Sustavi imunoenimenskog testa "DS-IFA-HBEAG" i "DS-IFA-Anti-HBE. Analiza na sifilisu

Za sveobuhvatnu procjenu stanja tijela primjenjuje se IFA metoda dijagnostike. Imunoferment krvni test je namijenjen dijagnosticiranju infektivne, hematološke, primarne i sekundarne imunodeficijencije.

Što je IFA analiza

Mnogi pacijenti su zainteresirani za IFA metodu: što je to za koje se provodi studija. Imununulalna analiza počela je relativno nedavno koristiti. U početku se proučavaju antigenske strukture s njom, a provedena je samo u znanstvene svrhe. Tada su znanstvenici došli do zaključka da se uz pomoć enzima mogu identificirati specifična antitijela koja nastanu kao odgovor na pojavu bolesti.

U početku, ova tehnika je korištena samo uskim medicinskim ustanovama, uglavnom na transfuzijskim postajama krvi. Od posebne važnosti je ELISA metoda za otkrivanje HIV infekcije.

Do danas ova metoda ima širok opseg primjene. Moderni laboratoriji ga koriste za dijagnosticiranje:

• tumori;
• hormonalni poremećaji;
• infekcije;
• kronični ili prethodno preneseni zarazne procese;
• helmantes.

Ako se infektivni proces nastavlja u tijelu, tada se ova vrsta dijagnoze smatra najpamitima za određivanje vrste bolesti.

Bit metode i njegovih vrsta

IFA metoda je ono što je, što je bit ove vrste studija? Ovo i mnoga druga pitanja su zainteresirana za pacijente. Osnova ove metode dijagnoze je vezanje imunoloških stanica tijela antigenima uzročnih agensa infekcije. Rezultirajući kompleks se određuje pomoću posebnog enzima.

Da biste razumjeli princip ELISA metode, morate znati kako je reakcija antigena antitijela. Antigen je strašan za tijelo molekule proteinskog podrijetla, koja prodire zajedno s infekcijom. Čestice tuđe krvi, nekonzistentne s grupom, također se smatraju antigenima. U tijelu su izazivali imunološki odgovor s ciljem zaštite od stranih tvari. Stoga, ljudsko tijelo proizvodi antitijela - imunoglobulini koji se mogu pridružiti antigenima, formirajući imunološki kompleks. Takvi spojevi su mnogo lakše prepoznati i uništiti stanicama imuniteta.

Reakcija na prisutnost takvih imunoloških kompleksa provodi se u laboratorijskim uvjetima, primjenjujući gotove veze kako bi se utvrdilo da li su u krvi poput njih.

Suština IFA metode je vrlo jednostavna, međutim, zbog činjenice da se krvni test provodi kako bi se identificirali mnoge infekcije i bolesti, postoji nekoliko vrsta njegovih sorti. Svaka se odlikuje shemom provedbe i područja primjene. Može biti ravna ili neizravna ELISA. Izravna metoda uključuje činjenicu da se imobilizirana protutijela reagiraju s antigenima koriste. Glavna prednost ove metode je da se svi procesi mogu automatizirati, a time i dijagnoza traje malo vremena.

Indirektna metoda podrazumijeva da se koriste antitijela sekundarne prirode. I na čvrstoj fazi se imobilizira antigenom. Analiza vam omogućuje da identificirate antitijela različitim antigenima. Pomaže postići točniji rezultat, ali metoda je karakterizirana složenošću.

Prednosti istraživanja

Metoda IFA ima mnoge prednosti u usporedbi s drugim dijagnostičkim metodama. Glavni može pripisati takve:

• visoka osjetljivost;
• stabilnost pri skladištenju sastojaka;
• dijagnostička brzina;
• možete koristiti malu količinu materijala u studiju;
• postoji mogućnost automatizacije svih procesa;
• možete prepoznati infekciju u najranijim fazama.

Ova dijagnostička metoda je univerzalna, stoga je pogodna za provođenje masovnog pregleda. Uz pomoć analize moguće je pratiti dinamiku infektivnog procesa.

Indikacije za analizu i ogradu

Provođenje istraživanja korištenjem IFA metoda može se dodijeliti u sumnji u mnoge bolesti:

Istražuje se venska krv za antitijela. Prije analize, elemenata koji mogu komplicirati studiju se razlikuju od njega. Može postojati ograda i drugih bioloških fluida.

Da biste dobili najtočnije informacije, krvna ograda se provodi na prazan želudac. Ako je postupak imenovan za određivanje skrivene infekcije, onda je nekoliko tjedana prije analize potrebno prestati uzimati antibakterijske i antivirusne lijekove. Ovisno o opremi laboratorija, gdje je uzet materijal, rezultat se može dobiti tijekom dana. U hitnim slučajevima, ovaj put se smanjuje na nekoliko sati.

Analiza na sifilisu

Korištenje IFA metode pomaže u određivanju prisutnosti mnogih infekcija u tijelu, posebno sifilis. Za studiju, krv se uzima iz Beča na prazan želudac. Zatim se provodi studija kako bi se utvrdilo ne samo prisutnost bolesti u tijelu, već i točno vrijeme početka, budući da su tijekom bolesti neka antitijela zamijenjena od strane drugih u strogo definiranom redoslijedu.

