Морфологическая диагностика, как фактор повышения эффективности лечения рака. Игх исследование - что это такое, расшифорвка результатов Иммуногистохимическое исследование

При подозрении на опухолевидное образование у пациента врач назначает ряд стандартных обследований.

Диагноз злокачественного поражения может быть выставлен только на основании оценки изменений в биоптате – иммуногистохимическое исследование (ИГХ) считается одним из самых достоверных способов обнаружения опухолевых клеток.

Что такое иммуногистохимическое исследование?

Суть иммуногистохимического исследования – это изучение под микроскопом образцов биологического материала, то есть тканей, полученных путем биопсии.

Предварительно ткани обрабатываются определенными специфическими антителами.

И сами раковые клетки являются объектами всестороннего исследования уже несколько десяток лет.

В ходе этих исследований ученым удалось установить, что опухолевидные клетки продуцируют специфические белки или как еще их называют – антигены.

Эти белки имеют способность связываться с антителами. Именно на этом и построен принцип ИГХ – забранная у пациента ткань для исследования обрабатывается рядом стандартных антител и проводится исследование под микроскопом.

Если антитела вступают во взаимодействие с раковыми клетками, то у них появляется свойство флуоресценции, то есть возникает свечение, отличающееся разной длиной волны. То есть если подобное изменение в исследуемом биоптате обнаружено, то можно уже с большей долей вероятности выставлять злокачественное образование.

На сегодня разработаны и активно используются антитела к большинству самых распространенных новообразований.

Иммуногистохимическое исследование позволяет:

• Определить вид новообразования и его подвид.
• Установить, насколько распространен по организму первичный раковый очаг.
• Определить источник метастазов, если биоптат получен из вторичных очагов рака.
• Оценить насколько эффективно проводимое лечение пациентов с онкозаболеваниями.
• Установить стадию злокачественного новообразования.
• Выяснить пролиферацию опухолей, то есть установить скорость роста новообразований.

ИГХ считается более информативным методом по сравнению с более привычным гистологическим. Но в некоторых случаях необходима именно гистология, поэтому желательно использовать оба анализа.

Показания

Метод ИГХ может применяться для исследования практически любых тканей в организме человека. Назначается этот вид исследования в основном, если имеется подозрение на развитие опухолевого процесса.

Иммуногистохимическое исследование используется:

• Для определения типа первичных, в основном одиночных, новообразований.
• Для выявления метастазов.
• Когда необходимо определить прогноз развития и течения опухолей.
• Как метод исследования рецепторов к ряду гормонов.
• Для определения типа лимфопролиферативных состояний.
• Для обнаружения микроорганизмов.

Противопоказаний к ИГХ нет. Этот анализ невозможно провести только в том случае, если возникают непреодолимые трудности при заборе образцов поврежденных тканей.

Как проводится анализ?

ИГХ проводится в несколько этапов, самый первый это долаборатоный, то есть забор тканей для анализа.

Образец получают путем биопсии, в некоторых случаях возможно отщипывание кусочка тканей или их изъятие при проведении эндоскопической или хирургической операции.

Как будет получен биологический материал, зависит от локализации новообразования и от его вида. Забранный материал помещают в формалин и только после этого направляют в лабораторный центр.

В лаборатории образец ткани подвергают нескольким изменениям:

• Материал обезжиривают и заливают парафином. Таким образом, получаются гистологические блоки, хранить их можно вечно, поэтому и ИГХ можно при необходимости повторять.
• Следующий этап микротомирование – получение тончайших срезов с шириной до 1,0 мкм с парафиновых блоков. Срезы распределяют на специальных стеклах.
• Полученные срезы окрашиваются иммуногистохимическими препаратами, то есть растворами антител в определенной концентрации. Может использоваться для исследования малая панель – в нее входит 5 видов антител. Большая панель содержит от 6 и до десятков видов маркеров. Какие антитела будут вступать во взаимодействие с опухолевыми клетками, зависит от предполагаемого вида новообразования.

Результаты проведенного ИГХ становятся известны в течение 7-15 дней.

ИГХ при раке молочной железы

Для определения были выведены определенные иммуногистохимические маркеры. При подозрении на злокачественное образование обязательно количество таких рецепторов, как эстроген и прогестерон.

Избыток этих гормонов провоцирует рост злокачественного образования и влияет на появление метастаз. ИГХ на предмет экспрессии прогестеронов и эстрогенов позволяет точнее установить стадию заболевания и выяснить показано ли в этом случае гормональное лечение.

Опухоли с высокой концентрацией гормонов в большинстве своем не отличаются повышенной активностью и успешно лечатся антигормональными препаратами.

При проведении ИГХ обязательно определяют такой показатель, как Ki-67, он указывает на злокачественность процесса. Если при раке молочной железы Ki-67 доходит только до 15%, то исход болезни считается благоприятным.

При уровне в 30% говорят о быстрой скорости развития опухоли, прекращение ее роста происходит под влиянием химиотерапии. Если показатель меньше 30%, то лечение пациентов проводится гормональными средствами.

Обследование больных позволило установить, что если Ki-67 меньше 10%, то выживаемость приближается к отметке в 95%. При уровне этого показателя в 90% летальный исход наблюдается практически в ста процентах.

Иммуногистохимическое исследование назначается не только при злокачественном поражении молочной железы, это исследование оказывается информативным при:

• Бесплодии.
• Патологических изменениях в репродуктивной функции.

ИГХ эндометрия

Иммуногистохимическое исследование тканей эндометрия назначается:

• При бесплодии.
• При частом невынашивании беременности.
• Пациенткам с несколькими неудачными попытками ЭКО.
• При диагностике хронической формы эндометрия.

