روش های تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV. قوانینی برای تشخیص عفونت HIV

به چندین روش مختلف تولید شده است. به نظر می رسد هیچ چیزی آسانتر از شناسایی این بیماری از طریق نمونه گیری خون نیست. اما اینطور نیست. تشخیص HIV از این طریق قابل تشخیص است ، اما تحقیقات بیشتر با روش های مختلف انجام می شود. این تا حد زیادی به آنها بستگی دارد که چه درمانی برای بیمار تجویز می شود و متعاقباً چه اقداماتی انجام می شود. در میان گسترده ترین و بسیار موثرترین روش ها ، معمول است که تجزیه و تحلیل غربالگری و لکه ایمنی را از هم تشخیص دهیم. هر یک از آنها باید با جزئیات بیشتری در نظر گرفته شود.

تشخیص ایدز: تجزیه و تحلیل غربالگری

در مرحله اولیه تشخیص عفونت HIV از آزمایش غربالگری یا روش آزمایش ELISA استفاده می شود. هنگام توسعه این روش در شرایط آزمایشگاهی ، پروتئین های ویروس به طور مصنوعی ایجاد می شوند. آنها به روشی خاص نسبت به آنتی بادی واکنش نشان می دهند. دومی در بدن تولید می شود وقتی سلول در آن ظاهر می شود ، آلوده به یک بیماری وحشتناک. در این حالت ، تشخیص آزمایشگاهی HIV با استفاده از آنزیم های مصنوعی انجام می شود. در تعامل با آنتی بادی ها ، آنها به رنگ خاصی رنگ آمیزی می شوند. یک نوار با اندیکاتور ، پس از خون گرفتن روی آن ، در زیر دستگاه خاصی قرار می گیرد که با کمک آن می توان تشخیص داد که فردی به این بیماری مبتلا است یا خیر. روش های مدرن تشخیص HIV ، از جمله ELISA ، تعیین واقعیت عفونت یا عدم وجود آن را با دقت بالا امکان پذیر می کند. اما ، مانند همه تجهیزات ، دستگاه غربالگری نیز خطایی دارد. به همین دلیل است که در صورت لزوم ، آنالیز توسط بیمار تکرار می شود.

مهم است که بدانید آزمایش ELISA یکی از روشهای اولیه برای تعیین وجود ویروس نقص ایمنی در بدن است. عفونت HIV تشخیصی است که تنها چند هفته پس از آلودگی قابل تشخیص است. وقتی سلولهای آلوده وارد جریان خون می شوند ، سیستم ایمنی بدن شروع به مقاومت فعال می کند. آنتی بادی تولید می شود که با آزمایش های آزمایشگاهی پس از دو یا سه هفته شناسایی می شود. تشخیص به موقع عفونت HIV با استفاده از آزمایش ELISA امکان شناسایی آنتی بادی های ویروس نقص ایمنی در خون انسان را فراهم می کند. این تفاوت اصلی آن با سایر روشهای مدرن است.

شایان ذکر است که در برخی از افراد ، تولید آنتی بادی های این بیماری در تاریخ بعدی شروع می شود. از لحظه ابتلا تا ابتدای این روند ممکن است از سه تا شش هفته طول بکشد. به همین دلیل متخصصان پزشکی چهار تا پنج هفته پس از رابطه جنسی بدون محافظت یا هر دلیل دیگر مشکوک به عفونت تصادفی ، آزمایش های غربالگری را توصیه می کنند.

روشهای ELISA برای تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV برای مدت طولانی ایجاد شده است. امروز چهار نسل آزمایش وجود دارد. دقیق ترین و موثرترین آنها مواردی است که آخرین ساخته شده اند. تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV و ایدز با استفاده از آزمایش های ELISA نسل سوم و چهارم با استفاده از پروتئین ها و پپتیدهای نوترکیب انجام می شود. حساسیت این آزمایشات به آنتی بادی های تولید شده توسط بدن 92 - 93٪ است. ما در مورد روش تحقیق روسیه صحبت می کنیم. اروپایی ها یاد گرفته اند که چنین آزمایشاتی را با حساسیت 99٪ انجام دهند.

روشهای مدرن تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV مبتنی بر ELISA نه تنها برای تشخیص وجود بیماری استفاده می شود. با کمک تجزیه و تحلیل غربالگری ، می توان شیوع ویروس نقص ایمنی را کنترل کرد و همچنین قبل از گرفتن خون از اهدا کنندگان ، مواد آزمایش را جمع آوری کرد.

ELISA یک روش استاندارد برای تشخیص عفونت HIV است: چگونه انجام می شود ، چرا نتیجه کاذب می دهد؟

تشخیص اچ آی وی و ایدز توسط ELISA یک روش استاندارد است. خون بیمار از ورید گرفته می شود. برای تجزیه و تحلیل ، پنج میلی لیتر ماده کافی است. بالینی تشخیص HIV نوع 2 و 1 حداقل هشت ساعت پس از غذا خوردن انجام می شود. پزشکان توصیه می کنند این کار را صبح ناشتا انجام دهید. نتایج یک مطالعه کامل پس از دو یا سه روز مشخص است. غربالگری سریع در زمان کمتری انجام می شود. این کار معمولاً فقط چند ساعت طول می کشد. با این حال ، خطا در این مورد افزایش می یابد. تشخیص سریع HIV در موارد فوری ضروری است ، به عنوان مثال ، هنگامی که بیمار به عمل جراحی فوری نیاز دارد. چنین تحلیلی لزوماً قبل از مداخلات جراحی بدون برنامه انجام می شود ، زیرا اگر بیمار مبتلا به ویروس نقص ایمنی باشد ، پزشکان اقدامات ایمنی بیشتری را مشاهده می کنند. تشخیص بالینی عفونت اچ آی وی در مدت زمان کوتاه نیز در مواردی ضروری است که برای نجات بیمار دیگری باید سریع خون اهدا کننده گرفته شود.

مواردی وجود دارد که فرد مبتلا به ایدز یا اچ آی وی تشخیص داده شده است ، اما در نتیجه وی تأیید نشده است یا بالعکس. چرا در مورد آزمون ELISA این اتفاق می افتد؟ یک نتیجه منفی کاذب ممکن است به این دلیل باشد که خون به درستی برای مطالعه آماده نشده است. گاهی اوقات دلیل این امر اجرای نادرست حصار وی است. یک نتیجه منفی کاذب هنگام تأیید تشخیص عفونت HIV حتی در مواردی که مواد برای مطالعه خیلی زود گرفته شده است ، تأیید نمی شود. پس از همه ، پس از عفونت ، حداقل باید سه هفته گذشته باشد. مواردی وجود دارد که نتیجه تشخیص ویروس نقص ایمنی مثبت کاذب است. این به دلیل وضعیت کلی سیستم ایمنی و هورمونی بدن انسان است. در بیشتر موارد ، بیمار دارای بیماری هایی است که نتیجه یک نتیجه مثبت کاذب است. ما در مورد هپاتیت الکلی صحبت می کنیم ، که در آن کبد آنزیم های خاصی تولید می کند ، که می تواند منجر به تشخیص نادرست HIV شود. بارداری و برخی بیماری های خودایمن همراه با میلوم متعدد نیز می توانند باعث ایجاد نادرستی شوند. این لیست می تواند شامل بیماران دیالیزی و کسانی باشد که کمی قبل از تشخیص افتراقی HIV واکسینه شده اند.

صحبت از تجزیه و تحلیل غربالگری ، توجه به این نکته مهم است که این روش تحقیق نیاز به تأیید دارد. پزشکان ، قبل از تشخیص HIV بر اساس آن ، حتما بیمار را برای لکه ایمنی بفرستند.

روش های اصلی تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV: لکه ایمنی

ایدز که تشخیص و درمان آن ارتباط تنگاتنگی با هم دارند ، از چند طریق به طور هم زمان کشف می شود. همانطور که در بالا ذکر شد ، یک آزمایش ELISA برای تعیین نهایی تشخیص کافی نیست. تشخیص افتراقی عفونت HIV در این مورد با لکه ایمنی تکمیل می شود. در پزشکی مدرن ، این روش نهایی تایید کننده برای تشخیص است. برای تحقیق در این مورد ، از پروتئین های موجود در خون بیمار استفاده می شود. آنها در یک ژل مخصوص جدا می شوند و پس از آن کارگران آزمایشگاه فرصت مطالعه ترکیب مولکولی خون را دارند.

زمان تشخیص HIV با این روش از یک تا سه روز است. برای تحقیق ، خون از رگ آزمودنی گرفته می شود که با ژل روی دستگاه تستر قرار می گیرد. نتیجه ای که مورد سال است ، ممکن است در دوران بارداری ، وجود فرآیندهای آنکولوژیک ، سل رخ دهد. اگر مطالعه اشتباه انجام شود و اگر خیلی زود انجام شده باشد ، می تواند واکنش منفی کاذب به این آزمایش نشان دهد. حداقل سه هفته باید از لحظه عفونت بگذرد. به هر حال ، زمان تشخیص HIV به طور مستقیم به وضعیت ایمنی بدن بستگی دارد.

سایر روش های تشخیص ایدز و اچ آی وی

تشخیص رادیولوژیک ایدز ، به عنوان یک قاعده ، در ترمینال یا مراحل ثانویه استفاده می شود. با کمک آنها ، می توان تغییراتی را که به دلیل بیماری های ثانویه یا عفونت های فرصت طلب در بدن رخ می دهد ، ایجاد کرد.

تشخیص Bioresonance HIV ، که اسکن غیر خطی نیز نامیده می شود ، عمدتا در کلینیک های خصوصی برای شناسایی ویروس نقص ایمنی استفاده می شود. پزشکی رسمی این روش را به اندازه کافی دقیق و موثر نمی داند. شاید ، بهبود تشخیص های غیر خطی در آینده ، شناسایی این تشخیص وحشتناک در دوره جوجه کشی را ممکن کند.