Pod akutnom fazom, ukazujući na produženi tijek bolesti ili s pogorbom kronične infekcije u krvi, imunoglobulini tipa m će se otkriti. Prisutnost tipa imunoglobulina ukazuje da infekcija nastanjuje u tijelu od više od 4 tjedni. Imunoglobulini grupe G govore o visini bolesti ili prethodno izvedenoj terapiji.

Prema stupnju boje jažica, procjenjuje se intenzitet infektivnog procesa, jer njegova zasićenja ovisi o broju generičkih imunih kompleksa.

HIV analiza

Metoda IFA primjenjuje se na analizu u ovom slučaju, ima određene značajke koje su povezane s protokom i napredovanjem bolesti. Ova metoda istraživanja smatra se najprihvatljivijom za određivanje, ali je potrebno provesti prije mjesec dana nakon utjecaja čimbenika rizika. To je zbog prisutnosti inkubacijskog razdoblja koje se događa od 45 dana i do 6 mjeseci. Zbog toga se analiza mora ponoviti za šest mjeseci.

• ascaridoza;
• giardiasis;
• toksoplazmoza itd.

Unatoč svim prednostima, postoje i nedostaci metode IFA. Glavni nedostatak je da je tijekom studija liječnik trebao imati predodređenost bolesti.

Ako nije moguće slučajno pronaći patogen i odrediti njegove imunoferment svojstva. Test ukazuje samo na prisutnost antitijela u krvi pacijenta. Osim toga, to je vrlo skupa analiza.

Dešifriranje analiza

Rezultat visokokvalitetne ELISA će biti ili prisutnost antitijela ili njihova odsutnost u krvi. Ako se provede kvantitativna analiza, koncentracija antitijela može se izraziti u digitalnoj vrijednosti ili u određenom broju znakova +.

Osim toga, analiziraju se indikatori kao:

Indikator IgM ukazuje na protok akutnog zaraznog procesa u tijelu. Njegova potpuna odsutnost može govoriti o odsustvu uzročnog sredstva bolesti ili prijelaza na njega kronična postavka.

Indikator IgA s negativnim rezultatom IgM testa ukazuje na kroničnu ili skrivenu infekciju. Istovremena prisutnost IgM-a i IGA ukazuje na to da je bolest u akutna faza, Prisutnost IgG govori o tranziciji bolesti u kroničnu fazu ili puni oporavak i razvoj imuniteta.

Sada postoje posebni testovi ELISA koji se mogu provesti samostalno.

RU 2515051 Vlasnici patenta:

Izum se odnosi na područje biotehnologije i medicine. Imunuunim-testni sustav za određivanje vjerojatnog vremena infekcije vrste virusa imunodeficijencije tipa 1 (HIV-1), uključujući HIV-1 skupinu O, u serumu (plazmi) ljudske krvi. Testni sustav uključuje imunosorbent na temelju virusa virusa virusa humane imunodeficijencije (ENV HIV-1 i HIV-1 skupinu O), otopinu za razrjeđivanje uzoraka (RRS) i detektiranje reagensa (konjugata, kromogen / supstrat). Izum se također odnosi na postupak za određivanje vjerojatnih rokova za infekciju s vrstom imunodeficijencije tipa 1 (HIV-1), uključujući HIV-1 skupinu O, u serumu (plazmi) osobe testiranjem seruma pacijenta uz pomoć opisanog sustava ispitivanja imunofermenta. Izum vam omogućuje brzo i jednostavno identificiranje vjerojatnih rokova za HIV infekciju. 2 n.p. F-laži, 4 tab., 2 PR.

Izum se odnosi na područje biotehnologije i medicine. I može se koristiti za određivanje vjerojatnih rokova za infekciju s vrstom virusa imunodeficijencije tipa 1 (HIV-1), uključujući HIV-1 skupine O, u serumu (plazmi) ljudske krvi.

Širenje infekcije HIV-a ostaje pravi problem. moderna mira, Od pravovremene i visokokvalitetne dijagnoze je stvarna sredstva za smanjenje raspona širenja HIV infekcije, razvoj učinkovitog sustava ispitivanja sposoban odrediti vjerojatni život infekcije je važan zadatak modernog društva.