ИГХ позволяет установить имеются ли клетки, препятствующие зачатию. Этот анализ одновременно определяет, как реагируют рецепторы тканей матки на гормональную стимуляцию, если патология будет выявлена, то это указывает на изменения в эндометрии – эндометрит, гиперплазию, десинхронизацию процесса дифференцировки эндометрия.

Именно такие нарушения в двух случаях из трех становятся основными причинами проблем с зачатием и вынашиванием плода.

Забор тканей эндометрия в зависимости от выявляемой патологии проводится в разные дни цикла, день биопсии должен назначить врач. С помочью ИГХ можно установить раковые заболевания и инфицирование ВПЧ нескольких подвидов.

Расшифровка результатов

Исследует подготовленные образцы врач-патологоанатом, он должен иметь сертификат о специальной подготовке проведения анализов по методу ИГХ.

В заключение выносятся показатели антител, к которым определена тропность исследуемого материала.

Обязательно указывается морфологическая структура ткани, то есть вид атипичных клеток и их количество.

Выявление определенных антигенов указывает на вид раковой патологии. Но необходимо учитывать, что диагноз выставляется только на совокупности данных всех диагностических процедур. Интерпретировать результаты ИГХ может онколог.

Цена исследования

Стоимость иммуногистохимического исследования зависит от того, сколько антител используются при проведении анализа.

Стандартное исследование (от 2 и до 5 антител) в большинстве клиник стоит в пределах 4-5 тысяч рублей. Если выявляется сразу до десятка антигенов, то стоимость может быть гораздо выше — от 15 тысяч рублей.

Видео о том, как иммуногистохимия помогает поставить диагноз злокачественной опухоли:

Давайте для начала мы разберем, что же такое иммуногистохимическое исследование. Под ним подразумевается микроскопическое исследование ткани, которое основано на выявлении антител на патологические вещества.

Разделяют два метода исследования:

• прямой (прямая реакция антител непосредственно на патологическое вещество);
• непрямой метод (патологические вещества, распознаются с помощью вторичных антител).

Способы маркировки:

• ферменты - белковые молекулы, они же молекулы РНК. Так например: щелочная фосфатаза (фермент гидролаза);
• флуоресцентные - тот же физический процесс, например - флуоресцеин - органическое соединение;
• электроно-плотные частицы, к таким относится золото.

Используют для:

• изучения и исследования секреторных процессов, в том числе синтетических;
• распознавания гормонов рецепторов;
• выявления различных типов, родов клеток по их свойствам.

Для чего используют иммуногистохимию при раке молочной железы

В области исследования грудной железы данное исследование используется в качестве предварительной диагностики для установления точного диагноза, в том числе при злокачественных образованиях. Данное исследование дает возможность определить следующее:

• Точное образование (доброкачественное или злокачественное) и назначение правильного лечения.
• Точное месторасположение (наличие метастаз в организме и их дислокацию).
• Первоначальный очаг заболевания.
• Стадию заболевания (например, степень рака).
• Пролиферацию клеток (распознать скорость размножения и развития раковых клеток).
• Ответ раковых клеток на медикаменты, их чувствительность, также можно отследить чувствительность к химиотерапии, к лучевой терапии.

Исследование способно детально изучить заболевание, что дает возможность полностью диагностировать заболевание и подобрать правильное лечение. Это играет не маловажную роль в диагностике, лечении, продолжительности жизни онкологических больных. Также можно сказать, что с помощью данного метода можно:

Показания к исследованию

В основном данная диагностика используется для изучения (исследования) любой ткани человеческого организма. Основа для проведения данного исследования - это любое новообразование, которое предполагает развитие рака. Также исследование проводится для изучения эндометрия:

• при метастазах;
• при бесплодии;
• после неудачных попыток ЭКО;
• при различных заболеваниях матки;
• при различных видах патологий органов малого таза;
• при постоянных невынашивания плода;
• при заболевания эндометрия.

Исследование не имеет абсолютных противопоказаний. Препятствием для ИГХ может быть, только невозможность по каким либо причинам забора материла на исследование.

Как происходит исследование

Данный вид исследования может проводится только в специализированных лабораториях, при этом врач должен иметь специальную квалификацию, пройти специальное обучение.

Забор проходит непосредственно пораженного участка кожи с помощью биопсии. Также забор материала может происходить во время хирургического вмешательства на молочной железе.

Потом полученный материал специально обрабатывается и консервируется. Для этого она заливается парафином. В таком виде, в парафине, материал может правильно храниться в течении многого времени.

Следующим этапом является микротомирование. Материал нарезают на тонкие пласты при помощи специального аппарата.

В дальнейшим нарезанные пласты окрашиваются с определенными антителами и все это изучается под микроскопом. В некоторых лабораториях изучается окрашенный материал на автоматическом приборе.

ИХГ Эндометрия

Показания:

• две-три неуспешных процедур ЭКО;
• не первое (постоянное) невынашивание плода на ранних сроках;
• бесплодие.

Во время исследования могут выявить такие заболевания как:

• эндометрит,
• гиперплазия,
• неполную трансформацию эндометрия,
• нарушение фаз развития
• и другие заболевания.

Как показывает практика, именно заболевания, связанные с эндометрием на 73% являются причиной бесплодия.

Подготовка к исследованию

Данное исследование проводится в определенный день менструального цикла, обычно на 5-7 день смотрят воспалительные процесса эндометрия, на 20-24 день цикла - оценивают секрецию, смотрят рецепторную функцию.