تشخیص عفونت HIV: روش سرولوژی و ویژگی های آن

این یک روش نسبتاً جدید است که در آن معیارهای آزمایشگاهی برای تشخیص عفونت HIV بر اساس اصل آنتی ژن - آنتی بادی استوار است. در مورد ویروس نقص ایمنی ، جستجوی آنتی بادی های ویروس در بدن انسان رخ می دهد. برای این منظور ، از یک آنتی ژن مشتق شده مصنوعی استفاده می شود که آنتی بادی ها باید به آن پاسخ دهند. نشانگرهای سرولوژیکی خاص عفونت HIV باعث تغییرات خاصی در ترکیب خون می شود. لازم به ذکر است که این روش تحقیق در مرحله حاد ، که با تغییر سروکال پایان می یابد ، بیشترین تأثیر را دارد. پس از آن یک دوره تأخیر بدون علامت رخ می دهد ، که در طی آن یافتن آنتی ژن کار آسانی نیست.

تشخیص مرجع عفونت HIV: شرح و ویژگی ها

مقادیر مرجع اچ آی وی دقیق ترین در تشخیص تشخیص است. این روش تحقیق ترکیبی از آزمون ELISA و لکه ایمنی است. آزمایشگاه مرجع تشخیصی اچ آی وی امکان جمع آوری آزمایشات و پردازش های بعدی آنها را به دو روش همزمان فراهم می کند. با این کار می توانید در 24 ساعت دقیق ترین نتیجه را بدست آورید. بررسی مجدد تجزیه و تحلیل به دست آمده در آزمایشگاه مرجع تنها در صورت مغایرت داده های آزمایش ELISA و لکه های ایمنی ضروری است. این یک اتفاق نسبتاً نادر است که اغلب در افراد مبتلا به بیماری های همزمان توضیح داده شده در بالا اتفاق می افتد.

تشخیص HIV یکی از وظایف اصلی است که کارمندان درمانگاه پوست و همچنین کارمندان پلی کلینیک با آن روبرو هستند.

پزشکان این بیماری را بسیار موذیانه توصیف می کنند. این یک دوره مزمن است و به درمان کامل پاسخ نمی دهد. برای کنترل و جلوگیری از گسترش کنترل نشده مهم است که به موقع آن را تشخیص دهید. ویژگی های ویروس نقص ایمنی انسانی چیست و چگونه می تواند آلوده شود ، بیماران اغلب علاقه مند می شوند.

راه های تشخیص بیماری چیست ، و چه علائمی عفونت را نشان می دهد؟

امروز می توانید از همه جا بشنوید که عفونت HIV چقدر خطرناک است. با این حال ، تعداد کمی توضیح می دهند که این خطر چیست. در نتیجه ، بیماران یک مجموعه اطلاعات ناقص دارند و در نتیجه ، تهدید را جدی نمی گیرند. اما HIV بسیار خطرناک است. این بیماری به عنوان یک بیماری ویروسی آهسته پیشرونده مستعد یک دوره مزمن طبقه بندی می شود. در این آسیب شناسی ، سیستم ایمنی بدن در درجه اول تحت تأثیر قرار می گیرد.

پزشکان توجه بیماران را به این واقعیت جلب می کنند که مرگ به خودی خود از ویروس نقص ایمنی اتفاق نمی افتد.

فرد در اثر عفونت های همزمان می میرد ، بدن دیگر قادر به محافظت کامل در برابر آن نیست. همچنین ، علت مرگ تومورهای سرطانی است که قادر به مقابله با کاهش ایمنی نیستند.

در حقیقت ، سازوکاری که عفونت HIV بر روی سیستم ایمنی بدن تأثیر می گذارد کاملاً پیچیده است. همانطور که پزشکان متذکر می شوند ، بیماران نیازی به درک کامل آن ندارند. کافی است بدانید که این بیماری می تواند سطح ایمنی بدن را به مقادیر حیاتی کاهش دهد. در نتیجه ، بدن قادر به دفاع از خود در برابر تأثیرات مختلف بیرونی نخواهد بود ، که دیر یا زود منجر به مرگ خواهد شد.

چگونه عفونت رخ می دهد

درک این نکته مهم است که امروزه عفونت HIV توسط افسانه های متنوعی احاطه شده است.

بیماران در مورد زمان آلوده شدن و سلامتی در معرض خطر بسیار آگاه نیستند.

اولین چیزی که باید بخاطر بسپارید این است که HIV در محیط خود بسیار شکننده است. این بدان معنی است که یک میکروارگانیسم بیماریزا قادر است به طور کامل و مدت طولانی فقط در بدن انسان زندگی کند. او حرارت بالای 50 درجه را تحمل نمی کند (بلافاصله می میرد). همچنین قادر به مقاومت در برابر فرایندهای خشک کردن نیست. همه مایعات بدن حاوی ویروس کافی برای بروز عفونت نیستند.

بزرگترین خطر توسط:

• خون
• قبل از انزال؛
• اسپرم
• ترشح از واژن زن ؛
• لنفاوی
• شیر مادر.

اگر هر یک از این مایعات با غشای مخاطی که در آن میکروتروما وجود دارد یا با پوست آسیب دیده تماس پیدا کند ، عفونت رخ می دهد.

همچنین اگر مایع خارجی مستقیماً وارد جریان خون شود نیز ممکن است. بزاق و اشک برخلاف تصور عمومی تهدیدی محسوب نمی شود. به دلیل ماهیت ویروس و میزان بقای کم آن ، از چند طریق منتقل می شود:

• دستگاه تناسلی یعنی با مقاربت جنسی محافظت نشده ، که ناگزیر مستلزم تماس مایعات بیولوژیکی و غشاهای مخاطی بدن در معرض پاتوژن است.
• مسیر زاویه ای یعنی انتقال ویروس با خون در هنگام انتقال آن یا به دلیل استفاده از ابزار غیر استریل برای اهداف پزشکی ؛
• مسیر عمودی یعنی از مادر به کودک (امروز ، اگر خانمی از درمان ضد ویروسی استفاده کند و از شیردهی امتناع کند ، احتمال عفونت کودک در هنگام زایمان به حداقل می رسد).

درک این نکته مهم است که اگر برای عفونت از طریق پوست نیاز به میکروتروما یا زخم های باز باشد ، برای عفونت از طریق غشای مخاطی این یک شرایط ضروری نیست. تفاوت با این واقعیت توضیح داده می شود که غشای مخاطی و پوست بدن انسان کاملاً متفاوت است. این تفاوت باید در نظر گرفته شود.

علائم مشکوک به HIV چیست؟

بسیاری از بیماران به این س interestedال علاقه مند هستند که معمولاً چه علائمی به ویروس نقص ایمنی انسانی آلوده شده اند.

• افزایش نامعقول دما از نوع سیستمیک ، که با هیچ عفونت دیگری قابل توضیح نیست و با وجود اقدامات انجام شده برای درمان ، برای مدت طولانی ادامه دارد.
• افزایش شدید گره های لنفاوی در اندازه (اول از همه ، گره های ناحیه کشاله ران رنج می برند ، اما درگیری آنها در بدن نیز امکان پذیر است).

• کاهش شدید وزن بدن ، که نمی تواند با رژیم های غذایی ، استرس ، اختلالات هورمونی و دلایل دیگر توضیح داده شود.
• شکایت از اختلالات مدفوع که مدتهاست بیمار را دنبال می کند و یافتن دلیل ظهور آنها امکان پذیر نیست.
• تمایل مشخص به انتقال هر نوع بیماری عفونی به اشکال مزمن ، و ماهیت پاتوژن بسیار مهم نیست ، هر دو آسیب شناسی باکتریایی و ویروسی مزمن هستند.
• بیماری های تحریک شده توسط میکرو فلورا بیماریزا ایجاد می شود ، که تهدیدی برای شخصی که ایمنی کامل عملکردی ندارد (به عنوان مثال ، مایکوپلاسموز ، اوره پلاسموز ، کاندیدیازیس و غیره) ایجاد نمی کند.

همانطور که پزشکان می گویند ، کلینیک عفونت HIV بسیار غیر اختصاصی است. به همین دلیل ، تشخیص آن اغلب دشوار است. بسیاری از بیماران علائم هشدار دهنده را کاملاً نادیده می گیرند و ترجیح می دهند به دنبال کمک پزشکی نباشند. حتی اگر این بیماری به شدت بر سلامت عمومی آنها تأثیر بگذارد.

درک این نکته مهم است که ممکن است عفونت HIV به مدت طولانی احساس نشود. و هنگامی که اولین علائم ظاهر می شود ، ممکن است فرد حتی آنها را با احتمال عفونت خود ارتباط ندهد و برای درمان در خانه تلاش کند.

روشهای تشخیصی

تشخیص آزمایشگاهی HIV از مدت ها قبل توسعه یافته است و برای تشخیص این بیماری خطرناک با موفقیت مورد استفاده قرار گرفته است.

تنها با علائم بیماری قابل تشخیص نیست. بنابراین ، تأیید تشخیص بر اساس تکنیک های آزمایشگاهی اغلب نقشی تعیین کننده دارد.

روش های مختلفی برای تشخیص HIV وجود دارد. در روسیه ، در وهله اول ، اولویت با لکه های ایمنی و همچنین واکنش های ELISA است. این روش ها اغلب به عنوان روش غربالگری ، به عنوان مثال ، هنگام بررسی پرسنل پزشکی استفاده می شود.

سیستم های ELISA

غالباً ، بیماران در صورت مشکوک بودن به ویروس نقص ایمنی انسانی ، از پزشکان خود می پرسند که با چه روشی می توانند جستجوی تشخیصی را شروع کنند.

هر پزشک شایسته ای می گوید که اولویت با روش ایمونواسی آنزیمی است. این روش اولین مرحله تشخیصی در روسیه است.

اصل الایزا ساده است. در آزمایشگاه ، پزشکان پروتئین های خاصی ایجاد کرده اند. آنها قادر به شناسایی و تعامل با آنتی بادی های تولید شده توسط بدن در پاسخ به تماس با HIV هستند. سپس یک آنزیم نشانگر ویژه به سیستم اضافه می شود که رنگ آن را تغییر می دهد. در مرحله آخر ، مواد با استفاده از دستگاه خاصی پردازش می شوند و پزشک نتیجه نهایی را دریافت می کند.

ELISA بسیار محبوب است.

اول از همه ، با توجه به این واقعیت که حتی اگر بیش از چند هفته از ورود پاتوژن به بدن نگذشته باشد ، می توان نتیجه گرفت.

درک این نکته مهم است که آنزیم ایمونوسی خود ویروس را در خون تشخیص نمی دهد بلکه آنتی بادی های آن را تشخیص می دهد.