Analiza stanja tehnike pokazala je postojanje brojnih metoda i testova koji su predloženi različitim autorima kako bi se utvrdilo faze HIV infekcije koristeći različite metode. Poznat je, na primjer, molekularni genetski test na temelju određivanja virusnog opterećenja periferne krvi pomoću metode reakcije lančane polimeraze (PCR) (Kravchenko A.V., Serebrovskaya L.V., Golokhvostova E.L. i drugi. Timazid u kombinaciji s težnjim invalidom u složena terapija bolesnika s HIV infekcijom. - Epidemiologija i zarazne bolesti, - 1998. - №5 - str.51-52). Postoji metoda procjene faza HIV infekcije (klinička imunologija i alergologija Ed. G.Lolora Junior. - M.: Practice, 2000. - S.585-587), koji se sastoji u određivanju razine serum β 2 - imkroglobulin. Opisana je metoda dijagnosticiranja faza infekcije HIV (V.POKROVSKY i sur. " Klinička dijagnostika i liječenje HIV-a. Na temelju činjenice da pacijentov serum metodom imunuunimenalne analize (ELISA) određuje optičku gustoću (OP) izvornog uzorka seruma, odražavajući razinu antitijela s HIV-om, i op omorni uzorak seruma inkubiran za 10 minuta od 100 ul otopine 3,5 m natrijevog izotiocijata. Kada se smanjio OP 40% i manje dijagnosticira faza A - generalizirana limfadenopatija, s smanjenjem opcija u rasponu od 40-60% - stupanj bacilalarnog angiomanskog, orofarenukleon kandidijaza, itd. , i sa smanjenjem od 60% i više - stupanj C - AIDS (RU 2251701).

Dakle, analiza stanja tehnike pokazala je da niti jedan od postojećih izvora ne može poslužiti kao najbliži analog o traženom izumu, budući da se svi ti dokumenti odnose na metode i testove koji određuju fazu HIV infekcije, a niti jedan od opisanih izvora sadrži tehničke Odluke usmjerene na određivanje vjerojatnog vremenskog intervala infekcije. Traženi izum se odnosi na ispitni sustav koji određuje vjerojatno vrijeme za inficiranje HIV infekcije. Analiza stanja tehnike nije otkrila slična rješenja s ciljem rješavanja zadatka.

U ovom izumu, reagensi se deklariraju skup reagensa "DS-IFA-HIV-a-in-time" kako bi se odredili vjerojatni rokovi za infekciju s vrstom ljudske imunodeficijencije (HIV-1), uključujući HIV-1 skupinu O , u serumu (plazmi) ljudske krvi. Test je dizajniran za dodatne studije HIV-pozitivnih uzoraka s potvrđenim pozitivnim rezultatom u imunološkom blotu. Moguće je proučiti uzorke s neodređenim ili negativnim rezultatom studije u imunološkom blotu, koji je potvrdio prisutnost HIV RNA i / ili antigen P24 HIV-1.

U ovom izumu, također je metoda korištenja ovog skupa DS-IFA-HIV-AT-DALE reagensa kako bi se odredilo vjerojatnim vremenom infekcije s vrstom virusa imunodeficijencije tipa 1 (HIV-1), uključujući HIV-1 skupina O, serumska (plazma) ljudska krv.

Tehnički rezultat traženog izuma je odrediti vjerojatne rokove za infekciju s virusom ljudske imunodeficijencije (HIV-1), uključujući HIV-1 skupinu O, jednostavnost ispitivanja, koja omogućuje primjenu traženog izuma za Epidemiološki nadzor nad dinamikom širenja HIV infekcije, tijekom detekcije dinamike u sekundarnom stanovništvu u određenoj populaciji (polo- dob, društvena populacija), kao iu epidemiološkom istraživanju slučajeva i žarišta HIV infekcije.

Suština predloženog tehničkog rješenja je da se definicija vjerojatnog mandata infekcije HIV-1 provodi pomoću ispitivanog sustava, koji uključuje imunosorbent na temelju virusa ljudske imunodeficijencije (ENV HIV-1 i HIV-1 skupina O) , mort za uzgoj uzoraka (RRS) i detektiranje reagensa (konjugati, kromogen / supstrat). Studirani uzorci testirani su od strane izvornih i razvedeni u otopini za uzorkovanje. Prema rezultatima ispitivanja, uzorci su podijeljeni u "rano" i "kasno". "Rani" uzorci - vjerojatni život infekcije do 9 mjeseci od trenutka infekcije, "kasni" uzorci je vjerojatno vrijeme infekcije 9 ili više mjeseci od trenutka infekcije. Pripadnost uzorka na "rano" ili "kasno" procjenjuje se na postotku uključivanja optičke gustoće (OP) razrijeđenog uzorka u odnosu na nerazrijeđene.

Ovi primjeri služe za ilustraciju specifičnih ostvarenja izuma i nisu usmjereni na sužavanje prava podnositelja zahtjeva. Prema opsegu prava podnositelja zahtjeva, sva moguća ostvarenja izuma padaju, uključujući i one nisu navedene u ovom odjeljku.

Kao imunosorbent, rekombinantni antigeni koji sadrže imunodominantne regije ENV HIV-1 i HIV-1 skupinu O. Konjugat-1 je smjesa rekombinantnih antigena GP41 HIV-1 i GP41 HIV-1 konjugiranih skupina konjugiranih s biotinom. U prvoj fazi, proučavani uzorci, kontrolni uzorci i njihovo razrjeđenje 1: 101, kao i PPC se inkubiraju s konjugatom-1. Specifična antitijela prisutna u ispitivanim i kontrolnim pozitivnim uzorcima veže se za antigene sorbebed u jažice mikroploče, a antigeni konjugirani s biotinom i oblikuju stabilne komplekse. Višak uzoraka i konjugat-1 se uklanja pri ispiranju. U sljedećoj fazi, u jažice se doda streptavidin konjugiran s hren peroksidazom (konjugat-2). Konjugat-2 se veže na kompleks antitijelo antitijela prisutan u bunaru. Suvišak konjugata-2 se ukloni ispiranjem, a zatim se dodan kromogen / supstrat u jažice. U bunarima s vezanim konjugatom-2, plavo bojenje se razvija, koji se zamijeni žutom prilikom dodavanja otopine za zaustavljanje. Računovodstveni rezultati provode se pomoću spektrofotometra.

