Minimālā pārliecinošā koncentrācija. Minimālās inhibējošās koncentrācijas noteikšana blīvā vidē
Metodes jutīguma noteikšanai pret pretmikrobu līdzekļiem. Minimālā inhibējošā koncentrācija (MIC). Sērijas atšķaidīšanas metode šķidrā vidē.
Kritēriji konkrētas zāles aktivitātei ir minimālā inhibējošā koncentrācija (MIC) ir viszemākā zāļu koncentrācija, kas kavē testa kultūras augšanu un minimālā baktericīda koncentrācija (MBK) - viszemākā zāļu koncentrācija, kas izraisa baktericīdu iedarbību.
Sērijas atšķaidīšanas metode šķidrā vidē
Sērijas atšķaidīšanas metode šķidrā vidē ļauj instalēt minimālā inhibējošā koncentrācija (MIC) un minimālā baktericīda koncentrācija (MBK) sagatavošana izolētajam patogēnam. Pētījumus var veikt dažādos barotnes tilpumos (1-10 ml). Izmantojiet šķidrās barotnes, kas atbilst patogēna uztura vajadzībām. Testa mēģenēs (parasti astoņas) sagatavo zāļu dubultu atšķaidījumu sēriju uz barības vielas. Koncentrācija tiek samazināta attiecīgi no 128 līdz 0,06 μg / ml (bāzes koncentrācija var mainīties atkarībā no zāļu aktivitātes). Vidējais barotnes tilpums katrā mēģenē ir 1 ml. Testa caurule, kurā ir tīra barotne, kalpo par kontroli. Katrai mēģenei pievieno 0,05 ml fizioloģiska šķīduma, kas satur 106 / ml mikrobu šūnas. Caurules inkubē 10-18 stundas 37 ° C temperatūrā (vai līdz brīdim, kad kontroles mēģenē parādās baktēriju augšana). Pēc noteiktā perioda rezultātus ņem vērā, mainot barotnes optisko blīvumu vizuāli vai nefelometriski. Jūs varat arī piemērot modificētu metodi, izmantojot barotni, kas papildināta ar glikozi un indikatoru. Mikroorganismu augšanu papildina barotnes pH izmaiņas un attiecīgi indikatora krāsa.
|
Vielu nosaukums |
Sliekšņa līmenis |
|---|---|
|
Amfetamīna grupa |
|
|
Amfetamīns |
|
|
Metamfetamīns |
|
|
Metilēndioksiamfetamīns (MDA) |
|
|
Citas amfetamīna grupas vielas |
|
|
Opiātu grupa |
|
|
Morfīns |
|
|
Kodeīns |
|
|
6-monoacetilmorfīns |
|
|
Benzodiazepīnu grupa |
|
|
Oksazepāms |
|
|
Diazepāms |
|
|
Nordiazepāms |
|
|
Midazolāms |
|
|
Fenazepāms |
|
|
Citas benzodiazepīnu grupas vielas |
|
|
Barbiturātu grupa |
|
|
Barbamils |
|
|
Etaminal nātrijs |
|
|
Citu grupu ķīmiskās vielas |
|
|
11-nor-Δ 9-tetrahidrokanabinolskābe (galvenais Δ 9-tetrahidrokanabinola metabolīts) |
|
|
Kokaīns un tā metabolīti |
|
|
Metadons un tā metabolīti |
|
|
Propoksifēns un tā metabolīti |
|
|
Buprenorfīns un tā metabolīti |
|
|
d-lizergīds (LSD, LSD-25) |
|
|
Fentanils un tā metabolīti |
|
|
Metakvalons |
|
|
Fenciklidīns |
|
Ar Veselības ministrijas rīkojumu apstiprinātās reibuma (alkoholisko, narkotisko vai citu toksisko) stāvokļa medicīniskās pārbaudes veikšanas kārtības pielikuma 2. tabula Krievijas Federācija (melnraksts), "Satura sliekšņa līmeņi narkotikas, psihotropās vielas, cits ķīmiskās vielas un to metabolīti, kas noteikti ar apstiprinošām analīzes metodēm. "
Piezīme: sliekšņa līmenis Vai minimālā vielas (tās metabolīta) koncentrācija bioloģiskajā objektā ir noteikta ar provizoriskas vai apstiprinošas analīzes metodēm, kuru atklājot testa rezultāts tiek uzskatīts par pozitīvu.