در بسیاری از افراد ، تولید آنها ممکن است دیرتر از دو هفته بعد باشد ، که این امر ممکن است منجر به اشتباه بودن نتیجه شود. چندین آزمایش ELISA وجود دارد.

مدرن ترین و بسیار دقیق آنهایی هستند که متعلق به نسلهای 3 و 4 هستند. پزشکان متذکر می شوند که بهتر است در صورت وجود انتخاب ، معرفهای اروپایی را ترجیح دهند ، زیرا دقت آنها به 99٪ می رسد. زمان به دست آوردن نتایج ELISA به طور متوسط \u200b\u200b2 تا 10 روز است.

چرا ELISA می تواند نادرست باشد

درک این نکته مهم است که آنزیم ایمونواسی می تواند هم نتایج مثبت کاذب و هم نتایج منفی کاذب را ارائه دهد. اگرچه خطر چنین توسعه ای از حوادث بسیار ناچیز است.

اگر تجزیه و تحلیل خیلی زود انجام شود ، بیمار می تواند نتایج منفی کاذب را بدست آورد و هنوز آنتی بادی ها فرصت تشکیل در بدن را ندارند.

برای حذف چنین واکنشی ، به بیماران توصیه می شود چندین بار در فواصل مختلف آزمایش شوند.

آزمایش مثبت کاذب در برخی شرایط مشاهده می شود. به عنوان مثال ، بیماران با:

• هپاتیت الکلی
• میلوم در تعداد زیاد ؛
• برخی از بیماری های خود ایمنی ؛
• زنان در دوران بارداری و غیره

در چنین بیماری هایی ، خون انسان با آنتی بادی ها پر می شود. آنها می توانند از نظر ساختار به آنتی بادی های HIV شباهت داشته باشند ، که واکنش دهنده ها را گیج می کند و واکنشی ایجاد می کند. البته در سالهای اخیر سیستمهای تست حساسیت بیشتری پیدا کرده اند. با این حال ، مشکل نتایج نادرست هنوز به طور کامل حل نشده است.

نقص ایمنی

در شرایط مدرن ، تنها با تکیه بر ELISA تشخیص HIV مثبت غیرممکن است. تأیید نتایج به دست آمده ضروری است ، که با استفاده از واکنش لکه ایمنی انجام می شود (لکه بینی ، IB).

برای انجام IB ، آزمایشگاه باید دارای نوارهای تست ویژه باشد. پروتئین های ویروسی روی آنها اعمال می شود. قبل از تجزیه و تحلیل ، خون بیمار از ورید گرفته شده به روش خاصی تهیه می شود.

مواد بیولوژیکی بدست آمده به ژل اضافه می شوند ، در این پروتئین ها با توجه به وزن آنها جدا می شوند. سپس ، یک نوار قبلاً آماده شده به جرم حاصل کاهش می یابد.

نوار مرطوب می شود (لکه ایجاد می شود) ، در صورت وجود پروتئین های اچ آی وی در مواد ، نوارها روی آن شناسایی می شوند. اگر پروتئین وجود نداشته باشد ، مرطوب شدن باعث تغییر شکل نوار نمی شود.

تفسیرهای مختلفی از وسترن بلات وجود دارد. با این حال ، مهم نیست که یک بیمارستان یا آزمایشگاه خاص از چه روشی برای رمزگشایی استفاده می کند ، احتمال تشخیص صحیح 9/99 درصد است.

آیا ممکن است لکه های ایمنی نتایج نادرستی به همراه داشته باشد ، بیماران اغلب تعجب می کنند؟ بله ، این امکان وجود دارد ، به عنوان مثال ، اگر بیمار از سل بیمار باشد ، باردار باشد یا از سرطان رنج ببرد.

PCR برای کمک به شما

PCR روش دیگری است که می تواند ویروس نقص ایمنی انسانی در خون و سایر مایعات بیولوژیکی را تشخیص دهد ، جایی که غلظت آن بسیار زیاد است.

همانطور که پزشکان متذکر می شوند ، واکنش زنجیره ای پلیمراز می تواند در طی 10 روز پس از اولین تماس بدن با عفونت نتیجه مثبتی ایجاد کند.

درک این نکته مهم است که PCR در برخی موارد نتایج مثبت کاذبی را به همراه دارد. این امر با این واقعیت توضیح داده می شود که این روش از حساسیت بسیار بالایی برخوردار است.

در نتیجه ، اغلب اوقات به آنتی بادی های مشابه واکنش نشان می دهد ، که نشان دهنده فرایندهای آسیب شناختی کاملا متفاوت در بدن بیمار است.

علیرغم حساسیت بالا و احتمال کم برای به دست آوردن نتایج کاذب ، از PCR به طور گسترده ای استفاده نمی شود. این با چندین عامل توضیح داده می شود. اول ، برای انجام واکنش زنجیره ای پلیمراز به تجهیزات خاصی نیاز است که قیمت آنها بسیار بالا است. ثانیا ، پرسنلی که با تجهیزات کار می کنند باید از مهارت بالایی برخوردار باشند که این امر نیز می تواند مشکلاتی را ایجاد کند. این ویژگی ها در کنار هم PCR را به یک روش تشخیصی گران تبدیل کرده و در نتیجه برای همه در دسترس نیست.

علیرغم این واقعیت که PCR یک روش غربالگری نیست ، برای مثال برای آزمایش نوزاد متولد شده از ویروس نقص ایمنی انسانی استفاده می شود.

سیستم های Express برای تشخیص

پزشکان و دانشمندان در ایجاد آزمایشات سریع برای ارزیابی عفونت HIV بسیار تلاش کرده اند. همانطور که پزشکان متذکر می شوند ، هنگام استفاده از این سیستم ها ، می توان در عرض 15 دقیقه پس از انجام آزمایش نتیجه گرفت.

آزمایشات سریع HIV بر اساس اصل ایمونوکروماتوگرافی انجام می شود. این سیستم معمولاً شامل یک نوار آغشته به معرفهای مخصوص است.

وظیفه بیمار استفاده از خون ، اسپرم یا هر مایع بیولوژیکی دیگری است که ممکن است حاوی آنتی بادی های ویروس باشد.

اگر آنها پیدا شوند ، دو نوار رنگی روی نوار ظاهر می شود ، یکی از آنها کنترل و دیگری تشخیصی است. در غیر اینصورت ، فقط نوار کنترل روشن خواهد شد.

درک این نکته مهم است که آزمایش های سریع 100٪ تضمین نمی کند که فرد آلوده یا برعکس ، به HIV آلوده باشد. در هر صورت ، نتایج بدست آمده با کمک آنها باید در آزمایشگاه با استفاده از لکه ایمنی تأیید شود.

سیستم های تست سریع برای بیمارانی که می خواهند در خانه خود را آرام کنند مناسب است. با این حال ، همانطور که پزشکان متذکر می شوند ، حتی اگر شخصی با کمک آنها نتیجه منفی دریافت کند ، اگر به تغییرات منفی در بدن مشکوک هستید ، هنوز باید با یک پزشک مشورت کنید.

اگر مشکوک به عفونت هستید با کدام پزشک تماس بگیرید

بسیاری از بیماران تعجب می کنند که در صورت مشکوک بودن به عفونت HIV باید به کدام پزشک مراجعه کنند. اول از همه ، توصیه می شود به یک متخصص دامپزشکی مراجعه کنید. این متخصص پزشکی است که متخصص بیماری هایی است که از طریق تماس جنسی از فردی به فرد دیگر منتقل می شود.

متخصص دامپزشکی قادر به انجام یک معاینه صالح ، جمع آوری آنامز و تصمیم گیری در مورد معاینات لازم برای بیمار برای تشخیص دقیق است. به تشخیص خود ، او همچنین می تواند بیمار را به بیمارستان بیماری های عفونی ارجاع دهد. به خصوص اگر او هنوز هم به اچ آی وی مشکوک باشد.

ویروس نقص ایمنی انسانی یک بیماری شایع است. هرکسی که از نظر جنسی فعال باشد می تواند با او روبرو شود.

آگاهی از خصوصیات شیوع و تشخیص این بیماری در واقعیت های مدرن در صورتی که بیمار بخواهد سلامتی و طول عمر خود را حفظ کند ، امری حیاتی است. فقط مراجعه به موقع به پزشک به شما امکان می دهد عفونت را تحت کنترل درآورید و از خود در برابر آن محافظت کنید!

تشخیص بالینی و آزمایشگاهی عفونت HIV دارای سه جهت است:

1. ایجاد واقعیت عفونت اچ آی وی ، تشخیص عفونت اچ آی وی.
2. تعیین مرحله سیر بالینی بیماری و شناسایی بیماری های ثانویه.
3. پیش بینی پیشرفت دوره بالینی بیماری ، نظارت آزمایشگاهی بر اثربخشی درمان و عوارض جانبی داروهای ضد ویروسی.

1. ایجاد عفونت HIV ، تشخیص عفونت HIV

برای تعیین عفونت HIV ، از شاخص های خاص زیر استفاده می شود: آنتی بادی های HIV ، آنتی ژن های HIV ، RNA HIV و DNA ویروس. آنتی بادی های اچ آی وی با استفاده از روش سنجش ایمنی جاذب مرتبط با آنزیم (ELISA) یا لکه ایمنی تعیین می شود که اساساً نوعی الیزا است. آنتی ژن ها (پروتئین ها) HIV توسط ELISA تعیین می شوند. با کمک روش های ژنتیکی مولکولی واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) و bDNA ، می توان HIV RNA و DNA ویروس را تعیین کرد. استفاده از روش اضافی ترکیبی از اسیدهای نوکلئیک با پروب های اختصاصی DNA ، بررسی ویژگی توالی DNA به دست آمده در طی PCR را امکان پذیر می کند. حساسیت PCR ، تشخیص ژنهای ویروسی در یک از پنج هزار سلول است.

در عفونت اولیه ، پویایی زیر در مارکرهای HIV در خون افراد آلوده مشاهده می شود. در ماه اول ، در نتیجه فعال شدن روند تکثیر ، افزایش شدید بار ویروسی (محتوای RNA HIV در پلاسما) رخ می دهد ، سپس ، به دلیل انتشار ویروس و عفونت گسترده سلولهای هدف در خون و غدد لنفاوی ، تعیین DNA proviral امکان پذیر است. واقعیت تشخیص DNA ویروس که در ژنوم سلول هدف ادغام شده از اهمیت تشخیصی بالایی برخوردار است.