Kao imunosorbent, rekombinantni antigeni koji sadrže imunodominantne regije enske HIV-1 i HIV-1 skupinu O. koriste se kod jednog konjugata - smjesa rekombinantnih GP41 antigena HIV-1 i GP41 HIV-1 skupina konjugiranih s hrenskom peroksidazom. U procesu analize, uzorci, kontrole i njihova razrjeđenja, kao i RRS inkubiraju s konjugatom u jažicama obloženim antigenom. Rezultirajući stalni kompleks nakon uklanjanja viška uzorka i konjugat se manifestira dodavanjem kromogenog / supstrata. U isto vrijeme, plavo bojenje se razvija, koji se zamijeni žutom prilikom dodavanja otopine za zaustavljanje. Računovodstveni rezultati provode se pomoću spektrofotometra.

Pripadnost uzorcima u studiju na "rano" ili "kasno" procjenjuje se% od pada OP u razrjeđivanju uzorka, koji se izračunava pomoću formule:

% P a d e n e o p \u003d 100% - o p r a z c a - o p s s s r. R r s o p e l n o g o o p r a zc a × 100%

gdje ops PRS je prosječna vrijednost PPP-a (izračunava se s nekoliko vrijednosti JPP).

Studirani uzorci smatraju se "ranim": ako je pad op\u003e 40%.

Studirani uzorci smatraju se "kasnim": ako je pad OP≤40%.

Primjer izračunavanja% pada tijekom razrjeđenja uzorka dan je u tablici 1.

Za računovodstvene i obrade rezultata, to je prikladno koristiti Excel program. Korištenje ove aplikacije automatski će omogućiti izračune. Program za obradu rezultata ispitivanja nalazi se na disku koji se primjenjuje na set, ili se može naći na web stranici tvrtke.

Pri razvoju i vrednovanju testa korišteni su uzorci serokonversicijskih ploča (BBI, Inc., Zeptometrix, USA) i HIV-pozitivne uzorke krvnog seruma (plazme) (plazma) korišteni su s mogućim dijagramom infekcije. Vjerojatnost da će pravilno odrediti ograničenje infekcije s vrstom ljudske imunodeficijencije (HIV-1), uključujući HIV-1 skupinu panela za posluživanje, je 100% (podaci su prikazani u tablici 2), Za serume uzorke osoba s uvjetno utvrđenim razdobljem infekcije (n \u003d 129) je 94% (tablice 3, 4; podatke su djelomično prikazani).

U testu "DS-IFA-HIV-u", mogućnost proučavanja uzoraka seruma (plazme) krvi koja sadrži antitijela na HIV-1 različite podtipove, uključujući HIV-1 skupinu O: referentna ploča QCS 42-28-327 -03p (njegov) (podtip a, b, c) (s izuzetkom uzorka br. 24 koja sadrži antitijela na HIV-2), 1. međunarodna referentna ploča protiv HIV-a (NIBSC kod: 02/210) (podtip A, B, B, B, B, C, e) (s izuzetkom uzorka br. 5 koja sadrži antitijela na HIV-2), uzorke seruma (plazma) krvi koji sadrže antitijela na HIV-1 skupinu O (br 1342, K00175, K00259; Biomex). Rezultati ukazuju na mogućnost proučavanja uzoraka seruma (plazme) krvi koji sadrže antitijela na HIV-1, koji pripadaju različitim podtipovima, uključujući HIV-1 skupinu O, u DS-IFA-HIV-na termin test.

Specifičnost regrutiranja postavljena "DS-IFA-HIV-na-termina" određena je u proučavanju uzoraka seruma donatorska krv (n \u003d 352) koji je pokazao negativan rezultat u IFA. Specifičnost je bila 100%. Osim toga, testirano je 255 uzoraka seruma (negativno u ELISA):

■ 167 uzoraka seruma od trudnica i bolesnika s infektivnim bolestima;

■ 128 uzoraka seruma od bolesnika s različitim neinfektivnim bolestima.

Specifičnost je bila 100%.

Dobiveni podaci pokazuju visoku učinkovitost razvijenog sustava ispitivanja "DS-IFA-HIV-AT-time" pri određivanju vjerojatnih rokova za vrstu virusa ljudske imunodeficijencije (HIV-1), uključujući HIV-1 skupinu O, serum ( plazma) ljudska krv.