Faktiski līdzīga tabula ar nosaukumu " Sliekšņa līmeņi apstiprinošām urīna analīzes metodēm"tiek dota Valsts analītiskās un tiesiskās toksikoloģijas departamenta Centrālajā ķīmijas un toksikoloģijas laboratorijā. izglītības iestāde Krievijas Federācijas Veselības ministrijas I.M. Sečenova pirmā Maskavas Valsts medicīnas universitāte (TsKhTL GOU VPO First MGMU nosaukta I.M. Sečenova vārdā), datēta ar 2011. gada 30. augustu Nr. 179-25 / 12I, kur, izņemot visu citas norādītās ir fenobarbitāla (1 "000 ng / ml), citu barbiturātu grupas vielu (100 ng / ml) un kotinīna (100 ng / ml) koncentrācijas. Saskaņā ar šo CCTL GOU VPO Pirmo Maskavas Valsts medicīnas universitāti, kas nosaukta I. M. Sečenova vārdā, saskaņā ar ar 2. punktu Krievijas Federācijas Veselības un sociālās attīstības ministrijas 2006. gada 27. janvāra rīkojumā Nr. 40 "Par ķīmisko un toksikoloģisko pētījumu organizēšanu analītiskā diagnostika alkohola, narkotisko, psihotropo un citu klātbūtne cilvēka ķermenī toksiskas vielas", izstrādāja un apstiprināja prasības ķīmisko un toksikoloģisko pētījumu veikšanai, analītiski diagnosticējot narkotisko, psihotropo un citu toksisko vielu klātbūtni cilvēka ķermenī."
Jo īpaši saskaņā ar informatīvās vēstules 12. punktu, veicot transportlīdzekļu vadītāju medicīnisko pārbaudi, pārbaudot studentus, veicot ķīmiskos un toksikoloģiskos pētījumus, piesakoties no pilsoņiem, un citos likumā noteiktajos gadījumos, šķidruma izpēte mutes dobums (siekalas) ir nepieņemama, jo tā neļauj droši noteikt narkotisko, psihotropo un citu toksisko vielu klātbūtni cilvēka ķermenī. Kontrolējamās vielas perorālajā šķidrumā (siekalās) var noteikt laika intervālā, kas nepārsniedz vairākas stundas no lietošanas brīža.
Prasības tehniskiem līdzekļiem, ko izmanto narkotisko, psihotropo un citu toksisko vielu (to metabolītu) noteikšanai urīna paraugos sākotnējo ķīmisko un toksikoloģisko pētījumu laikā (1. pielikums Metodiskie ieteikumi: Noteikumi ķīmisko un toksikoloģisko pētījumu veikšanai par studentu klātbūtni ķermenī kopumā izglītības iestādes un profesionālās izglītības organizācijas, kā arī izglītības organizācijas augstākā izglītība agrīnai narkotisko un psihotropo vielu, narkotisko, psihotropo un citu toksisko vielu (to metabolītu) nelegālas lietošanas atklāšanai / Izstrādātājs: Veselības ministrijas Analītiskās un tiesiskās toksikoloģijas galvenā ārštata speciālista rediģēta laboratorijas dienesta speciālistu un organizāciju apvienība "Laboratorijas medicīnas federācija" Krievija, ķīmijas zinātņu doktors, profesors B.N. Izotovs un galvenais ārštata klīniskais speciālists laboratorijas diagnostika Krievijas Veselības ministrija, MD, profesors A.G. Kočetovs // Maskava, 2015)
|
Vielu grupu nosaukums |
Koncentrācija (ng / ml) |
|---|---|
|
Opiāti (6 monoacetilmorfīns, morfīns, kodeīns, desomorfīns utt.) |
|
|
Kanabinoīdi |
|
|
Fenilalkilamīni (amfetamīns, metamfetamīns, mefedrons utt.) |
|
|
Metadons |
|
|
Benzodiazepīni |
|
|
MDMA |
|
|
Kokaīns |
|
|
Barbiturāti |
|
|
Kotinīns |