بار ویروسی نشان دهنده شدت روند تکثیر در سلولهای آلوده است. در طول دوره عفونت اولیه ، میزان بارگیری ویروسی در صورت آلوده شدن به زیرگروههای مختلف HIV متفاوت است ، اما پویایی تغییرات آن تقریباً یکسان است. بنابراین ، هنگامی که با زیرگروه B آلوده شوید ، به عنوان مثال ، اگر در ماه اول پس از عفونت بار ویروسی 700 نسخه در میلی لیتر باشد ، در ماه 2 کاهش به 600 ، در 3 - به 100 ، در 4 - به 50 نسخه / میلی لیتر چنین پویایی در پس زمینه افزایش محتوای آنتی بادی های خاص HIV در خون مشاهده می شود. محتوای DNA ویروسی در سلولهای تک هسته ای خون بیماران آلوده به HIV با ثابت ماندن نسبی در طی 6 ماه اول با نوسانات جزئی در برخی از زیرگروه ها مشخص می شود. بنابراین ، بارهای RNA و DNA یکسان نیستند.

در طی مرحله جوجه کشی ، برای مدتی ، هیچ تشکیل آنتی بادی اختصاصی برای HIV به مقدار کافی برای تعیین با روش های آزمایشگاهی موجود وجود ندارد. قبل از ثبت آنتی بادی ها ، ظهور در خون پروتئین Nef ، که روند تکثیر را سرکوب می کند و پروتئین ساختاری p24 ، برای مدت زمان بسیار کوتاهی مشاهده می شود. آنتی ژن p24 را می توان با استفاده از روش سنجش ایمنی جاذب متصل به آنزیم در خون از 1-2 پد پس از عفونت تشخیص داد و تا هفته هشتم تعیین کرد ، سپس محتوای آن به شدت کاهش می یابد. بعلاوه ، در دوره بالینی عفونت HIV ، افزایش دوم در محتوای پروتئین p24 در خون وجود دارد. این به شکل گیری ایدز است. ناپدید شدن پروتئین های هسته آزاد (که توسط آنتی بادی ها متصل نیستند) p24 در خون و ظهور آنتی بادی های اختصاصی نسبت به پروتئین های HIV ، نشان دهنده شروع تغییر سروکال است (شکل 9.6).

ویرمی و آنتی ژنمی باعث تشکیل آنتی بادی های خاص IgM می شود (anti-p24، anti-gp41، anti-gp120، anti-gp160). آنتی بادی های رایگان کلاس های IgM و IgG نسبت به پروتئین p24 می توانند از هفته 2 ظاهر شوند ، محتوای آنها طی 2-4 هفته افزایش می یابد و به یک سطح مشخص می رسد ، که در آن برای ماهها (IgM) و سالها (IgG) ادامه می یابد (شکل). 9.7)

وقتی سطح بالایی از آنتی بادی های IgG خاص نسبت به پروتئین های ساختاری HIV p24، gp41، gp120، gp160 در خون محیطی ثبت می شود ، ظهور تغییر شکل کامل خون است ، تشخیص عفونت HIV را بسیار تسهیل می کند. آنتی بادی های HIV در 90-95٪ افراد آلوده در طی 3 ماه پس از عفونت ، در 5-9٪ - در دوره 3 تا 6 ماه از لحظه آلودگی و در 0.5-1٪ - در تاریخ بعد ظاهر می شوند.

با وجود این واقعیت که آنتی بادی های HIV آخرین بار ظاهر می شوند ، شاخص اصلی تشخیصی آزمایشگاهی تاکنون تشخیص آنتی بادی های خاص توسط ELISA و لکه های ایمنی است.

داده های ارائه شده در جدول 9.2 [نمایش] و 9.3 [نمایش] ، به وضوح نشان می دهد که حساسیت بالای سنجش های جاذب ایمنی متصل به آنزیم مدرن در تعیین آنتی بادی های HIV ، که بیش از حساسیت لکه های ایمنی است. در برخی موارد ، با دریافت نتیجه مثبت اولیه در ELISA ، می توان آن را در لکه های ایمنی تنها پس از 2-3 هفته تأیید کرد.

هنگام معاینه بیماران آلوده به اچ آی وی (آلوده به اچ آی وی) با استفاده از سیستم های آزمایش ایمونوبلاتینگ از شرکت های پیشرو در جهان ، آنتی بادی های gp160 و p24 / 25 در همه موارد شناسایی می شود ، آنتی بادی های سایر پروتئین ها در 38.8-93.3٪ موارد تشخیص داده می شوند (جدول) 9.4 [نمایش] ).

مشکلات در شناسایی آنتی بادی در بیماران مبتلا به عفونت HIV می تواند در دوره های ویرمی گسترده و آنتی ژنمی ایجاد شود ، زمانی که آنتی بادی های خاص موجود در خون با ذرات ویروسی مرتبط هستند و روند تولید مثل از تولید آنتی بادی های جدید ضد ویروسی جلوتر می رود. این وضعیت می تواند در طی روند عفونی ایجاد و از بین برود.

در بیماران مبتلا به سیستم ایمنی ضعیف در ابتدا ، ویرمی و آنتی ژنی زودتر ظاهر می شود و تا زمان نتیجه بیماری در سطح بالایی باقی می ماند. در چنین بیمارانی ، به دو دلیل مقدار کم آنتی بادی رایگان برای HIV مشاهده می شود - تولید ناکافی آنتی بادی توسط لنفوسیت های B و اتصال آنتی بادی توسط ویروس ها و پروتئین های محلول HIV ، بنابراین ، برای تعیین عفونت ، سیستم های آزمایش با حساسیت بیشتر یا اصلاح روش های تجزیه و تحلیل که برای مرحله آزاد سازی آنتی بادی فراهم می شود ، مورد نیاز است. از مجتمع های ایمنی بدن.

غالباً ، به دلیل این دلایل ، کاهش محتوای آنتی بادی های HIV در مرحله انتهایی اتفاق می افتد ، زمانی که ممکن است آنتی بادی های HIV در سرم استفاده نشود و از روش های سنجش ایمنی جاذب مرتبط با آنزیم یا روش لکه ایمنی (وسترن بلات) استفاده نکنید. علاوه بر ظاهر شدن آنتی بادی های اختصاصی برای اچ آی وی ، پاسخ ایمنی در 4 ماه اول با کاهش محتوای سلولهای CD4 + آلوده در خون و افزایش سلولهای CD8 مشخص می شود. بعلاوه ، محتوای سلولهای حامل گیرنده های CD4 و CD8 تثبیت شده و برای مدتی بدون تغییر باقی می ماند. افزایش محتوای لنفوسیت های CD8 یک واکنش محافظتی است ، زیرا سمیت سلولی وابسته به سلول توسط لنفوسیت های CD8 + ، که برای از بین بردن سلول های آلوده به HPV انجام می شود ، تحقق می یابد. در ابتدا ، لنفوسیت های سیتوتوکسیک (CTL) به پروتئین تنظیمی Nef ویروس واکنش نشان می دهند ، که نقش مهمی در کاهش بار ویروسی (RNA) در پلاسمای فرد آلوده به HIV در ماه های اول دارد. سپس پاسخی از CTL به دیگران تشکیل می شود ، از جمله. پروتئین های ساختاری ، اچ آی وی ، در نتیجه آن ، 12 ماه پس از عفونت ، اثر سمیت سمی به طور قابل توجهی افزایش می یابد.

طرح هایی برای تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV

با در نظر گرفتن پویایی مشخص شده از مارکرهای خاص عفونت HIV در عمل ، توصیه می شود که در بزرگسالان به طرح های تشخیصی آزمایشگاهی زیر توجه کنید (شکل 9.8-9-10).

نمودارها سه مرحله اصلی تشخیص آزمایشگاهی اولیه عفونت HIV را منعکس می کنند:

1. غربالگری.
2. ارجاع.
3. کارشناس.

نیاز به چندین مرحله تشخیص آزمایشگاهی در درجه اول به دلیل ملاحظات اقتصادی است. بنابراین ، به عنوان مثال ، هزینه انجام یک مطالعه تخصصی با کمک سیستم های آزمایش داخلی با استفاده از روش لکه ایمنی تا 40 دلار ، غربالگری (با استفاده از روش ELISA) - حدود 0.2 ، یعنی نسبت 1: 200 است.

در مرحله اول (شکل 9.8) ، افراد با استفاده از یک روش ایمونجاذب متصل به آنزیم که برای شناسایی آنتی بادی های هر دو نوع ویروس - HIV-1 و HIV-2 طراحی شده است ، از نظر آنتی بادی در برابر HIV آزمایش می شوند.

لیزات ویروسی ، پروتئین های نوترکیب و پپتیدهای مصنوعی توسط تولید کنندگان در سیستم های آزمایشی پیشنهادی به عنوان پایه آنتی ژنیک استفاده می شود. هر یک از حامل های ذکر شده در تعیین کننده های آنتی ژنی HIV مزایا و معایب خاص خود را دارد. بنابراین ، هنگام انتخاب کیت های تست با هزینه تقریباً برابر ، کیت هایی با بیشترین حساسیت (ترجیحاً 100٪) باید ترجیح داده شوند. در میان سیستم های آزمون با همان هزینه و حساسیت ، توصیه می شود که روی کسانی که حداکثر ویژگی را دارند ، بپردازید.

بر اساس ویروس لیزات ، اولین سیستم های آزمایش برای تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV ایجاد شد. در دهه 1980 ، چنین سیستم های آزمایشی با حساسیت کمتر از 100٪ و ویژگی کم مشخص می شوند ، که توسط تعداد زیادی (تا 60٪) نتایج مثبت کاذب آشکار می شود.

در طی تشکیل ویریون در یک فرهنگ لنفوسیت ، غشا its آن از غشا outer خارجی ایجاد می شود و بنابراین حاوی آنتی ژن های مجموعه اصلی سازگاری بافتی کلاس I و II است. این شرایط باعث واکنش های مثبت کاذب می شود در صورت وجود آنتی بادی های آلوآنتی ژن های سازگاری بافتی در خون بیماران.