1. imuno-imunimalni testni sustav za određivanje vjerojatnog vremena infekcije vrste virusa imunodeficijencije tipa 1 (HIV-1), uključujući HIV-1 skupinu O, u serumu (plazmi) ljudske krvi, naznačen time, da uključuje Imunosorbent na temelju virus antigena Ljudska imunodeficifikacija tipa 1 (ENV HIV-1 i HIV-1 skupina O), otopina za razrjeđivanje uzoraka (RRS) i detekcije reagensa koji su konjugati, kromogen / supstrat.

2. Postupak za određivanje vjerojatnih rokova za infekciju vrste virusa imunodeficijencije tipa 1 (HIV-1), uključujući HIV-1 skupinu O, u serumu (plazmi) osobe, na temelju različitog sadržaja antitijela, ovisno o stopa infekcije, uključujući odvajanje uzorka na dva dijela i uzgoj jednog od njih; Proučavanje oba (prirodnog i razrijeđenih) dijelova uzorka seruma pacijenta uz pomoć imunoferment sustava koji je opisan u zahtjevu 1; Određivanje optičke gustoće (OP) domaćih i razrijeđenih uzoraka i RRS-a; Izračun prosječne vrijednosti OP RRS-a; Izračunavanje postotka pada uzorka OP-a u odnosu na nerazrijeđen prema formuli
% P a d e n e o p \u003d 100% - o p r a z c a - o p s s s r. R r s o p e l n o g o o p r a zc a × 100%
u tom slučaju, vjerojatni pojam infekcije smatra se "ranim", ako je pad op\u003e 40%, i kao "kasno" - ako je pad OP≤40%.

Slični patenti:

Izum se odnosi na metodu računala pomoću biokemijskih baza podataka u razvoju novih proteinskih spojeva. Dizajn provodi operator koristeći posebno napisan program koji se temelji na korištenju baze podataka proteina pentafragement.

Izum se odnosi na područje biotehnologije i odnosi se na postupak za otkrivanje o-glikoziliranih proteina u sastavu staničnih homogenata pripravljenih za proteacionalnu i fosfoprotivnu analizu.

Izum se odnosi na područje biotehnologije i imunologije. Monoklonsko antitijelo i dijelovi za vezanje antigena, koji specifično vežu C-terminal ili središnji dio faktora inhibicije migracije makrofaga (MIF).

Izum se odnosi na područje molekularne biologije i medicinske dijagnoze. Postupak za detekciju proteina u amiloidnom stanju, u kojem se dobije uzorak tekućine ili tkiva sisavaca, uzorak se doda ion deterdžent, proteini u amiloidnom obliku na acetatnoj celuloznoj membrani su koncentrirani i oni se detektiraju koristeći aptameri, njihove konjugate ili antitijela specifične za amiloidni oblik proteina.

Izum se odnosi na biotehnologiju, posebno na imunuunim analizu, te je metoda za proizvodnju ugrađenih uzoraka kontrole za imunološki testni sustavi kako bi se odredili infekcije skupine baklje.

Izum se odnosi na medicinu, naime na ginekologiju i može se koristiti za pojedinačni izbor lijekova koji sadrže probiotičke sojeve laktobacili, za učinkovitu intravaginalnu terapiju.

Skupina izuma se odnosi na sastav reagensa analizatora senzora prilagođenog kako bi se olakšalo određivanje koncentracije analizirane tvari u tekućem uzorku, na postupke za određivanje koncentracije analizirane tvari u tekućem uzorku i na Metoda primjene kompozicije reagensa senzora analizatora na podlogu u metodi ispisa matrica.

Skupina izuma odnosi se na veterinarsku medicinu i odnosi se na adjuvantne pripravke koji sadrže kombinaciju Quil A ili njegove pročišćene frakcije, kolesterola, diamethidroctadecilamonijevog bromida (DDA), poliakrilne kiseline (carbopol) i CPG i / ili N- (2-deoksi-2) -L-leucilamino-β-d-glukopiranozil) -N-oktadecildodamid acetat; Metoda priprave takvih adjuvantnih pripravaka i upotrebu takvih adjuvantnih pripravaka u imunogenim i kompozicijama cjepiva s različitim antigenima.

Ovaj izum odnosi se na područje biotehnologije i medicine. Metoda stvaranja antitijela i njegovih funkcionalnih fragmenata usmjerenih na tumorskog antigena eksprimiranog na površini tumora je održiv barem jedan antitumorski spoj na temelju primjene za imunizaciju drobljenog homogenata i / ili suspenzije, i / ili podrijetlom staničnih lizata od takvih tumora. Upotreba postupka prema izumu za dobivanje monoklonskih antitijela i njihovih funkcionalnih fragmenata, monoklonskih antitijela dobivenih ovim metodom koja kodira njihove nukleinske kiseline koje eksprimiraju vektor, stanicu domaćina i metodu proizvodnje antitijela s njihovom upotrebom, kao i hibridom izlučenih ovim antitijelima, upotrebom antitijela i njihovim funkcionalnim fragmentima za proizvodnju lijekova, antitumorskog sastava i njegove uporabe kao lijek. Ovaj izum može pronaći daljnju upotrebu u terapiji otpornim tumorima. 16 n. i 26 Z.P. F-laži, 7 bolestan., 4 PR., 6 tablica.