|
|
Sintētiskie kanabinoīdi |
|
|
Katinoni |
|
|
Etilglukuronīds |
Prasības tehniskajiem līdzekļiem, ko izmanto narkotisko, psihotropo un citu toksisko vielu (to metabolītu) noteikšanai urīna paraugos, veicot apstiprinošus ķīmiskos un toksikoloģiskos pētījumus (iepriekšminētā avota pielikums Nr. 2)
|
Vielu grupu nosaukums |
Koncentrācija (ng / ml) |
|---|---|
|
Amfetamīna grupa |
|
|
Amfetamīns |
|
|
Metamfetamīns |
|
|
Metilēndioksiamfetamīns (MDA) |
|
|
Metilēndioximetamfetamīns (MDMA) |
|
|
Citas amfetamīna grupas vielas |
|
|
Opiātu grupa |
|
|
Morfīns |
|
|
Kodeīns |
|
|
6-monoacetilmorfīns |
|
|
Citas opija grupas vielas |
|
|
Benzodiazepīnu grupa |
|
|
Oksazepāms |
|
|
Diazepāms |
|
|
Nordiazepāms |
|
|
Midazolāms |
|
|
Fenazepāms |
|
|
Citas benzodiazepīnu grupas vielas |
|
|
Barbiturātu grupa |
|
|
Fenobarbitāls |
1000 |
|
Barbamils |
|
|
Etaminal nātrijs |
|
|
Citas barbiturātu grupas vielas |
|
|
Citu grupu vielas |
|
|
11-nor-Δ9-tetrahidrokanabinolskābe (galvenais Δ9-tetrahidrokanabinola metabolīts) |
|
|
Benzoilekgonīns (kokaīna metabolīts) |
|
|
Metadons |
|
|
Propoksifēns |
|
|
Buprenorfīns |
|
|
LSD |
|
|
Fentanils |
|
|
Metakvalons |
|
|
Fenciklidīns |
|
|
Kotinīns |
|
|
Sintētiskie kanabinoīdi |
|
|
Katinoni |
|
|
Etilglukuronīds |
|
Tajā pašā laikā, veicot aizstāvību administratīvo pārkāpumu gadījumos, kas minēti Krievijas Federācijas Administratīvā kodeksa 12.8. Un 12.27. Panta 3. daļā, kā arī gadījumos, kas saistīti ar kriminālatbildību, vadot transportlīdzekli reibumā (Krievijas Federācijas Kriminālkodeksa 264. un 264. panta 1. punkts), nevajadzētu aizmirst, ka ka administratīvā atbildība iestājas narkotisko vai psihotropo vielu klātbūtnes gadījumā cilvēka ķermenī neatkarīgi no to koncentrācijas cilvēka ķermenī, asinīs un urīnā.
Ņemot vērā iepriekš minēto, narkotisko vielu identificēšana narkotisko vielu, ķīmisko un toksikoloģisko pētījumu, tiesu ķīmisko pētījumu ietvaros narkotikas, psihotropās un toksiskās vielas, kā arī vielas, kas izraisa intoksikāciju, pat tā sakot, "izmantotās metodes noteikšanas robeža" ir pamats vadītāja piesaistīšanai transportlīdzeklis uz administratīvo vai kriminālatbildību saskaņā ar attiecīgajiem Krievijas Federācijas kodeksa par administratīvajiem pārkāpumiem un / vai Krievijas Federācijas kriminālkodeksa pantiem.
Informācijai - " "
7. Jēdzienu būtība ir minimālā inhibējošā (nomācošā) koncentrācija un minimālā baktericīdā koncentrācija.
Minimālā inhibējošā koncentrācija (MIC)- minimālā ķīmijterapeitiskās vai antiseptiskās vielas koncentrācija, kas izraisa Pilnīga apspiešanaredzams ar neapbruņotu aci Izaugsmemikroorganismu uz barotnēm standarta eksperimentālos apstākļos.
Mēra μg / ml vai vienībās. darbības. To nosaka, sējot testa kultūru uz cietas vai šķidras barotnes, kas satur dažādas zāļu koncentrācijas.
Minimālā baktericīdā koncentrācija (MBC)- minimālā ķīmijterapeitiskā vai antiseptiskā līdzekļa koncentrācija, kas izraisa Pilnīga iznīcināšanabaktērijas standarta eksperimentālos apstākļos.
