. Учение о фагоцитозе. Завершенный и незавершенный фагоцитоз. 12. Свойства экссудата. 13. Классификация воспалений по преобладанию альтерации, экссудации и пролиферации. 14.Воспаление как реакция целостного организма на повреждение. 15. Патогенез воспаления. Характеристика стадий альтерации, экссудации и пролиферации. 16. Исходы воспаления. 17. Биологическая роль воспаления. 18. Особенности течения воспаления у основных видов сельскохозяйственных животных (лошадей, крупного рогатого скота, свиней и птиц).