• не принимать гормоны за неделю до анализа;
• не принимать кровоостанавливающих препаратов;
• правильная интимная гигиена.

Как проходит процедура

Процедура происходит на гинекологическом кресле. Женщину обезболивают специальными препаратами и вводят зеркало. Делается санация половых органов. Вводится специальный прибор - система гистероскопа и проводится забор. Далее убирают прибор, проводя санацию органов.

Потом женщина находится под наблюдением врача до полного восстановление, примерно 1-2 часа.

Результаты примерно готовятся 3-5 дней. Оценить результаты может только специалист.

Результаты ИХГ молочной железы

Что определяет анализ:

HER2neu или, по-другому говоря, человеческий рецептор эпидермального фактора роста. Несет ответственность за продукцию белка. При поражении раковых клеток усиливается беспорядочный рост.

Если результат пишется 1 (+), то это говорит о том, что избытка белка нет, следствие - нехорошее состоянии опухоли.

При 2 (++) обычно назначают повторное исследование.

При 3 (+++) рассматривают как положительную опухоль, которую обычно подвергают медикаментозному лечению.

ER uPR данный вид гормонов способствует стимуляции роста патологических тканий. Если данные показатели увеличены, то это говорит о правильном лечении, что опухоль реагирует на гормонотерапию. Следовательно, если данные показатели понижены, то можно говорить о неправильном подборе лекарств. Опухоль развивается дальше.

Ki - 67, по данному показателю оценивают стадию опухоли и её характеристики. Если результат дает повешенные цифры, то это говорит о быстром течении заболевания, наличии метастаз и, к сожалению, совсем не хороший прогноз. Данный результат отмечается в процентах. Так например:

• 11% - вполне хороший прогноз (выздоровление 93%);
• 21 % - говорят о нем как 50% на 50%, все зависит от организма человека;
• все показатели за 30% - оценивают как тяжелая стадия - высокоагрессивная;
• 90% - неизлечимо, приводит к смерти.

Так же данный индекс способствует к определению выбора лечения.

Ген p53 - способствует предотвращению роста патологической ткани. Данный ген является барьером для заболевания. Для начала заболевания служит мутация гена, например, наследственность или нарушение белковой матрицы.

VEGF - обозначается белок, которой несет функцию контроля жизнедеятельности ткани при условии недостаточного кровообращения. Высокие показатели данного белка говорит о росте опухолевой ткани, в следствии «хорошего» питания ткани.

В основном выделяют 4 типа рака:

• Люминальный А - при этом: к женским гормонам рецепторы положительны, к HER2- отрицательные, показатель ki- 65-13% меньше.
• Люминальный В - при этом: к женским гормонам рецепторы положительны, к HER2- отрицательные, показатель ki- 65-15% меньше.
• Erb - B2 - при этом: реакция рецепторов к прогестерону (эстрогену) отрицательная, к HER2- положительная.
• Базальноподобный - отрицательный показатель по всем категориям.

Определение экспрессии белков PD-1, PDL-1 и PDL-2

Принято считать, что отвечают за саму опухоль - PD-1, PDL-1 и PDL-2. Но они могут присутствовать не во всех патологических тканях. Для точного определения и назначения правильной терапии всем пациенткам, которым непосредственно показана иммунотерапия проводится такое исследование, как экспрессия белков PD-1, PDL-1 и PDL-2.

Данное исследование проводят с помощью флуоресцентной гибридизации FISH. В результате наличия экспрессии иммунотерапия назначается такими препаратами, как: Ниволумаб, Атезолизумаб, Пембролизумаб.

Цена иммуногистохимического исследования

Иммуногистохимическое исследование очень сложный анализ, в котором используются множественное количество онкомаркеров.

Стоимость исследования зависит от количества проверяемых факторов. Цена исследования начинается от 4 тысяч рублей и до 20 тысяч рублей.

Видео: Иммуногистохимические исследования

medik-24.ru

Иммуногистохимическое исследование: расшифровка и особенности проведения

Важнейшим пунктом при диагностике раковых заболеваний является иммуногистохимическое исследование. Ежедневно в организм человека проникают микроорганизмы, способные запустить развитие патологического процесса. Защитные силы противостоят этому, образуя антитела. Эта реакция и легла в основу создания ИГХ-исследования.

Суть метода

Данный способ диагностики раковых заболеваний является наиболее современным и достоверным. В процессе развития опухолевого процесса образуются чужеродные организму белки – антигены. В это же время иммунная система вырабатывает антитела, главная цель которых – предотвращение размножения патогенных микроорганизмов.

Задачей иммуногистохимического исследования является своевременное выявление раковых клеток. Для этого биологический материал пациента обрабатывается множеством антител, после чего тщательно изучается под микроскопом. Если данные белковые соединения свяжутся с опухолевыми клетками, будет визуализироваться их свечение. Возникновение эффекта флюоресценции и свидетельствует о наличии в организме раковых клеток.

На сегодняшний день в распоряжении специалистов, осуществляющих ИГХ-исследование, имеются практически все антитела к различным видам опухолей, что служит залогом получения достоверных результатов.

Возможности

Современный вид диагностики позволяет определить:

• распространение опухолевого процесса;
• скорость роста злокачественных новообразований;
• вид опухоли;
• источник метастазов;
• уровень злокачественности.

Кроме того, с помощью иммуногистохимического исследования может оцениваться степень эффективности лечения раковых заболеваний.

Показания и противопоказания

С помощью данного способа существует возможность изучения любых тканей человеческого организма. Главным основанием для назначения иммуногистохимического исследования является подозрение о наличии злокачественного образования.