Izum se odnosi na područje biotehnologije i medicine. Imunološki testni sustav za određivanje vjerojatnog vremena infekcije s vrstom virusa ljudske imunodeficijencije, uključujući HIV-1 skupinu O, u ljudskom serumu. Ispitni sustav uključuje imunosorbent na temelju antigena virusa humane imunodeficijencije, otopinu za razrjeđivanje uzoraka i detektiranje reagensa. Izum se također odnosi na postupak za određivanje vjerojatnih rokova za infekciju virusom ljudske imunodeficijencije, uključujući HIV-1 skupine O, u ljudskom serumu testiranjem seruma pacijenta uz pomoć opisanog sustava specifičnog enzima , Izum vam omogućuje brzo i jednostavno identificiranje vjerojatnih rokova za HIV infekciju. 2 n.p. F-laži, 4 tab., 2 PR.

Cijena: na zahtjev

Robu možete dodati u košaru navođenjem broja

A.P. Obdatin, t.i. Ulanova
Dijagnostički sustavi "znanstvene i proizvodne udruge",

Nizhny Novgorod
Immunoenimen testni sustavi "DS-IFA-HBEAG" i "DS-IFA-Anti-HBE" za određenu dijagnozu i predviđanje ishoda akutnog i kroničnog hepatitisa u
Hepatitis b - virusni infekcijaKarakterizirani teškim

upalna lezija jetre. Uočeno je oko 1% letalnih ishoda

oštro razdoblje bolesti, u 4-10% slučajeva postoji transformacija u kronični

proces s mogućom formacijom u sljedećoj cirozi jetre i primarne

hepatokarcinoma.

Unatoč tendenciji da se smanji incidencija akutnog hepatitisa B, skupina pacijenata koji su prvi put podigli dijagnozu kroničnog virusnog hepatitisa, kao i skupina prijevoznika patogena po prvi put, nastavljena je. Nepovoljna prognoza se održava povezana s visokom učestalošću hepatitisa u populaciji reproduktivnog doba, kao i među adolescentima.

Stoga su pitanja liječenja, prevencije i dijagnoze hepatitisa V. Trenutno, metode imununulalne analize naširoko se koriste za otkrivanje markera ove infekcije. Najvažniji serološki markeri HBV uključuju e-antigen (HBeAg) i antitijela e-antigena (anti-HBE). Hbeag je povezan s visokom krvlju infekcije, što ukazuje na aktivnu replikaciju virusa hepatitisa B (HBV). Utvrđeno je da visoki HBeag titri odgovaraju visoku aktivnost DNA polimeraze i uvijek se kombiniraju s detekcijom potpunih čestica Danea. U slučaju seruma koji sadrži HBeag, u krvi zdrave osobe, opasnost od infekcije za mnoge narudžbe je veća nego nakon pojave serokonverzije.

Kada se akutni hepatitis u Hbeag nalazi u krvi u ranim fazama infektivnog procesa na početku kliničke manifestacije Bolesti, zaostaju u tjednu od pojave HBsAg. Akutni hepatitis B (OGA) Ciklički protok karakterizira kratkotrajnom cirkulacijom HBeAg. Uskoro, na 2-3 tjedna razdoblja žutice, pojaviti se anti-HBE, koji omogućuje predviđanje povoljnog ishoda bolesti.

Anti-HBE cirkulira u krvi 2-5 godina, rjeđe nekoliko mjeseci.

HBeag Anthbe Seroconversion pojave označava oštar pad aktivnosti

infektivni proces. Otkriće Hbeag u krvi pacijenata nakon 2 mjeseca bolesti označava kroniraciju patološkog procesa. U ovom slučaju, anti-HBE se može formirati nakon mnogo godina nakon pojave antitijela na HBCAG ili ne otkriti.

Pojava anti-HBE-a može imati nepovoljnu prognostičku vrijednost u

akutno razdoblje HBV u teškim oblicima, koji odgovara mutaciji u pred-core zoni s

obrazovanje HBV "E-" naprezanje.

Svrha Ovaj rad bio je razvoj vrlo osjetljivih i specifičnih

envinuno-imunim sustavi za detekciju HBEAG i anti-HBE-a i procjene njihovih glavnih karakteristika.

Materijali i metode.

1. Immuno-zatočeni testni sustav "DS-IFA-HBEAG". Trenutni početak testa

oni su poliklonalna koza antitijela za rekombinantni HBeag, proizvodnju nevladinih organizacija "dijagnostičkih sustava", nizhnyju Novgorod, sorbed na čvrstu fazu, i konjugat, koji je poliklonska koza antitijela za rekombinantni HBEAg, obilježeni hren peroksidaze, proizvedeni od strane NVO "dijagnostičkih sustava - Nizhny Novgorod. Shema analize je jednostrani "sendvič". Trajanje reakcije je 1,5 sata. Uzorak seruma analiziran je svučen.