بعداً ، برای بدست آوردن ویروس ، پیشنهاد شد كه از فرهنگ ماكروفاژها استفاده شود ، كه در آن ذرات ویروسی عمدتاً درون سلول از طریق جوانه زدن نه از غشای سلول خارجی ، بلكه از غشای مشبك آندوپلاسمی ایجاد می شوند. این فناوری تعداد مثبت کاذب را کاهش داده است.

از نظر مهمترین ویژگیها - حساسیت و ویژگی - یکی از بهترینها سنجشهای ایمنی جاذب مرتبط با آنزیم است که از ترکیبی از لیزات ویروسی خالص با پپتیدهای مصنوعی استفاده می کند ، که از نظر آنتی ژنی مهمترین بخشهای پروتئینهای ویروس یا پروتئینهای نوترکیب هستند.

حساسیت سیستم تست به مشخصات سایر اجزای کیت ها نیز بستگی دارد. بنابراین ، سیستم های آزمایشی که در آن مزدوج ها استفاده می شود و آنتی بادی هایی نه تنها از کلاس IgG ، بلکه IgM و IgA را نیز تشخیص می دهد ، امکان شناسایی مرحله اولیه انتقال از شیر را فراهم می کند. استفاده از سیستم های آزمایش امیدوارکننده به نظر می رسد ، با کمک آن می توان همزمان آنتی بادی های ضد ویروسی و آنتی ژن p24 را تعیین کرد ، که تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV را حتی زودتر انجام می دهد.

نتیجه مثبت اولیه باید با بررسی مجدد نمونه در همان سیستم آزمون ، اما ترجیحاً در یک دسته دیگر و توسط دستیار آزمایشگاه دیگر ، دوباره بررسی شود. اگر در طی مطالعه دوم نتیجه منفی حاصل شود ، مطالعه برای بار سوم انجام می شود.

پس از تأیید نتیجه مثبت ، توصیه می شود خون مجدداً گرفته و از نظر اولیه آنتی بادی های HIV آزمایش شود. نمونه گیری مکرر خون از خطای ناشی از برچسب زدن نادرست لوله ها و پر کردن فرم های ارجاع جلوگیری می کند.

سرم مثبت در مرحله غربالگری برای مطالعات مرجعی که با استفاده از دو یا سه سیستم آزمایش ELISA بسیار خاص انجام می شود ، ارسال می شود. در صورت داشتن دو نتیجه مثبت ، یک مطالعه تخصصی با استفاده از روش لکه گذاری ایمنی انجام می شود.

استفاده از سنجش های جاذب ایمنی مرتبط با آنزیم ، که می تواند برای تمایز آنتی بادی های خاص به HIV-1 و HIV-2 مورد استفاده قرار گیرد ، کارهای بعدی را تسهیل می کند و به شما امکان می دهد بلافاصله با استفاده از لکه های ایمنی مناسب (HIV-1 یا HIV-2) یک نمونه مثبت را مطالعه کنید ...

یک نظر متخصص آزمایشگاهی در مورد عفونت HIV تنها بر اساس نتیجه مثبت وسترن بلات انجام می شود. هنگام انجام تشخیص های تخصصی ، استفاده از نام ژن ها و محصولات ژنی HIV پیشنهاد شده در سال 1990 توسط گروهی از متخصصان WHO ضروری است (جدول 9.5 [نمایش] ).

با استفاده از نتایج مطالعات سرم های کنترل (مثبت و منفی) ، که به طور موازی با مطالعه نمونه های آزمایشی انجام می شود و یک نمونه از ایمونوبلوت با تعیین پروتئین های HIV (توسط سازنده به سیستم آزمایش پیوست شده است) ، ویژگی نوارهای موجود در ایمونوبلات باید بسیار دقیق و دقیق ارزیابی شود. تفسیر نتایج به دست آمده باید مطابق با دستورالعمل های پیوست شده به سیستم آزمون انجام شود. به عنوان یک قاعده ، ملاک مثبت بودن وجود آنتی بادی اجباری به دو پروتئین (پیش ساز ، خارجی یا غشایی) رمزگذاری شده توسط ژن env و وجود احتمالی وجود آنتی بادی برای محصولات دو ژن ساختاری دیگر HIV - gag و pol است (جدول 9.6 [نمایش] ).

در صورت به دست آوردن یک نتیجه مشکوک ، استفاده از لیست توصیه ها برای روشن کردن نهایی نتایج لکه های ایمنی ضروری است (جدول 9.7 [نمایش] ).

با توجه به توصیه های مرکز علمی و روش شناختی روسیه برای پیشگیری و کنترل ایدز ، در صورت وجود آنتی بادی حداقل در یکی از پروتئین های gp41، gp120، gp160 در ترکیب با آنتی بادی های سایر پروتئین های خاص HIV-1 یا بدون آنها ، نتیجه مثبت در نظر گرفته می شود. این توصیه ها بر اساس تجربه سرم کودکان از کانون بیمارستانی است که در آنتی بادی ها اغلب فقط به یکی از پروتئین های پاکت ویروس تعیین می شود.

اکثر بیمارانی که در ابتدا با ELISA مثبت ارزیابی شدند به مرحله لنفادنوپاتی تعمیم یافته مداوم (PGL) یا به مرحله بدون علامت تعلق دارند. بنابراین ، به عنوان یک قاعده ایمنی ، یک نوار نیتروسلولزی که پروتئین های HIV بر روی آن بی حرکت هستند ، ترکیب زیر آنتی بادی های HIV-1 تعیین می شود: آنتی بادی های پروتئین های پاکت gp160 ، gp120 و gp41 ، رمزگذاری شده توسط ژن env ، در ترکیب با آنتی بادی های پروتئین های اصلی p24 (پروتئین) nucleocapsid ، رمزگذاری شده توسط ژن gag) و p31 / 34 (اندونوکلئاز رمزگذاری شده توسط ژن pol).

واکنشهای مثبت فقط با پروتئینهای gag و / یا po می توانند در مرحله اولیه تغییر سروکال رخ دهند و همچنین نشانگر عفونت HIV-2 یا یک پاسخ غیر اختصاصی است.

در صورت بدست آوردن نتیجه ای مشکوک ، می توان از روشهای مختلف روش شناسی برای روشن شدن واقعیت عفونت HIV استفاده کرد.

با توجه به توانایی های فنی (در دسترس بودن کیت های تشخیصی و معرف ها ، تجهیزات با تجهیزات ویژه و آموزش پرسنل) ، آزمایشگاه خبره مطالعات تشخیصی اضافی را انجام می دهد (شکل 9.10).

در بعضی موارد ، توصیه می شود از روشهای ژنتیکی مولکولی برای تعیین توالی ژنتیکی HIV در سرم ، لنفوسیتهای خون یا سوراخهای غدد لنفاوی استفاده کنید. تأیید ویژگی توالی DNA به دست آمده در نتیجه PCR می تواند با روش ترکیبی شدن اسیدهای نوکلئیک با پروب های اختصاصی DNA انجام شود.

رسوب ایمنی (RIP) و روش ایمونوفلورسانس غیرمستقیم (IFL) نیز می توانند برای تأیید نهایی سرمها با نتایج مشکوک در لکه های ایمنی استفاده شوند.

تشخیص RNA HIV در پلاسمای خون با روش کیفی یا کمی برای تشخیص عفونت HIV قابل توجه نیست. این نتیجه باید با روش های استاندارد ، مانند لکه های ایمنی ، 2-4 ماه پس از دریافت پاسخ س questionال یا منفی اولیه تأیید شود.

جداسازی HIV در فرهنگ سلولی حقیقت نهایی است. با این حال ، این روش پیچیده ، گران است و فقط در آزمایشگاه های تحقیقاتی مجهز انجام می شود.

محتوای سلولهای CD4 + - در خون یک شاخص غیر اختصاصی است ، با این حال ، در موارد بحث برانگیز (ELISA "+" ، ایمونوبلوت "-" ، وجود علائم بالینی HIV / AIDS) ، می توان از آن به عنوان راهنمای تصمیم گیری متخصص استفاده کرد. اگر فقط در آزمایشگاه امکان انجام لکه بینی وجود دارد ، باید به توصیه های مندرج در جدول پایبند باشید. 9.7 و شکل 9.9

افرادی که معاینه تخصصی سرم آنها به نتایج مشکوک (نامشخص) منجر شد ، به استثنای موارد تشخیص آنتی بادی فقط به p17 (HIV-1) یا p16 (HIV-2) ، باید در طی 6 ماه (پس از 3 ماه) آزمایش مجدد شود. در مورد عفونت HIV واقعی ، پس از 3-6 ماه ، یک روند "مثبت" در طیف آنتی بادی مشاهده می شود - تشکیل اضافی آنتی بادی ها به پروتئین های دیگر ویروس. واکنش کاذب با تداوم یک الگوی شکایت ایمنی مشکوک به مدت طولانی یا از بین رفتن نوارهای مشکوک مشخص می شود. اگر بعد از دوره مشخص نتایج مكرر ایمونوبلوت منفی باشد یا مشكوك باقی بماند ، در صورت عدم وجود عوامل خطر ، علائم بالینی یا سایر عوامل مرتبط با عفونت HIV ، می توان فرد را برای آنتی بادی های HIV-1 و HIV-2 منفی قلمداد كرد.

نتایج مثبت کاذب به دلیل محتوای آنتی بادی در خون بیماران ، آنتی بادی های آلوآنتی ژن های سازگاری بافتی ، که بخشی از پاکت HIV هستند ، روی ایمونوبلات به صورت باند در سطح gp41 و gp31 ظاهر می شود. دلایل واکنشهای غیر اختصاصی دیگر (به عنوان مثال ، به p24 ، که اغلب در افراد مبتلا به فرایندهای خود ایمنی یافت می شود) هنوز روشن نشده است.

بهبود فناوری تولید سنجش های جاذب ایمنی متصل به آنزیم امکان دستیابی به حساسیت بالا - حداکثر 99.99٪ - را فراهم کرد ، در حالی که حساسیت روش لکه سازی ایمنی 97٪ است. بنابراین ، یک نتیجه منفی در لکه بینی با نتایج مثبت در ELISA ممکن است نشان دهنده دوره اولیه تغییر سروک باشد که با سطح پایین آنتی بادی های خاص مشخص می شود. بنابراین ، برای دستیابی به غلظت آنتی بادی های خاص در خون که برای تشخیص با لکه ایمنی کافی است ، لازم است که مطالعه پس از 1.5-2 ماه ، یعنی مدت زمان لازم برای تکمیل تغییر سروک ، تکرار شود.