В этом случае метод используется для:

• определения вида опухоли и области её локализации;
• обнаружения метастазов;
• оценки активности опухолевого процесса;
• выявления патологических микроорганизмов.

Также анализ эффективен при проблемах с зачатием.

Иммуногистохимическое исследование эндометрия показано при:

• бесплодии;
• заболеваниях матки;
• наличии патологий в органах репродуктивной системы;
• невынашивании беременности;
• хронических заболеваниях эндометрия.

Кроме того, ИГХ-исследование назначается пациенткам, у которых не наступает беременность даже после нескольких попыток экстракорпорального оплодотворения. Метод позволяет определить, имеются ли в организме клетки, снижающие вероятность зачатия.

Противопоказаний к ИГХ-исследованию не существует. Единственным фактором, из-за которого невозможно провести анализ, является непреодолимая сложность при заборе биоматериала пациента.

Как проводится

В первую очередь методом биопсии получают образец ткани больного. Реже забор материала осуществляется в процессе эндоскопического обследования или хирургического вмешательства. Способ получения образца зависит от вида опухоли и её локализации.

Важным нюансом является то, что забор материала при первичном обследовании должен осуществляться до начала лечения. В противном случае результаты исследования могут быть искажены.

После забора биоматериала его помещают в формалин и отправляют в лабораторию, где он подвергается следующей обработке:

1. Образец ткани обезжиривается и заливается парафином. В данном виде биологический материал может храниться очень долго, за счёт чего ИГХ-исследование может быть проведено повторно.
2. С образца собирают несколько тонких срезов и перемещают их на специальные стёкла.
3. На них биоматериал окрашивается растворами различных антител. На данном этапе может применяться как малая панель, так и большая. В первом случае изучаются реакции после использования 5 видов антител, во втором – до нескольких десятков.
4. В процессе иммуногистохимического исследования при раке любого органа появляется эффект флюоресценции, что даёт возможность специалисту определить вид злокачественных клеток.

Интерпретация результатов

Как правило, заключение готово через 7–15 дней. Срок зависит от вида используемой панели (малой или большой). Расширенный способ занимает больше времени.

Изучением срезов биоматериала занимается патологоанатом, имеющий знания и навыки (подтверждённые официальным документом), необходимые для проведения анализа.

При интерпретации результатов особое внимание обращается на показатель Ki-67. Именно он предоставляет информацию о степени злокачественности процесса. Например, если результат показателя после проведения иммуногистохимического исследования при раке молочной железы составляет не более 15%, считается, что прогноз более чем благоприятный. Уровень в 30% свидетельствует об активности опухолевого процесса, т.е. о быстрой скорости его развития. Как правило, она останавливается после курса химиотерапии.

По некоторым статистическим данным, если Ki-67 составляет менее 10%, итог заболевания будет благоприятным (в 95% случаев). Отметка в 90% и выше означает почти 100%-ный летальный исход.

Кроме показателя злокачественности, в заключении указываются:

• антитела, к которым выявлено сходство (тропность);
• вид раковых клеток, их количественное значение.

Важно понимать, что точный диагноз ставится после получения и изучения информации, собранной посредством всех проведённых диагностических процедур. Несмотря на то, что ИГХ-анализ считается наиболее информативным методом по сравнению с гистологией, иногда необходимо использовать оба способа. Расшифровкой иммуногистохимического исследования занимается исключительно онколог.

В заключение

В современной медицине особое внимание уделяется диагностике раковых заболеваний. Наиболее современным и информативным методом считается иммуногистохимическое исследование. С его помощью выявляется не только наличие раковых клеток, но и определяется их вид и скорость развития злокачественного процесса. Кроме того, на основании результатов производится оценка эффективности назначенного лечения.

fb.ru

ИГХ исследование молочной железы - расшифровка

Иммуногистохимическое исследование (ИГХ) – метод исследования железистой ткани груди, при котором используется специальный реактив, позволяющий получить полную характеристику клеток:

• установить происхождение клеток опухоли;
• определить ее структуру;
• диагностировать первичное образование по имеющимся метастазам;
• точно вычислить продолжительность заболевания, возраст опухли;
• определить правильную методику лечения.

Анализ ИГХ молочной железы назначается как при подозрении на онкологический процесс, так и при его течении, с целью диагностики результативности проводимого химиотерапевтического лечения.

Что позволяет определить ИГХ?

Для начала необходимо сказать, что расшифровкой результата ИГХ исследования молочной железы должен заниматься исключительно врач. Только он, зная полностью особенности течения заболевания, может интерпретировать полученный результат.

ИГХ, проводимое при раке молочной железы, определяет характер опухоли. Наиболее часто при ИГХ молочной железы используют определение рецепторов:

• эстроген (ER);
• прогестерон (PR).

Установлено, что опухоль, содержащая большое количество данных рецепторов ведет себя неагрессивно, малоактивна. При лечении такой формы, гормональная терапия значительно эффективна. Благоприятный прогноз в 75% случаев.

При расшифровке результатов анализа ИГХ молочной железы используют процентные единицы измерения. При этом определяется соотношение числа клеток с экспрессией (восприимчивости) к эстрогенам и прогестерону, общему количеству клеток опухоли. При этом результат выводится в виде соотношения числа ядер окрашенных клеток к неокрашенным, в совокупности к 100 клеткам.

В виду сложности подобных вычислений их интерпретации, оценка результата занимаются исключительно специалисты.