2. Imuno enzimski sustav "DS-IFA-Anti-HBE". Izrađen je test testa

rekombinantni HBeAg (AHBV 102), proizvodnja nevladinih organizacija "dijagnostičkih sustava",

Nizhny Novgorod, sorbed na čvrstoj fazi i anti-IgG konjugat s hren peroksidaze, proizvodnja "Sorbent Service", Moskva. Reakcija se odvija u dvije faze. Imobilizirani antigen se doda u proučavani serum u razrjeđenju 1/10 i nakon inkubacije i uklanjanja ne-kontaktiranih komponenti, detekcija specifičnih imunokrepleksi detektiraju se pomoću miša monoklonskih antitijela protiv ljudske IgG obilježene mirisne oksidalne peroksidaze.

3. 2178 uzoraka seruma korišteni su za procjenu razvijenih testnih sustava.

krv. Od njih, 480 uzoraka seruma zdravih donatora. Prikazan je 1680 uzoraka

uzorci krvnog seruma koji sadrže različite markere hepatitisa V. virusa

Osamnaest uzoraka dobiveno je u dinamici od pacijenata s kliničkom dijagnozom "akutni virusni hepatitis B". Prije toga, svi uzorci su provjereni za hebsAg, HBeAg, anti-HBE, anti-HBC koristeći testne sustave za dijagnostičke sustave nevladinih organizacija, Nizhny Novgorod: "IFA-NVSAG / M", "DS-IFA-NVAG", "DS-IFA Anti -Hbe, "IFA-Anti-NVS".

4. Upotrijebljena je usporedna procjena razvijenih testnih sustava

komercijalna priprema "Monolisa HBE", koju je proizveo bio-rad, Francuska;

Rezultati i rasprava.U nevladinim organizacijama, "dijagnostički sustavi" razvili su 2 nove dijagnostike: "DS-IFA-HBEAG" i "DS-IFA-Anti-HBE". Testni sustav "DS-IFA-HBeAg" je dizajniran za otkrivanje e-antigena virusa hepatitisa V u serumu (plazmi) krvi ljudi metodom imunuunimenalne analize i može se koristiti za specifičnu dijagnostiku, određivanje aktivnosti infektivnog procesa, predviđajući ozbiljnost i izdatke hepatitisa V.

Testni sustav "DS-IFA-Anti-HBE" je dizajniran za identifikaciju antitijela IgG klase na e-antigen virusa hepatitisa B u serumu (plazmi) ljudske krvi i može biti

u prognozu tečaja zaraznog procesa i kontrole terapije pod hepatitisom V.

Proučavati specifičnost novih testova, provedena je distribucija

optičke gustoće (op) uzorci seruma koji sadrže i ne sadrže

Nveg ili anti-nisko. Upotrijebljeni su uzorci krvnih seruma zdravih donatora i uzoraka krvnih seruma odabranih raznih oznaka virusa hepatitisa.

stanice transfuzijske krvi. Rezultati istraživanja pokazali su pouzdano razdvajanje dviju populacija. Vrijednosti OP uzoraka koji ne sadrže NWEG su fluidirane u rasponu od 0,011 do 0,111, a glavni vrh uzoraka seruma koji sadrže NWEG bio je u rasponu od 2,186 do 3,186 (slika 1a).

Fig.1a. Distribucija OP uzoraka seruma koji sadrže i ne sadržiHbeag U testnom sustavu "DS-IFAHbeag»
Vrhunac koji odgovara skupini seruma s niskim OD (0.3-0.6) vjerojatno će biti uzorci seruma odabrani u ranim fazama infektivnog procesa.

Već u razdoblju inkubacije, pacijenti su prirodno registrirani u NVSAG i NVAG krv, što potvrđuje njihovu potencijalnu epidemiološku opasnost.

Raspon optičke gustoće serumskog seruma ne-anti-nve

bilo je u rasponu od 0,002 do 0,122, a glavni vrhunac OP uzoraka seruma koji sadrži anti-HVE bio je u rasponu od 2,431 do 3,231 (Slika 1b).

Sl. 1b. Distribucija OP uzoraka seruma koji sadrže i ne sadrži anti-nBITI., u ispitnom sustavu "DS-IFA-AntiHbeag»
Proučavane su značajke raspodjele zaštitnih uzoraka OP-a

serum koji sadrži ( n.\u003d 78) i ne sadrži hebsAg ( n.=56).


Sl. 2a. Hby.- uzorci seruma koji sadržeHebs. u ispitnom sustavu "DS-IFA-AntiHby.».

Sl.2b. Značajke distribucije OP AntiHby.- Pozitivni uzorci seruma koji ne sadrže Hebs. U sustavu ispitivanja "DS-IFA-AntiHby.».
Optička gustoća od 87% anti-HBE-pozitivnih uzoraka serumskih seruma koji ne sadrže HBSAG u rasponu od 0,41 do 0,81 (slika 2b). U isto vrijeme, samo 14% anti-HBE-pozitivnih uzoraka seruma koji sadrži HBSAG, OP je bio u tom rasponu (slika 2a). Poznato je da je u fazi kasnih reconvaluesa, s negativnom reaktivnošću na HVSAG, postupno je smanjenje titara antitijela na nbeag (slika 2b). Stoga je moguće da je povoljna koncentracija anti-nve-pozitivnih uzoraka odgovarala OP manjim od 0,8.