یک نتیجه مثبت (نتایج) یک مطالعه در مرحله مرجع یا فقط غربالگری تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV ، یعنی نتیجه مثبت در هر روش سنجش ایمنی جاذب مرتبط با آنزیم ، که در نهایت با روش های تخصصی تأیید نشده است ، به عنوان وجود آنتی بادی های واکنش متقابل در خون تفسیر می شود. واکنش متقاطع به اتصال مکانهای غیر اختصاصی توسط آنتی بادی ها به پروتئین های اچ آی وی یا پپتیدها گفته می شود که به عنوان پایه آنتی ژنیک در یک سیستم آزمایشی استفاده می شود که در آن نتیجه مثبتی بدست می آید.

در صورت عدم نقص ایمنی و علائم بالینی عفونت اچ آی وی ، این افراد برای آنتی بادی های اچ آی وی منفی محسوب می شوند و باید از لیست ثبت شوند.

تشخيص نهايي عفونت HIV تنها بر اساس تمام داده هاي باليني ، اپيدميولوژي و آزمايشگاهي تعيين مي شود. فقط پزشک معالج حق دارد درمورد تشخیص عفونت HIV به بیمار اطلاع دهد.

روش اصلی تشخیص آزمایشگاهی تأییدی (خبره) عفونت HIV لکه بینی است. با این حال ، با توجه به حساسیت پایین تر آن در مقایسه با ELISA ، تعدادی از محققان پیشنهاد کردند که از ترکیب چندین سیستم آزمایش برای تعیین نهایی وجود آنتی بادی های خاص برای HIV استفاده شود. به عنوان مثال ، G. van der Groen و همکاران. برای بررسی نتایج مثبت مرحله غربالگری تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV ، جایگزینی برای روش ایمونوبلوت پیشنهاد شده است. این شامل مطالعه مواد به طور موازی در سه سیستم آزمایش است ، که بر اساس روش های مختلف تشخیص آنتی بادی های خاص HIV (چندین نوع روش ELISA ، آزمون آگلوتیناسیون) با استفاده از آنتی ژن های مختلف است. نویسندگان موفق به یافتن چنین ترکیبی از سیستم های آزمایشی شدند ، استفاده از آنها در مقایسه با نتایج بدست آمده در لکه های ایمنی ، 100٪ حساسیت و ویژگی را فراهم می کند.

ارزان بودن این روش تشخیص تخصصی یک مزیت بدون شک است ، با این حال ، کمبود اطلاعات در مورد اینکه پروتئین های خاص ویروس در خون بیمار آنتی بادی دارند ، ارزیابی ویژگی واکنش را در هر مورد خاص و همچنین پیگیری تغییرات در طیف آنتی بادی ها در مرحله اولیه انتقال مجدد را امکان پذیر نمی کند.

تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV در کودکانی که از مادران آلوده به HIV متولد می شوند ، ویژگی های خاص خود را دارد. از لحظه تولد برای مدت زمان طولانی (تا 15 ماه) ، آنتی بادی های مادر در برابر HIV می توانند در خون چنین کودکانی گردش کنند. فقط ایمونوگلوبولین های کلاس IgG به سد جفت نفوذ می کنند ، بنابراین ، تشخیص nmmupoglobulins خاص HPV از کلاس های IgM و IgA در کودک تایید عفونت را فراهم می کند ، اما یک نتیجه منفی نمی تواند عدم وجود HIV را نشان دهد.

کودکان زیر 1 ماه هنوز تکثیر HPV ندارند و تنها روش تأیید PCR است. تعیین آنتی ژن p24 در کودکان بالای 1 ماه نیز یک روش تأییدی است.

عدم وجود آنتی بادی برای HIV در نوزادان به معنای نفوذ ویروس به سد جفت نیست. در هر صورت ، کودکان مادران آلوده به HIV طی 36 ماه از بدو تولد تحت آزمایش و بررسی تشخیصی آزمایشگاهی قرار می گیرند.

نتایج آزمایشات آزمایشگاهی برای نشانگرهای عفونت HIV نیاز به تفسیر دقیق دارد و باید فقط همراه با داده های معاینات اپیدمیولوژیک و بالینی در نظر گرفته شود. از طرف دیگر ، باید توجه داشت که علیرغم حساسیت بالای روشهای مدرن ، نتایج تحقیقات منفی نمی توانند وجود عفونت HIV را کاملاً کنار بگذارند. بنابراین ، یک نتیجه آزمایش منفی ، به عنوان مثال ، با استفاده از لکه ایمنی ، فقط به عنوان عدم وجود آنتی بادی های خاص برای HIV-1 و HIV-2 می تواند فرموله شود.

تشخیص عفونت HIV در بیماران سرم منفی

کیفیت سیستم های آزمایشی مورد استفاده در تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV هر ساله در حال بهبود است ، حساسیت آنها در حال افزایش است. با این حال ، تنوع بالای HIV می تواند منجر به ظهور انواع جدیدی شود ، آنتی بادی هایی که ممکن است توسط سیستم های آزمایش موجود شناخته نشوند. علاوه بر این موارد شناخته شده ای از پاسخ غیرمعمول هومورال سیستم ایمنی بدن میزبان به ویروس وجود دارد. بنابراین ، L. Montagnier در سال 1996 در مورد دو بیمار ایدز گزارش کرد که چندین سال آنتی بادی خاصی در خون آنها مشاهده نشده بود ، تشخیص بر اساس داده های بالینی انجام شد و آزمایشگاه فقط با جداسازی HPV-1 در کشت سلول تایید شد. در چنین مواردی ، استفاده از توصیه های WHO ضروری است ، که طبق آن تشخیص بالینی عفونت HIV در بزرگسالان و کودکان در حضور یکی از 12 بیماری نشان دهنده ایدز امکان پذیر است:

1. کاندیدیازیس مری ، نای ، برونش ، ریه ها ؛
2. کریپتوکوکوز خارج ریوی ؛
3. کریپتوسپوریدیوز همراه با اسهال بیش از یک ماه.
4. ضایعه سیتومگالوویروس هر ارگان (به جز و علاوه بر آن در کبد ، طحال و غدد لنفاوی در بیمار بزرگتر از 1 ماه):
5. عفونت ناشی از ویروس هرپس سیمپلکس که در بیمار بزرگتر از 1 ماه بیش از 1 ماه ادامه داشته باشد.
6. لنفوم مغز در بیمار کمتر از 60 سال
7. پنومونی بینابینی لنفوسیتی در کودک زیر 13 سال.
8. عفونت حذف شده ناشی از باکتریهای گروه Micobacterium avium intracellulare یا M. Kansassii.
9. پنوموسیستیس پنومونی ؛
10. لکوآنسفالوپاتی چند کانونی پیشرفته؛
11. توکسوپلاسموز سیستم عصبی مرکزی در بیماران بالای 1 ماه.

وجود یکی از این بیماری ها امکان تشخیص عفونت اچ آی وی را در صورت عدم وجود آزمایش خون آزمایشگاهی برای حضور آنتی بادی های اچ آی وی یا حتی در صورت به دست آوردن نتیجه اثر منفی فراهم می کند.

منبع: تشخیص آزمایشگاه پزشکی ، برنامه ها و الگوریتم ها. اد پروفسور Karpishchenko A.I. ، سن پترزبورگ ، اینترمدیکا ، 2001

فقط آزمایشات ویژه می توانند ایدز را نشان دهند. فرآیند آزمایش خود شامل شناسایی آنتی بادی هایی است که توسط بدن در پاسخ به ظاهر ویروس تولید می شود. روش های آزمایشگاهی برای تشخیص ایدز شامل چهار تست است که برای تشخیص بیماری استفاده می شود.

اولین - ELISA (روش جذب کننده سیستم ایمنی مرتبط با آنزیم) رایج ترین روش تشخیصی است. این تجزیه و تحلیل می تواند میزان آنتی بادی های تجمع یافته در بدن را تعیین کند. این امر معمولاً تنها در صورتی امکان پذیر است که ویروس وارد جریان خون شده و سه ماه از آن لحظه گذشته باشد. همانطور که عمل نشان می دهد ، یک درصد از نتایج منفی کاذب یا مثبت مثبت کاذب می دهد.

اگر هنوز آنتی بادی به ویروس نرسیده باشد ، یا اگر ایدز در مرحله نهایی باشد ، یعنی ویروس در خون وجود داشته باشد ، یک نتیجه منفی کاذب امکان پذیر است. برای تأیید نتیجه منفی ، می توانید ELISA را دوباره تصویب کنید ، اما فقط پس از 3 ماه.

در بیشتر موارد ، با بررسی بیمارانی که از بیماریهای خودایمنی مزمن ، عفونی ، انکولوژیک و غیره رنج می برند ، نتیجه مثبت کاذب داده می شود. یک نتیجه مثبت کاذب نیز می تواند در زنان باردار مشاهده شود. بنابراین ، هر نتیجه مثبت لزوماً دوباره بررسی می شود ، اما فقط در ایمونوبلوت - این یک تست حساس تر است.

اگر نتیجه ایمونوبلوت مثبت باشد ، به ویژه پس از نتیجه ELISA ، قابلیت اطمینان 99.9٪ است و این حداکثر دقت برای آزمایش پزشکی است (علاوه بر این ، هر آزمایش).

مورد دوم ایمونوبلوت (لکه گیری ایمنی کامل) است. این آزمایش وجود آنتی بادی های خاص برای HIV را تشخیص می دهد. در این حالت ، نتیجه منفی ، مثبت ، مشکوک است (نامشخص نیز نامیده می شود).

یک نتیجه مشکوک ممکن است نشان دهنده وجود HIV در جریان خون باشد که بدن هنوز طیف وسیعی از آنتی بادی ها را ایجاد نکرده است. در این حالت ، آنتی بادی های HIV در سرم در 6-1-3 ماه ظاهر می شوند. یکی پس از دیگری ، از لحظه دریافت اولین نتیجه سوال برانگیز. اگر نتایج تأیید شود ، این نشان دهنده عفونت HIV در مرحله اولیه است.