Mēra μg / ml vai vienībā. darbības. To nosaka, sējot testa kultūru uz cietas vai šķidras barības vielas, kas satur dažādas zāļu koncentrācijas. Lai to atšķirtu no MIC, no sterilām zonām vai caurspīdīgām mēģenēm, inokulācija tiek veikta uz barotnēm bez zālēm (augšanas parādīšanās norāda uz statisku efektu, tās neesamība norāda uz cidal).
MBC un MIC lieto ķīmijterapijā un antiseptiskos līdzekļos, lai izvēlētos konkrētam pacientam efektīvas zāles un devas.
8. Patogēna jutīguma un rezistences jēdzienu būtība, post-antibiotiku iedarbība.
Patogēnu jutība- rezistences pret holesterīnu mehānismu trūkums; kamēr patogēna reprodukcija tiek nomākta ar vidējo rādītāju terapeitiskā deva2-4 reizes pārsniedzot minimālo inhibējošo koncentrāciju.
Patogēnu rezistence- rezistences pret holesterīnu mehānismu klātbūtne; patogēna augšanu nenomāc zāļu koncentrācija, kurai ir toksiska iedarbība in vivo.
Postantibiotiskais efekts- pastāvīga baktēriju vitālās aktivitātes kavēšana pēc to īslaicīgas saskares ar antibakteriālām zālēm.
9. Ķīmijterapijas līdzekļu selektīvās toksicitātes noteicošie faktori.
1) CS uzkrājas mikrobu šūnās daudzkārt lielākā koncentrācijā nekā zīdītāju šūnās
2) CS iedarbojas uz struktūrām, kas atrodas tikai mikrobu šūnā (šūnu siena, II tipa DNS girāze) un nav zīdītāju šūnās
3) CS iedarbojas uz bioķīmiskiem procesiem, kas notiek tikai mikrobu šūnās un nav zīdītāju šūnās.
10. Farmakodinamisko un ķīmijterapeitisko īpašību atšķirības būtība.
1. Farmakodinamiskā terapija darbojas funkcionālo sistēmu arhitektūras līmenī, tās ietekme parasti ir atgriezeniska. Ķīmijterapijai visvērtīgākie līdzekļi ir tie, kuriem ir visneatgriezeniskākā iedarbība.
2. Farmakodinamiskie līdzekļi izraisa pakāpenisku ķermeņa sistēmas reakciju, ķīmijterapijas līdzekļiem vēlamākā ietekme ir "viss vai nekas".
3. Ķīmijterapijai ir etiotropiska stratēģija, kuras mērķis ir iznīcināt patogēnu vai pārveidotās ķermeņa šūnas, un farmakodinamiskā terapija var būt gan etiotropiska, gan patoģenētiska.
11. Racionālas ķīmijterapijas pamatprincipi.
1. Patogēnam jābūt jutīgam pret AB
Vislabākā piedāvājuma noteikums ir atsauces tabulas, ņemot vērā antibakteriālās jutības reģionālās populācijas īpašības.
2. AB uzmanības centrā jāizveido terapeitiska koncentrācija.
3. Pārsvarā atbilstoša dozēšanas shēma atkarībā no:
ü patogēns
ü infekcijas klīniskās gaitas dinamika
ü infekcijas lokalizācija
ü infekcijas kursa ilgums un raksturs (akūta, hroniska vai baktēriju pārvadāšana)
4. Optimāls pretmikrobu ķīmijterapijas ilgums (piemērs: streptokoku faringītu var izārstēt 10 dienu laikā, akūtu nekomplicētu gonokoku uretrītu 1-3 dienu laikā, akūtu nekomplicētu cistītu 3 dienu laikā).
Lai novērstu nevēlamas reakcijas, superinfekcijas vai rezistences veidošanos, ārstēšanas ilgumam jāatbilst patogēna izskaušanas periodam.