Dobiveni podaci ukazuju na pouzdanost razdvajanja pozitivnog i

negativni uzorci seruma bez obzira na fazu bolesti. Proučavanje osjetljivosti i specifičnosti testnih sustava "DS-IFA-HBeAg" i "DS-IFA-anti-HBeag" provedeno je u usporedbi s testom "Monolisa HBE" ("Biorad", Francuska) (Tablica 1 ).

stol 1
Usporedne karakteristike osjetljivosti i specifičnosti

dS-IFA-HTUAG i DS-IFA-AntTH sustavi

Podaci prikazani u tablici 1 prikazuju 100% slučajnost rezultata.

Poznato je da je dodatna prognostička vrijednost kombinirana indikacija NTAG i anti-nve, posebno njihova kvantitativna procjena. Brzo povećanje anti-NVA titra karakterizira aktivni humoralni imunološki odgovor i praktično eliminira prijetnju kroničnog. Analizirali smo promjenu sadržaja NVEEG / Anti-HVE u uzorcima bolesnika u serumu u serumu s kliničkom dijagnozom "akutni virusni hepatitis B" (Tablica 2).

tablica 2
Dinamika serokonverzije NVEAG / Anti-HVE u bolesnika

* Od ulaska u bolnicu
Svi uzorci seruma su istraživani za serološke markere.

OGE: Nvsag, anti-nvs, anti-nvs Igm. Razdoblje promatranja variralo je od 13 do 38 dana. Pacijenti broj 1, №2 i №6 Anti-NVE pronađeni su već na pozadini smanjenja NVEA titra. U bolesnika broj 3 i №4, Anti-HVE pojavio nakon nestanka NVEG seruma 21 i 8 dana, respektivno. Analiza otkrivanja NVEG-a u serumu pacijenta br. 5 tijekom prijema u bolnicu pokazala je negativan rezultat. U isto vrijeme, konverzija je registrirana na Anti-NVE prvog dana istraživanja.

Svi su pregledi pratili trend povećanju titra antitijela na NVEG u

brdski serum, koji vam omogućuje predviđanje povoljne kliničke dinamike

manifestacije OGV-a i brzog oporavka.

Studija novog sustava ispitivanja pokazalo je njihovu visoku dijagnostičku pouzdanost. Rezultati usporedbe DS-IFA-HBEAG "i" DS-IFA-Antbbe "pokazali su 100% slučajnost s monolisom HBE testom.

U proučavanju uzoraka sera bolesnika s hepatitisom u dinamici, testovi

potvrdila je visoku osjetljivost i specifičnost.

Kratko vrijeme inkubacije proučavanih uzoraka i konjugata (1 h) omogućuje vam da odredite ispravnu taktiku držanja u minimalnom vremenu medicinske događaje, Stvoreni testni sustavi prikladni su u formulaciji, ekonomski (50 ul seruma je potrebno za određivanje HBeAg i 10 ul seruma za određivanje anti-HBE). Visoka kvaliteta karakteristika testova omogućuju vam da ih uspješno koristite u prognozu protoka zaraznog procesa i kontrolira terapiju pod hepatitisom V.
KNJIŽEVNOST

1.Meyer K.P. Hepatitis i posljedice hepatitisa / k.p. Meyer.- M., Geotar, Medicina, 1999.- C.720

2.Onshchenko G.g. Širenje virusnog hepatitisa kao prijetnje nacionalnoj sigurnosti / G.G. Onshchenko, L.A. Dementeev // Journal of Microbiologija. -2003.-№ 4.- S.93-99.

3.Sinson S.N. Virusni hepatitis / S.n.sorinson. - St. Petersburg, Tseza, 1997.- 306 S.

4. Baumeister M. Hepatitis B Virus E antigen specifični epitopi i ograničenja komercijalne anti-HBE imunoassets / M. Baumeister // Journal of Medical Virology.- 2000.-n 60.- R.256-263.

5.Kane M. Globalni program za kontrolu infekcije hepatitisa B / M. Kane // Cjepivo. - 1995.-N131 (Suppull. 1). - R.47-6. Shunichi Sat.oko. Sojevi virusa hepatitisa B s mutacijama u promotoru jezgre u bolesnika s fulminantnim hepatitisom / Shunichi Sato, Kazuyuki Suzuki // Annals of Internal Medicine. - 1995.- N122.- R.241-248.

7. Ou J.-N.. Molekularna biologija hepatitisa B virus e antigen./ j. -n.ou // Journal of Gastroenterology i hepatologije. - 1997. - br. 12 (Supll.1) - R. 178-187.

8.Tiollais P. Virus hepatitisa B. / P.tioolais, c.pourcel, a.dejean // priroda. - 1985. - str.317, 489-495
Objavljeno: J. "Klinički laboratorijska dijagnostika"- 2005.-№6-S.-34-37