Статьи по теме:

womanadvice.ru

Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы

При подозрении на наличие у пациентки злокачественной опухоли внутри молочной железы, врач обязан назначить комплексное исследование больного участка органа. Некоторые из видов обследования являются стандартными, и входят в основу медицинского протокола при выявлении онкологии в грудной клетке. Не каждое новообразование, обнаруженное в груди можно сразу же диагностировать, как злокачественное. Чтобы сделать такое заключение, онколог обязан отправить женщину на иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы.

Только после того, как в биологическом материале опухоли будут обнаружены раковые клетки, имеющие патогенные свойства, способные к активному делению и распространению за пределы молочной железы - новообразование получает статус злокачественного.

Как происходит иммуногистохимическое исследование груди

После обнаружения в молочной железе нового образования, одним из обязательных анализов для проведения является иммуногистохимия. Суть ее выполнения заключается в том, что врачи проводят небольшую хирургическую операцию.

На больной груди делается микророзрез, в который вводят специальное оборудование, отбирающее часть ткани опухоли. Пациентка при этом находится под действием наркоза. После получения биологического материала новообразования, его обрабатывают специфическими антителами. Злокачественная опухоль вырабатывает свои агрессивные агенты, которые имеют белковую структуру.

Также они наделены способностью взаимодействовать с другими биологическими веществами, связывать их, и формировать с ними единую ткань. По итогам обработки опухолевого материала антигенами, ткань помещают под микроскоп для детального визуального исследования.

Фрагмент доброкачественной опухоли после обработки антителами не меняет свой цвет, а клеточная структура биопата и антител остается неизменной, активного контакта между ними не происходит. Клетки злокачественного образования ведут себя совершенно по-другому, и это хорошо видно сквозь линзу микроскопа.

[12-027 ] Иммуногистохимическое исследование клинического материала (с использованием 1 антитела)

3300 руб.

Заказать

Исследование клеток ткани, которое проводится с помощью специальных реактивов.

Синонимы русские

ИГХ, иммуногистохимия, иммуногистохимический анализ.

Синонимы английские

Immunohistochemistry, IHС, immunohistochemical analysis.

Метод исследования

Иммуногистохимический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Образец ткани / образец ткани в парафиновом блоке.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Иммуногистохимическое исследование клинического материала проводится в целях выявления в нем искомых веществ. Готовые гистологические препараты обрабатываются специальными реактивами, содержащими меченые специфические антитела к выявляемому веществу, которое в данной ситуации служит антигеном. Если искомое вещество находится в исследуемом материале, то антитело связывается с его определенными участками. В результате этого между ними образуется комплекс и происходит окрашивание ткани.

Данный метод используется в диагностике различных патологических состояний, особенно велика его роль в области онкологии. Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование помогает не только диагностировать опухоль, определить ее нозологический вариант, выявить первичный опухолевый очаг и обнаружить раковое перерождение клеток, но также спрогнозировать варианты течения заболевания и успешность лечения. К факторам, влияющим на прогноз, относятся рецепторы к эстрогенам и к прогестерону, Ki-67 (маркер активности опухоли), her-2 neu (эпидермальный фактор роста, определяет чувствительность опухоли к химиопрепарату трастузумабу/герцептину), VEGF (сосудистый фактор роста), Bcl-2, р53 и др. В отличие от иммуногистохимического анализа, их невозможно определить при обычном гистологическом исследовании.

Также этот метод нашел применение в диагностике системных заболеваний соединительной ткани и болезней почек, позволяет выявлять бактерии и вирусы в изучаемых тканях, например вирус Эпштейна - Барр, папиллома-вирус, Helicobacter Pylori (у больных хроническим гастритом), микобактерии при диагностике туберкулеза и др.

На основе ИГХ-анализа врач получает заключение с положительными и отрицательными маркерами, и это помогает подтвердить или опровергнуть гипотезу других клинико-лабораторных исследований.

Рак шейки матки относится к наиболее распространенным видам рака у женщин. Эпидемиологические и лабораторные данные подтверждают роль человеческого папиллома-вируса (ВПЧ, HPV) в качестве запускающего агента для подавляющего большинства предраковых и злокачественных поражений эпителия слизистой оболочки шейки матки. При этом ДНК ВПЧ могут быть обнаружены в 95-100% всех случаев.

Вирус папилломы человека представляет собой небольшие циркулярные двухцепочечные вирусы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), принадлежащие к семейству Papillomaviridae. Известно более 130 типов ВПЧ. Они классифицируются по степени риска, основанного на их связи с цервикальной карциномой. ВПЧ 16 и 18 являются наиболее часто встречающимися типами высокого риска. Внедряясь в эпителиальные клетки, вирус вызывает в них дефекты генов, тем самым способствуя развитию опухоли. При помощи ИХГ легко обнаружить в клетках, пораженных HPV, экспрессию белков p16 и p18, и их позитивность сильно коррелирует с позитивностью HPV. Это помогает различить неопухолевую дисплазию (как результат воспаления) и опухолевую (вызванную вирусом папилломы и способную переродиться в рак), а также позволяет провести дифференциальную диагностику дисплазии умеренной и высокой степени тяжести (CIN II/III) и начальных форм рака шейки матки, выявление поражений, склонных к прогрессированию и развитию инвазивной карциномы. В дисплазиях умеренной и высокой степени (в 80-100% случаев CIN II и практически во всех случаях CIN III) и инвазивном раке шейки матки определяется усиленная экспрессия белка p16, и она усиливается по мере нарастания тяжести поражения.

У женщин с плоскоклеточными интраэпителиальными поражениями низкой степени тяжести очаговая и диффузная экспрессия свидетельствует о прогрессировании заболевания. Отсутствие или очаговая экспрессия p16 в поражениях высокой степени может служить дополнительным признаком благоприятного течения патологического процесса.