5. Ņemot vērā pacienta faktorus:
ü alerģiska anamnēze, imūnkompetence
ü aknu un nieru darbība
ü AB pielaide plkst iekšķīgi; atbilstību
ü stāvokļa smagums
ü vecums, dzimums, grūtniecība vai zīdīšana, lietojot perorālos kontracepcijas līdzekļus
ü blakusparādības
6. Kombinēta antibiotiku terapija.
Principā šī procedūra ir līdzīga MIC noteikšanai šķidrumā "Barotne. Sagatavojiet vairākus Petri trauciņus ar pakāpeniski atšķaidītu barotnē izšķīdinātu antibiotiku. Pievienojiet izkausētu agaru, atdzesējiet plāksnes, lai sacietētu agars. Uz barotnes virsmas svītriņo vienas vai vairāku baktēriju kultūras. inkubācija termostatā vajadzīgo laiku nosaka minimālo antibiotiku koncentrāciju, pie kuras tiek kavēta baktēriju augšana. Viena no šīs metodes priekšrocībām salīdzinājumā ar titrēšanu šķidrā vidē ir tā, ka var inokulēt dažādas vienas plāksnes daļas. dažādi vai baktēriju celmi. Rezultātā vienā eksperimentā var noteikt vairāku baktēriju MIC vērtības (2.2. Attēls).
- ANTIBIOTISKĀS DARBĪBAS NOTEIKŠANA
Šo metodi izmanto, lai noteiktu antibiotiku koncentrāciju šķīdumā. Tas ir šāds. Diskus, kas izgatavoti no filtrpapīra, kas samitrināts ar antibiotikas testa šķīdumu, novieto uz agara barotnes virsmas, kas satur atšķaidītu baktēriju suspensiju. Pēc atbilstošas \u200b\u200binkubācijas agara virsma, kas sākotnēji bija caurspīdīga, izaugušo baktēriju gaismas izkliedes dēļ kļūst duļķaina. Daļēji caurspīdīgas zonas paliek tikai ap filtrpapīra diskiem, jo \u200b\u200bantibiotika izkliedējas agarā un kavē baktēriju augšanu. Ja šo zonu diametru nosaka stingri standarta apstākļos, tad tā būs atkarīga no antibiotiku koncentrācijas logaritma. Izmantojot zināmās antibiotiku koncentrācijas, tiek konstruēta standarta līkne, no kuras var noteikt antibiotiku koncentrāciju nezināmos šķīdumos (2.3. Attēls). Dažreiz filtrpapīra disku vietā tiek izmantoti mazi dobie cilindri, kas novietoti uz agara barotnes virsmas un satur antibiotiku šķīdumu.
- FAKTORI, KAS IETEKMĒ UZ DEFINĪCIJU
Antibiotiku aktivitāte in vitro ir atkarīga no noteikšanas apstākļiem (2.1. Tabula). Aktivitātes noteikšanu ietekmē tādi faktori kā barotnes sastāvs, sējmateriāla blīvums un baktēriju šūnu skaits sējumā (sējmateriāla lielums).
/
2.1. Tabula. Faktori, kas ietekmē antibiotiku aktivitātes noteikšanu
Pārbaudes organisms
Vidējs sastāvs (pH, joni, serums, antagonisti)
Sējmateriāla lielums un blīvums (populācijas neviendabīgums, inaktivācijas mehānismi, antagonistu vielu uzņemšana)
Inkubācijas apstākļi (laiks, temperatūra, aerācija)
A. VIDES SASTĀVS
Apskatīsim kā piemēru antibiotiku, kas kavē vienas no aminoskābēm biosintēzi. Ja antibiotiku pārbauda barotnē bez šīs aminoskābes, tad šķiet, ka tai ir ļoti augsta aktivitāte, citiem vārdiem sakot, ar zemu MIC. Pārbaudot "vidē, kurā ir aminoskābe, kuras sintēzi tas nomāc un kuru baktērijas var iegūt no barotnes, antibiotika izrādīsies neaktīva.
Papildus šīm specifiskajām sekām bieži tiek novērota mazāk specifiska ietekme uz vidi, kas nav tieši saistīta ar darbības mehānismu vai antibiotikas ķīmisko struktūru. Īpaši interesants gadījums ir seruma klātbūtne barotnē. MIK noteikšanas laikā to ievada barotnē, lai radītu fizioloģiskus apstākļus, kas līdzinās asinīs esošajiem. Daudzas antibiotikas saistās ar seruma olbaltumvielām (īpaši albumīnu), kā rezultātā tiek samazināts brīvo antibiotiku molekulu skaits, kas var iekļūt baktēriju šūnās. Antibiotiku saistīšanās ar seruma olbaltumvielām parasti korelē ar noteiktu molekulas lipofilitāti.