نتیجه نامشخص این آزمون ممکن است خلاف این را نشان دهد. خود عفونت HIV وجود ندارد ، اما بدن انسان دارای آنتی بادی هایی مشابه آنتی بادی برای HIV است. به عنوان یک قاعده ، یک نتیجه مشکوک در زنان باردار ، در بیماران مبتلا به سل ، دریافت کنندگان ، بیماران سرطانی و همچنین در کسانی که چندین تزریق خون (به عنوان مثال انتقال خون) انجام داده اند ، رخ می دهد. بیماری که نتیجه این آزمایش عدم قطعیت را نشان می دهد توسط پزشک بیماری عفونی به مدت شش ماه کنترل می شود و در طی 1-3-6 ماه آزمایش می شود.

سوم PCR (واکنش زنجیره ای پلیمراز) است. این تشخیص ایدز به شما امکان می دهد DNA و RNA ویروس را تعیین کنید. این یک واکنش نسبتاً حساس و م thatثر است که به شما امکان می دهد DNA را برای گرفتن نتیجه مطالعه کنید. در این حالت DNA از یک سلول گرفته می شود و با ضرب توالی های مشخص DNA بررسی می شود

این آزمون اعمال می شود:

• برای تعیین اینکه کدام ویروس در بدن وجود دارد (HIV 1 و HIV-2 وجود دارد) ؛
• برای تعیین وجود یا عدم وجود HIV ؛
• برای تعیین و کنترل بار ویروسی ؛
• برای تعیین وضعیت HIV یک نوزاد تازه متولد شده از مادر آلوده به HIV.

این آزمایش حساسیت بالایی دارد: حتی اگر حدود ده روز از لحظه احتمالی آلودگی گذشته باشد ، می تواند ویروس را تشخیص دهد. چنین حساسیت بالای آزمایش به سایر عفونت ها واکنش نشان می دهد ، بنابراین ، اغلب نتایج مثبت کاذب می دهد. نتایج این آزمایش پایه ای برای تشخیص قطعی نیست.

این آزمون به پرسنل پزشکی بسیار واجد شرایط و تجهیزات آزمایشگاهی پیشرفته نیاز دارد. این یک آزمایش گران قیمت است و بنابراین در آزمایش رایگان HIV استفاده نمی شود.

چهارم آزمون اکسپرس است. این آزمایش عمدتا در موارد اضطراری - هنگام زایمان ، به دلایل سلامتی در حین جراحی ، مورد استفاده قرار می گیرد. نتایج آزمایش سریع معمولاً با آزمایش معمول HIV تأیید می شود.

/ 16
بدترین بهترین

آزمایش عفونت HIV منوط به موارد زیر است:

2. افرادی که تشخیص مشکوک یا تأیید شده دارند: عفونت باکتریایی در کودکان زیر 13 سال ، چندگانه و مکرر. کاندیدیازیس مری ، نای ، برونش یا ریه ها ؛ سرطان مهاجم دهانه رحم ؛ کوکسیدیوئیدومایکوزیس منتشر یا خارج ریوی ؛ کریپتوکوکوز خارج ریوی ؛ کریپتوسپوریدیوز همراه با اسهال به مدت 1 ماه یا بیشتر ؛ ضایعات سیتومگالوویروس سایر اندامها ، به جز کبد ، طحال ، غدد لنفاوی در بیماران بالاتر از 1 ماه ؛ رتینیت سیتومگالوویروس با از دست دادن بینایی ؛ عفونت هرپسی باعث ایجاد زخم های چند کانونی می شود که ظرف 1 ماه بهبود نمی یابند ، یا برونشیت ، ذات الریه ، ازوفاژیت. هیستوپلاسموز منتشر یا خارج ریوی. ایزوپوروز همراه با اسهال بیش از 1 ماه. سل گسترده یا خارج ریوی ؛ سل ریوی در بزرگسالان یا نوجوانان بالای 13 سال ؛ سل خارج ریوی ؛ بیماری دیگر ناشی از مایکوباکتریوم غیر از M. tuberculosis منتشر یا خارج ریوی. ذات الریه ناشی از پنوموسیست ؛ لکوآنسفالوپاتی چند کانونی پیشرفته؛ سالمونلا (به جز سالمونلا تیفی) سپتی سمی ، عود کننده موزاییک توکسوئیلاز مغز در کودکان بالای 1 ماه. سارکوم های کاپوسی ؛ پنومونی بینابینی لنفاوی در کودکان زیر 13 سال. لنفوم های بورکیت ؛ لنفوم ایمونوبلاستیک لنفوم مغزی اولیه سندرم اتلاف ، هپاتیت B ، حمل HBsAg ؛ مونونوکلئوز عفونی ؛ بیماری تبخال مکرر در افراد بالای 60 سال ؛ بیماری های منتقله از راه جنسی.

آزمایشگاه بسیار تخصصی انجام می شود:

الف) تعیین آنتی بادی ها ، آنتی ژن ها و مجتمع های ایمنی خون در گردش خون. پرورش ویروس ، شناسایی مواد ژنومی و آنزیم های آن.

ب) ارزیابی عملکرد پیوند سلولی سیستم ایمنی بدن. نقش اصلی متعلق به روش های تشخیص سرولوژیک است که با هدف تعیین آنتی بادی ها و همچنین آنتی ژن های پاتوژن در خون و سایر مایعات بیولوژیکی بدن انجام می شود.

آزمایش آنتی بادی HIV برای موارد زیر انجام می شود:

الف) ایمنی انتقال خون و پیوند ؛

ب) نظارت ، آزمایش به منظور نظارت بر شیوع عفونت HIV و مطالعه پویایی شیوع آن در یک جمعیت خاص ؛

ج) تشخیص عفونت HIV ، یعنی آزمایش داوطلبانه سرم خون افراد سالم یا بیمارانی که دارای علائم و نشانه های مختلف بالینی مشابه عفونت HIV یا ایدز هستند.

سیستم تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV بر اساس یک اصل سه مرحله ای ساخته شده است. اولین مرحله غربالگری است که برای انجام آزمایشات اولیه خون برای وجود آنتی بادی های پروتئین های HIV طراحی شده است. مرحله دوم مرحله مرجع است - این امکان را می دهد تا با استفاده از تکنیک های روش شناسی خاص نتیجه مثبت اولیه به دست آمده در مرحله غربالگری (تأیید) را تأیید کنید. سومین متخصص اتان برای بررسی نهایی وجود و ویژگی مارکرهای عفونت HIV است که در مراحل قبلی تشخیص آزمایشگاهی مشخص شده است. نیاز به چندین مرحله تشخیص آزمایشگاهی در درجه اول به دلیل ملاحظات اقتصادی است.

در عمل ، چندین آزمایش استفاده می شود که شناسایی آلوده به HIV با درجه اطمینان کافی را امکان پذیر می کند:

تشخیص ELISA (ELISA) با آزمایش (روش جذب کننده سیستم ایمنی مرتبط با آنزیم) از سطح اول ، با حساسیت بالا مشخص می شود ، اگرچه کمتر از موارد زیر خاص است.

Immune blot (وسترن بلات) ، یک آزمایش بسیار خاص و پرکاربرد برای تمایز بین HIV-1 و HIV-2.

تست آنتی ژنی P25 ، موثر در مراحل اولیه عفونت ؛

واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR).

در موارد غربالگری انبوه نمونه های خون ، توصیه می شود از گروهی از افراد ، مخلوط سرم ها آزمایش شود ، به گونه ای كه رقت نهایی هر نمونه بیش از 1: 100 نباشد. اگر مخلوط جریان سرم مثبت باشد ، هر سرم مخلوط مثبت آزمایش می شود. این روش منجر به از دست دادن حساسیت هم در ELISA و هم در ایمونوبلوت نمی شود ، اما هزینه های کارگری و هزینه معاینه اولیه را 60-80٪ کاهش می دهد.

در تشخیص سریع عفونت HIV ، آنتی بادی های کل با استفاده از تست های غربالگری غربالگری - ELISA و واکنش های آگلوتیناسیون تعیین می شوند. در مرحله دوم (داوری) ، یک آزمایش پیچیده تر استفاده می شود - یک لکه ایمنی ، که نه تنها تأیید یا رد نتیجه گیری اولیه را فراهم می کند ، بلکه همچنین می تواند این کار را در سطح تعیین آنتی بادی های پروتئین های ویروس جداگانه انجام دهد.

سنجش پیوند دهنده ایمنی (ELISA) اصلی ترین و پرکاربردترین روش برای تعیین آنتی بادی های HIV است. اما از معایب استفاده از ELISA در تشخیص عفونت HIV می توان به نتایج مثبت کاذب مکرر اشاره کرد. در این راستا ، نتیجه در ELISA پایه ای برای نتیجه گیری در مورد مثبت بودن HIV در مورد موضوع نیست. این به دلیل تصفیه ناکافی جاذب سیستم ایمنی از پروتئین های بالاست است. اتصال خود به خودی آنتی بادی های سرم به پلاستیک ، اگر مناطق آن توسط جاذب ایمنی اشغال نشود ، به اندازه کافی مسدود نشده یا توسط یک پروتئین خنثی کاملاً خاص مسدود نشده است. تعامل متقابل با پروتئین های HIV از جاذب سیستم ایمنی پروتئین های مختلف موجود در خون در افراد مبتلا به برخی از فرآیندهای پاتولوژیک خاص ، خودایمنی مانند مولتیپل اسکلروزیس ، SLE ، سل ؛ با اهدای مکرر ، بیماریهای عفونی و انکولوژیکی ، سوختگی ، بارداری ، انتقال خون مکرر ، پیوند اعضا و بافت و همچنین افرادی که تحت همودیالیز قرار دارند. با وجود فاکتور روماتوئید در خون ، اغلب واکنشهای مثبت کاذب HIV را تحریک می کند. وجود در خون افراد مورد بررسی ، آنتی بادی های پروتئین HIV gag و ، اول از همه ، پروتئین p24 (بدیهی است ، آنتی بادی های موجود برونزا یا برونزا ، هنوز شناسایی نشده است). از آنجا که ضد p24 در مراحل اولیه انتقال سرمی HIV بدون شکست سنتز می شود ، مشاهده ایمونولوژیک بیشتر افراد دارای آنتی بادی نسبت به پروتئین های gag HIV ، و همچنین حذف آنها از اهدا انجام می شود.