Применяется иммуногистохимическое исследование и при дифференциальной диагностике .

Целиакия – это системное заболевание, обусловленное генетической непереносимостью глютена или соответствующих проламинов, которые содержатся в семенах злаков. Характеризуется данная патология повреждением слизистой оболочки тонкой кишки (развитием атрофической энтеропатии), появлением в сыворотке крови специфических антител и широким спектром глютензависимых клинических проявлений. Заболевание встречается в два раза чаще среди женщин, чем среди мужчин, может впервые проявиться как в детстве, так и у взрослых. Целиакия может протекать с ярко выраженной или со стертой клинической картиной, а также без гастроэнтерологической симптоматики. Чаще всего встречается стертый вариант течения заболевания, поэтому диагностика глютеновой энтеропатии (ГЭ) затруднена.
На первичном лабораторном этапе проводится серологическое исследование, определяющее в крови специфические биомаркеры. Лицам с положительными результатами показана эндоскопия тонкой кишки с биопсией и последующим гистологическим и ИГХ анализом взятого материала.

Известно, что целиакия сопровождается повышением числа лимфоцитов внутри эпителиальных клеток тонкой кишки. При этом отличительной особенностью является то, что большинство интраэпитиальных лимфоцитов (ИЭЛ) несут на своей поверхности специфический Т-клеточный рецептор (CD3 γ и CD3δ-положительные клетки). Чем активнее протекает заболевание, тем больше ИЭЛ. Эта особенность используется при проведении иммуногистохимического исследования, позволяющего определить преобладающий тип лимфоцитов. Особенно важен этот анализ, когда существует расхождение между данными серологического исследования и гистологической оценкой на стандартных участках.

Для чего используется исследование?

• Для определения вида и подвида опухоли, степени ее злокачественности и распространенности онкологического процесса;
• для дифференциальной диагностики пролиферативных заболеваний;
• для определения этиологического фактора, вызвавшего изменения в клетках;
• для подбора эффективной терапии;
• для оценки пролиферативной активности клеток опухоли;
• для оценки эффективности лечения;
• для диагностики рецепторного статуса при онкологическом заболевании (например, раке молочной железы, предстательной железы);
• для определения первичного очага опухоли;
• для выявления злокачественного потенциала пораженных клеток;
• для первичного отбора пациентов для диспансерного учета и дальнейшего обследования;

Когда назначается исследование?

• При дифференциальной диагностике дисплазии (высокой и умеренной степени) и начальной стадии рака шейки матки;
• при раке молочной железы, желудка, предстательной железы в целях определения чувствительности к различным видам терапии;
• при определении степени злокачественности и оценки прогноза заболевания;
• при оценке эффективности терапии;
• при поиске источника метастазов;
• при диагностике гастроинтестинальных стромальных опухолей (GIST) с помощью расширенной панели антител, включающей DOG1;
• при диагностике нейроэндокринных опухолей;
• при дифференциальной диагностике целиакии, сопровождающейся неясной гистологической картиной;
• при расхождении результатов серологического исследования и гистологической оценки.

Что означают результаты?

Референсные значения

Диапазон значений индивидуален для каждого заболевания, зависит от используемых антител.

Расшифровка результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом.

Проводится морфологическая оценка препарата (опухоли классифицируются согласно ВОЗ), дается описательный ответ с указанием оценки экспрессии антитела. ИХГ всегда следует использовать в качестве дополнения к морфологическому исследованию, результаты не следует интерпретировать изолированно.

Что может влиять на результат?

При некоторых заболеваниях есть факторы, которые могут влиять на результат. Так, при диагностике целиакии назначение безглютеновой диеты до исследования может приводить к получению ложноотрицательного результата.

Поставить точно диагноз "онкология" без проведения специальных исследований практически невозможно. В настоящее время медицина обладает такими возможностями. Поэтому если имеется подозрение на рак, то проводится иммуногистохимическое исследование. Рассмотрим, что собой представляет данный анализ, в каких случаях назначается и что позволяет выявить.

Сущность исследования

Под данным исследованием подразумевается изучение образца тканей под микроскопом. Их получают при помощи биопсии и предварительно обрабатывают специфическими антителами.

Онкологические заболевания давно находятся в поле зрения врачей и ученых. В ходе многочисленных исследований было установлено, что злокачественные клетки в процессе жизнедеятельности продуцируют специфические белки, которые называют антигенами. Они связываются с антителами, именно на этом основано иммуногистохимическое исследование, когда ткань пациента, взятая для изучения, после обработки тщательно изучается при помощи микроскопии.

Когда антитела взаимодействуют с раковыми клетками, то можно наблюдать явление флуоресценции. Это дает основания практически на 100 % быть уверенным, что имеет место онкология.

Сейчас уже разработаны и активно внедрены в медицинскую практику антитела практически ко всем новообразованиям.

Возможности исследования

Иммуногистохимическое исследование при раке позволяет:

• Распознать новообразование и определить его разновидность.
• Выяснить распространенность первичного очага по организму.
• При взятии биологического материала из вторичных очагов можно определить источник распространения метастазов.
• Исследование позволяет оценить эффективность терапии.
• При помощи анализа можно выяснить, на какой стадии развития находится раковая опухоль.
• Иммуногистохимическое исследование позволяет также выяснить скорость роста новообразований.

Данный метод исследования считается более информативным по сравнению с обычным гистологическим. Если использовать оба метода исследования, то можно получить полнейшую картину, поэтому на практике чаще всего врачи так и поступают.