Acīmredzot nosacījumi MIK noteikšanai šķidrā vidē atšķiras no apstākļiem blīvā vidē tikai tāpēc, ka blīvā vidē ir agars. Agars, kas satur S03-rpynpy, var adsorbēt antibiotiku, mainot tā izkliedēšanas spēju, vai adsorbēt izšķīdušo skābekli un dažus barības vielas komponentus. Tāpēc nav pārsteidzoši, ka antibiotikas MIC noteiktai baktērijai ir atkarīgs no tā, vai to nosaka šķidrumā vai cietā vidē, pat ja šīs divas barotnes, izņemot agara klātbūtni vai neesamību, ir identiskas pēc sastāva. Jāatceras arī, ka šūnu fizioloģija var atšķirties atkarībā no tā, vai tās aug atsevišķi šķidrumā vai kā kolonijas uz blīvas vides virsmas.
Barotnes pH ļoti spēcīgi ietekmē antibiotiku aktivitāti. Papildus nelielām sekām, piemēram, pH ietekmei uz mikroorganismu augšanas ātrumu un līdz ar to
faktiski, netieši ietekmējot viņu uzņēmību, pH vērtībai ir ļoti spēcīga un tieša ietekme uz zāļu spēju iekļūt baktēriju šūnā. Piemēram, vielas nejonizētā veidā labāk izkliedējas caur šūnu steiku un plazmas membrānu nekā vielas jonizētā formā. Tādējādi barotnes pH, nosakot bāzes vai skābes antibiotikas jonizācijas pakāpi, var tieši ietekmēt tā iekļūšanas ātrumu baktērijās un līdz ar to arī tās efektivitāti.
B. BAKTERIĀLO INOKULU Blīvums un lielums
Inokulāta blīvums ir inokulēto baktēriju skaits attiecībā pret to tilpumu, kurā tās aug. Parasti to izsaka kā šūnu skaitu uz ml kultūras. Sējmateriāla izmērs ir kopējais inokulēto baktēriju skaits. Daudzu antibiotiku MIC neietekmē parasti izmantotā sējmateriāla blīvuma izmaiņas (103-106 baktērijas / ml). Patiešām, pat ar ļoti zemas koncentrācijas antibiotikas, piemēram, 0,01 μg / ml, antibiotiku molekulu skaita un baktēriju šūnu skaita attiecība joprojām ir ļoti augsta (pie antibiotiku koncentrācijas ar molekulmasu 1000, kas vienāda ar 0,01 μg / ml, 1 ml šķīduma satur ~ 1012 molekulas). Tomēr ir daži izņēmumi. Piemēram, bieži uz ārējās virsmas adsorbējas daudz antibiotiku molekulu. baktēriju šūna... Ja baktēriju blīvums ir liels, brīvo antibiotiku molekulu skaits, kas var iekļūt šūnā, ievērojami samazinās. Turklāt, lai kavētu vienas šūnas augšanu, bieži vajadzīgs liels skaits antibiotiku molekulu. Augot baktērijām, tās sintezē un izdalās barotnē fermentus, kas var iznīcināt antibiotiku (piemēram, β-laktamāzes, kas iedarbojas uz β-laktāma antibiotikām; skat. 4. nodaļu). Iznīcinātās antibiotikas daudzums ir atkarīgs no fermenta koncentrācijas barības vielā un tāpēc ir atkarīgs no sējmateriāla lieluma.
No pirmā acu uzmetiena šķiet, ka, ja baktēriju kultūras blīvums ir vienāds, nav svarīgi, vai antibiotiku aktivitāte tiek pētīta mazos apjomos, piemēram, 0,25 ml vai mazāk miniaturizētās sistēmās, vai 10 ml tilpumā parastās laboratorijas mēģenēs. Ja visas baktērijas populācijā ir identiskas, rezultātos nebūs atšķirību.