حساسیت و ویژگی سنجش ایمنی جاذب مرتبط با آنزیم به طور مداوم در حال افزایش است. در نتیجه ، ELISA نسل چهارم از نظر تشخیصی نسبت به لکه های ایمنی کم نیست و می تواند نه تنها در غربالگری ، بلکه در مرحله تایید تشخیص عفونت HIV نیز مورد استفاده قرار گیرد [Smolskaya T. T.، 1997].

نقص ایمنی روش نهایی تشخیص سرولوژی است که امکان نتیجه گیری نهایی در مورد مثبت بودن HIV یا منفی بودن موضوع را فراهم می کند.

بین نتایج مطالعه سرم در ایمونوبلوت و ELISA ارتباط روشنی وجود دارد - دو بار مثبت در ELISA با سیستم های مختلف آزمایش ، سرم در 97-98 of موارد پس از آن HIV مثبت در لکه بینی است. اگر سرمها در الایزا فقط در یکی از دو سیستم آزمایش مورد استفاده مثبت بودند ، در ایمونوبلوت فقط در 4٪ موارد مثبت هستند. در 5٪ موارد ، هنگام انجام مطالعات تأییدی بر روی افرادی که دارای داده های مثبت هستند ، ELISA-immunoblot می تواند نتایج "نامشخص" بدهد ، و در میان آنها ، در حدود 20٪ موارد ، نتایج "نامشخص" باعث ایجاد آنتی بادی در برابر پروتئین های HIV-1 gag می شود (p55 ، p25 ، p18) ) وجود آنتی بادی فقط در مورد پروتئین های HIV-1 gag دلیل بررسی بیشتر سرم خون برای عفونت HIV-2 است.

ارزیابی نتایج لکه های ایمنی کاملاً مطابق با دستورالعمل های پیوست شده به سیستم آزمون انجام می شود. در صورت عدم وجود دستورالعمل در مورد تفسیر نتایج در دستورالعمل ها ، باید از معیارهای WHO استفاده شود.

با دریافت نتایج مثبت مطالعات در مرحله مرجع تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV و نتیجه منفی مطالعه با استفاده از روش بلات ایمنی ، 6 ماه پس از اولین معاینه ، یک تشخیص متخصص تکراری اجباری انجام می شود.

اگر نتایج لکه های ایمنی 12 ماه پس از مطالعه اولین نمونه منفی یا نامطمئن باقی بماند ، در صورت عدم وجود عوامل خطر ، علائم بالینی یا سایر عوامل مرتبط با عفونت HIV ، موضوع از مشاهده داروسازی حذف می شود.

در بین روشهای سرولوژی ، در صورت عدم اطمینان نتایج ، از ایمونوبلوت به عنوان تشخیص تخصصی استفاده می شود رسوب ایمنی رادیویی (پاره کردن). این اساس بر اساس استفاده از پروتئین های ویروسی است که با ید رادیواکتیو برچسب گذاری شده اند و رسوبات با استفاده از شمارنده های بتا شناسایی می شوند. از معایب این روش می توان به هزینه بالای تجهیزات ، نیاز به تجهیزات برای این اهداف ، اتاق های ویژه اشاره کرد.

افرادی که مبتلا به عفونت HIV هستند هر 6 ماه یکبار تحت معاینه آزمایشگاهی اجباری مشاهده می شوند

واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) توالی های نوکلئوتیدی از قبل ضرب شده ویژه ژنوم یک پاتوژن مشخص را نشان می دهد. با ضرب جدا شده یک ژن یا قطعه آن ، که تقویت نامیده می شود ، انجام PCR امکان انجام آزمایشگاهی با استفاده از آنزیم DNA پلیمراز مقاوم در برابر حرارت را فراهم می کند. در طی 2-3 ساعت ، PCR به شما امکان می دهد میلیون ها نسخه از یک منطقه خاص از ویروس را دریافت کنید. در عفونت اچ آی وی ، از RNA سلولی ، از جمله RNA ویروس ، اگر در سلول تولید مثل شود یا در ژنوم آن ادغام شود ، مقدار کافی DNA ویروسی برای تجزیه و تحلیل با رونویسی معکوس و هیبریداسیون با "کاوشگرهای" الیگونوکلئوتیدی دارای برچسب بدست می آید ، که تشخیص داده می شود و کمی تعیین می شود ، و همچنین در رابطه با تعلق به ژنوم HIV ، توسط رادیواکتیو یا برچسب دیگر پروب ، ایجاد همسانی DNA و توالی اسیدهای آمینه خاص ویروس. حساسیت PCR ، تشخیص ژن های ویروسی در یک از پنج هزار سلول است.

PCR ، از جمله کمی ، فقط می تواند برای تعیین بار ویروسی در پلاسما برای حل مسئله شروع درمان دارویی برای بیمار یا تغییر داروهای ضد ویروسی مورد استفاده قرار گیرد. PCR را نمی توان برای تشخیص عفونت HIV توصیه کرد ، زیرا حتی مدرن ترین روش های بیان و معرف ها اجازه می دهد بار ویروسی کمتر از یک سطح مشخص - 50 نسخه در میلی لیتر باشد. و پیچیدگی آزمایش PCR و هزینه بالای آن (حدود 200 دلار) استفاده گسترده از آن را به عنوان روش تشخیص آزمایشگاهی روزانه عفونت HIV نفی می کند. بنابراین ، PCR فقط برای ارزیابی بار ویروسی در پلاسما در بیمارانی که تشخیص عفونت HIV از قبل مشخص شده است ، برای حل مسئله درمان بیمار ضروری است.

مراحل تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV به صورت شماتیک در شکل نشان داده شده است. 1

شکل: 1. مراحل تشخیص آزمایشگاهی عفونت HIV

در حین عفونت HIV ، یک دوره "پنجره آزمایشگاهی تاریک" وجود دارد که مقدار آنتی بادی علیه HIV برای حساسیت سیستم های آزمایش کافی نیست. این دوره از یک هفته تا سه ماه از لحظه آلودگی به اچ آی وی بسته به سطح حساسیت سیستم آزمایش بستگی دارد. با توجه به این پدیده ، هنگام بررسی خون اهدا شده از افرادی که در دوره ذکر شده عفونت HIV هستند ، مشکلاتی بوجود می آید. بنابراین ، در اکثر کشورهای جهان ، سیستم استفاده از خون فقط پس از ذخیره سازی آن برای مدت 3-6 ماه جهت انجام آزمایش مجدد اجباری برای عفونت HIV از اهدا کنندگان این دوزهای خون و اجزای آن ، معرفی شده است.

مرحله تظاهرات اولیه با فعالیت فرآیند تکثیر مشخص می شود. ویرمی و آنتی ژنمی در حال ظهور باعث ایجاد آنتی بادی های خاص از کلاس IgM می شود: anti-p24 ، anti-gp41 ، anti-gp120. آنتی ژن p24 در برخی از افراد آلوده از طریق آزمایش ELISA در اوایل 2 هفته پس از آلودگی قابل تشخیص است و تا 8 هفته تعیین می شود. بعلاوه ، در دوره بالینی عفونت HIV ، افزایش دوم محتوای پروتئین p24 در خون مشاهده می شود که در طی شکل گیری مرحله ایدز اتفاق می افتد.

ظهور تبدیل مجدد کامل ، هنگامی که سطح بالایی از آنتی بادی های IgG خاص به پروتئین های ساختاری HIV gp41، p24، gpl20 در خون محیطی ثبت شود ، تشخیص عفونت HIV را تا حد زیادی تسهیل می کند. اکثر کیت های تجاری فقط برای نشان دادن دقیقاً چنین آنتی بادی هایی طراحی شده اند.

مشکلات در شناسایی آنتی بادی در بیماران مبتلا به عفونت HIV می تواند در دوره های ویرمی گسترده و آنتی ژنمی ایجاد شود ، زمانی که آنتی بادی های خاص موجود در خون صرف اتصال ذرات ویروسی می شود و روند تولید مثل از تولید آنتی بادی های جدید ضد ویروسی پیشی می گیرد.

در افراد مبتلا به سیستم ایمنی در ابتدا ضعیف ، ویرمی و آنتی ژنی زودتر ظاهر می شود و تا زمان نتیجه بیماری در سطح بالایی باقی می ماند. در همان زمان ، به دو دلیل ، چنین بیمارانی دارای محتوای کم آنتی بادی رایگان برای HIV هستند - تولید ناکافی آنتی بادی توسط لنفوسیت های B و اتصال ویروس ها و پروتئین های محلول HIV توسط آنتی بادی ها ، بنابراین ، برای تعیین عفونت ، سیستم های آزمایش با حساسیت بیشتر یا اصلاح روش های تجزیه و تحلیل مورد نیاز است. مرحله آزاد سازی آنتی بادی ها از مجتمع های ایمنی بدن.

با وجود نشانگرهای خاص عفونت HIV ، وجود آنتی بادی های کل در برابر پروتئین های HIV بیشترین تشخیص را دارد. اصطلاح "کل" به معنای وجود دو کلاس آنتی بادی (IgG و IgM) و طیف گسترده ای از آنتی بادی ها نسبت به پروتئین های مختلف HIV ، در درجه اول ساختاری است.

تعیین سلولهای CD4. شاخص اصلی بالینی و آزمایشگاهی برای تشخیص مرحله عفونت HIV ، میزان تخریب سیستم ایمنی بدن در بیماران در زندگی روزمره ، تعیین محتوای لنفوسیت های CD4 + بود: کاهش سطح زیر 200 سلول / میلی متر مکعب ، معیار اصلی تشخیص ایدز است. اعتقاد بر این است که همه افراد آلوده به HIV با تعداد لنفوسیت CD4 + 200 سلول در میلی متر مکعب و کمتر به درمان ضد ویروسی و پیشگیری از ذات الریه پنوموسیستیس نیاز دارند. و اگرچه 1/3 از افراد آلوده به HIV با تعداد لنفوسیت های C04 + کمتر از 200 سلول / میلی متر مکعب ، تظاهرات بالینی ندارند ، اما تجربه نشان داده است که در 2 ماه آینده علائم ایجاد می شود ، بنابراین همه آنها به عنوان بیماران مبتلا به ایدز در نظر گرفته می شوند.