Показания к проведению исследования

Исследовать при помощи этого метода можно практически все ткани человеческого организма, но чаще всего такой анализ назначают при подозрении на онкологию.

Исследование применяют:

1. Для определения первичных новообразований.
2. Для выявления метастазов.
3. Данный анализ помогает определить прогноз развития и протекания патологии.
4. Анализ служит одним из методов исследования рецепторов к ряду гормонов.
5. ИГХ-исследование позволяет обнаружить микроорганизмы.
6. Метод исследования применяют для выяснения чувствительности раковых клеток к химиотерапии и радиотерапии.

Преимуществом такого метода исследования является также отсутствие противопоказаний. Сложность может возникнуть только в том случае, если раковое образование расположено в труднодоступном месте.

Методика проведения анализа

Иммуногистохимическое исследование проводится в несколько этапов, первым из них является сбор биологического материала. Его получают путем биопсии или изъятия материала во время проведения операции.

Кусочек ткани помещают в формалин и направляют в лабораторию, где его подвергают изменениям:

1. Материал обезжиривают специальными составами и заливают парафином. В таком состоянии он может храниться практически вечно, поэтому при необходимости исследование можно повторять.
2. На следующем этапе получают тончайшие срезы — проводят микротомирование. Их размещают на специальных стеклах.
3. Приготовленные срезы обрабатывают растворами антител определенной концентрации. Использовать для обработки могут составы, содержащие разное количество антител. Какие из них вступят во взаимодействие с раковыми клетками, будет зависеть от разновидности опухоли.

Результаты исследования будут готовы только через одну или две недели.

Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы

Такой анализ просто незаменим, если есть подозрение на наличие раковых клеток в груди. Обязательно определение количества рецепторов эстрогена и прогестерона. При их повышении активизируется процесс роста злокачественных клеток.

ИГХ-исследование позволяет не только распознать онкологическое заболевание, но и определить его стадию. При помощи исследования врачи выясняют, показана ли гормональная терапия.

Опухоли, имеющие большую концентрацию гормонов, чаще всего вполне эффективно лечатся антигормональными препаратами.

Во время проведения анализа обязательно определяют показатель Ki-67, он помогает определить злокачественность процесса. Если иммуногистохимическое исследование молочной железы показывает Ki-67 до 15 %, то исход заболевания считается благоприятным. Если показатель доходит до 30 %, то без химиотерапии не обойтись, потому что опухоль растет довольно быстро. Отметка в 90 % чаще всего свидетельствует о неизбежности летального исхода.

Данный анализ назначается не только при подозрении на онкологию груди, но еще он оказывается довольно информативным, если:

• Имеется бесплодие.
• Обнаружены злокачественные образования матки.
• Наблюдаются патологические изменения в репродуктивной системе.

Иммуногистохимическое исследование эндометрия

Такой анализ проводится, если:

• Часто наблюдаются выкидыши.
• У женщины было несколько неудачных попыток ЭКО.
• Диагностирована хроническая форма эндометрита.

Данное исследование помогает выяснить, имеются ли клетки, мешающие зачатию естественным путем.

ИГХ-исследование тканей эндометрия назначается женщинам, у которых уже было несколько неудачных попыток искусственного оплодотворения.

Взятие тканей эндометрия проводится в разные дни цикла, которые назначает врач.

Интерпретация результатов анализа

Необходимо иметь в виду, что исследовать подготовленные образцы тканей имеет право только врач, имеющий сертификат, подтверждающий специальную подготовку по проведению анализов по методу ИГХ.

В заключении должно быть указано:

1. Показатели антител, к которым определена тропность исследуемой ткани.
2. Указывается разновидность раковых клеток и их количество.
3. Указываются выявленные антигены, которые помогают установить вид онкологии.

По результатам исследования нельзя ставить окончательный диагноз. Врач-онколог имеет право это сделать только после получения интерпретации всех диагностических процедур.

Таким образом, можно сделать вывод, что эффективно иммуногистохимическое исследование при раке молочной или других желез и других видах онкологии. Анализ дает исчерпывающую информацию и позволяет распознать начинающийся патологический процесс на клеточном уровне.

Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование молочной железы дает возможность изучать образцы тканей, которые медики взяли во время биопсии. Информативная и новая методика, позволяющая определить формирование злокачественной опухоли, если у врачей есть подозрения. Многие женщины после 45 лет сталкиваются с раком молочных желез. Благодаря исследованиям медики могут определить тип и характер заболевания.

Раковые клетки производят определенные белки, у которых есть связь с антителами. ИГХ позволяет изучить взаимодействие между ними. Во время исследования используются стандартные антитела. Учитывая определенные изменения при взаимодействии клеток, медики определяют структуру и форму злокачественного новообразования.

Опухоль для человеческого организма является чужеродной. Во время борьбы с ней в теле пациента вырабатываются антитела. Иммуногистохимия помогает обнаружить раковые клетки, определяет их структуру и строение.

Для врачей подобное исследование важно тем, что по результатам они подбирают максимально эффективное лечение пациентам. При помощи ИГХ можно определить:

• развитие опухолей;
• рецепторы стероидных гормонов;
• образование злокачественной опухоли, если первичные признаки очага отсутствуют;
• формирование новообразования без классификации;
• количество мембранного белка (HER2) в клетках молочной железы.

Результатами исследования занимается специалист онколог. Важно определить количество гормональных рецепторов в молочных железах. Чем больше показатели, тем опухоль спокойнее и медленнее растет. У пациента высокие шансы, чтобы полностью избавиться от рака на ранней стадии развития.

Гормональная терапия в таких ситуациях позволяет добиться положительного исхода на 80%.

Проведение исследования

Иммуногистохимия (ИГХ) при раке молочной железы осуществляется методом забора небольшого количества тканей новообразования. Биопсия проводится в месте, где врачи предполагают формирование злокачественных клеток. Перед процедурой врач отмечает маркером место ее проведения на груди женщины.

На исследование берутся также отсеченные ткани опухоли, которые были получены после хирургического вмешательства. Дальше диагностика проводится следующим образом:

1. Полученный материал отправляют в лабораторию.
2. Ткани помещают в специальную емкость, где находится формалин.
3. Их обезжиривают.
4. Добавляют жидкий парафин, чтобы получить блоки и информацию о строении, структуре клеток, тканей.
5. Срезают слой, толщина которого составляет 1 мм.
6. Укладывают на специально подготовленное стекло.
7. Для окрашивания среза используются препараты и антитела ИГХ.
8. Результаты исследования специалисты получают через 12 дней.

Для определения рака молочной железы применяются различные маркеры. Если результаты исследования показывают присутствие в тканях большого количества гормонов (прогестерона и эстрогена), опухоль прогрессирует. В большинстве случаев присутствуют уже метастазы. Средняя концентрация гормонов указывает на то, что злокачественное новообразование слабо развивается. У пациента есть шансы пройти эффективное лечение медицинскими препаратами и добиться положительного результата.

Исход будет благоприятный после применения гормональных средств, если маркер Ki-67 при онкологии груди находится в пределах 15-17%. О стремительном развитии опухоли говорит показатель, достигающий 35%. Врачи в такой ситуации назначают больным только химиотерапевтические препараты, которые смогут приостановить ее прогрессирование. Если показатели превышают 85%, больному невозможно помочь и избежать летального исхода.

О чем говорят результаты?

Иммуногистохимический метод анализа позволяет определить многочисленные факторы, связанные со злокачественным новообразованием. Речь идет:

• о видах и подвидах раковой опухоли;
• об источниках метастазирования;
• о площади поражения, на которую распространились раковые клетки по всему организму больного;
• об эффективности проводимого лечения пациентам с онкологией.

Исследования позволяют получить информацию, что касается стадии развития заболевания. Как быстро растет опухоль. Современные специалисты считают, что иммуногистохимический анализ является максимально информативным, если сравнивать его с другими привычными исследованиями при формировании рака молочных желез. Иногда врачам необходима именно гистология. В большинстве случаев проводятся оба анализа. Так специалисты получают больше информации о карциноме.

В медицине существуют информационные факторы. Они позволяют изучить поведение и реакцию опухоли на лечение.

Прогностические факторы

Показывают возможное поведение злокачественного новообразования в момент проведения диагностики. Терапия не влияет на показатели. Специалист получает информацию о том, как быстро прогрессирует рак молочной железы. По результатам он может определить оптимальный метод лечения для каждого пациента индивидуально.

Предсказывающие факторы

Изучение позволяет получить информацию о том, как раковые клетки отреагируют на выбранную методику терапии.

Прогностические и предсказывающие факторы могут быть систематизированы по отдельности. Но результаты исследования покажут схожие данные. При положительном раке молочной железы количество белка HER2 повышенное. Данные указывают на агрессивное протекание злокачественных процессов. В отдаленных органах присутствуют ранние метастазы.

Негативный результат свидетельствует о небольшом количестве мембранного белка в опухоли. Она не будет реагировать на применение медицинских препаратов во время лечения.

Расшифровка исследования

Иммуногистохимия позволяет изучить структуру взятого материала во время биопсии или после оперативного вмешательства. Присутствие определенных антител даст возможность специалистам установить вид злокачественного новообразования.

Интерпретацией и расшифровкой иммуногистохимического исследования занимается квалифицированный специалист – онколог. Врач должен подробно рассказать пациенту, на что указывает полученная информация. В результатах прописывается показатель Ki-67. Он показывает насколько агрессивная опухоль.

Во время исследований врачи изучают гормональный фон пациентки, который тесно связан с поведением злокачественного новообразования. Медики определяют площадь поражения патологическими процессами, скорость формирования метастаз.

Иммуногистохимический анализ – это такой метод диагностики, позволяющий определить стадию рака молочной железы, форму заболевания, а также степень распространения его. На основании полученных данных специалист назначает максимально подходящее лечение.

При стабильном гормональном фоне и неактивной опухоли женщине рекомендуют ограничиться приемом гормональных лекарств. Если рак молочной железы ведет себя агрессивно и активно развивается, показатель Ki-67 повышается. В данной ситуации врачи назначают больным более тяжелые химические препараты.

В здоровом организме клетки самостоятельно восстанавливаются и нормально делятся. Положительный анализ на присутствие мембранного белка (HER2) указывает, что рак прогрессирует. Злокачественная опухоль будет увеличиваться в объеме. Чтобы подавить ее распространение и рост специалисты назначают больным медикаментозную терапию.

Отрицательные результаты РМЖ с негативным показателем HER2 требуют применения более сильных химиотерапевтических препаратов. Лечение подбирает врач онколог, учитывая индивидуальные особенности пациента и протекание патологических процессов.

Иммуногистохимия представляет собой серьезный и сложный метод диагностики рака молочной железы. Медики во время исследований применяют многочисленные маркеры. Правильно расшифровать результаты может только квалифицированный доктор. В большинстве случаев при подтверждении развития рака у женщины, собирают целый врачебный консилиум. Мнение разных специалистов позволяет правильно и адекватно подобрать, также расписать тактику лечения злокачественной опухоли.