Kad kopējais baktēriju skaits inokulātā ir ļoti augsts, visticamāk, barotnē būs šūnas, kas ir mazāk uzņēmīgas pret antibiotiku. Visu uzņēmīgo šūnu augšana tiks nomākta, tomēr mazāk uzņēmīgi (principā tā var būt pat viena šūna) vairosies, un pēc 18 stundu inkubācijas
2.2. Tabula. Faktori, kas ietekmē dažu antibiotiku aktivitāti
baktēriju populācija ar augstu blīvumu. MIC vērtības ievērojamā mainība ar inokulēto šūnu skaita izmaiņām parasti norāda uz augstu pret antibiotikām rezistentu mutantu biežumu (4. nodaļa). Rezistentu mutantu sastopamība dažādām antibiotikām nav vienāda. Klīnikā lietoto antibiotiku gadījumā tas svārstās no 10 ~ 7 līdz 10-10.
Šajā sadaļā nav aprakstīti visi faktori, kas var ietekmēt antibiotikas aktivitāti pret konkrētu baktēriju (2.2. Tabula). Tāpēc, lai baktēriju augšanas inhibīciju izmantotu antibiotiku aktivitātes kvantitatīvai noteikšanai un iegūtu datus, kurus var reproducēt dažādās laboratorijās, ir nepieciešams, lai visi apstākļi būtu precīzi definēti un pēc iespējas standartizēti.
Analīze par baktēriju spēju vairoties un augt uz barotnēm, kuru koncentrācija samazinās zāļu viela, ļauj noteikt minimālo antibiotikas (MIC) inhibējošo koncentrāciju, inhibējot baktēriju lomu in vitro (3. tabula (vet7)). Šīs devas lielums nosaka zāļu vielas izvēli, kas spēj sasniegt līdzīgas koncentrācijas vērtības in vivo, un ir pamats, lai salīdzinātu organisma relatīvo jutīgumu attiecībā pret citām zālēm. Tiek uzskatīts, ka, lai nodrošinātu iedarbības efektivitāti, zāļu koncentrācijai infekcijas fokusā jābūt vismaz vienādai ar antibiotikas minimālās inhibējošās koncentrācijas vērtību. No otras puses, lai nodrošinātu adekvātu audu koncentrāciju, zāļu koncentrācijai plazmā parasti būs jābūt lielākai. Tomēr nepamatots pretmikrobu zāļu devu palielinājums, lai panāktu minimālu antibiotiku devu, kas in vitro kavē noteikta veida baktēriju augšanu, var izraisīt zāļu uzkrāšanos saņēmēja ķermenī toksiskās devās.
“Kritiskā MIC” konkrētai narkotikai ir visaugstākā pamatoti drošā zāļu koncentrācija, ko var sasniegt ar klīniski pieņemamu devu un zāļu ievadīšanas veidu (3. tabula (vet7)). MIC ir atkarīgs no konkrētā baktēriju kultūras veida un īpašā zāļu veida. Tajā pašā laikā kritiskā MIC ir raksturīga konkrētam saņēmējam un noteiktai zāļu vielai. Tādējādi kritiskais MIC visiem organismiem būs vienāds (3. tabula (vet7)). Kritiskās koncentrācijas vērtība konkrētam organismam var atšķirties atkarībā no dzīvnieka veida (jutības atšķirību vai izplatības rakstura dēļ) narkotiku) un īpašu laboratoriju. Lai iegūtu kritiskās vērtības, kas izmantotas tur veiktajos pētījumos, jākonsultējas ar laboratoriju, kas sniedz datus par kultivēšanas metodēm un uzņēmību pret antibiotikām.
Pamatojoties uz in vitro atšķaidīšanas datiem, baktērijas tiek klasificētas kā jutīgas (S) pret konkrētām zālēm, ja MIK ir ievērojami zemāka par šī rādītāja kritisko vērtību. Patogēno mikroorganismu augšana ar vidēju (MS) vai vidēju (IS) jutības vērtību tiek kavēta, kad zāļu koncentrācija tuvojas kritiskajai MIC vērtībai. Šādas baktērijas var izraisīt negatīvas pacienta ķermeņa reakcijas vai nekādā veidā neietekmēt viņu. Rezistento (R) baktēriju MIC pārsniedz kritisko minimālo devu. Maz ticams, ka tiks sasniegta tāda zāļu koncentrācijas faktiskā vērtība pacienta ķermenī, kas ietekmē noteiktu mikroorganismu. Šādos gadījumos zāļu uzkrāšanās bīstamība toksiskās devās var arī atsvērt iespējamo terapijas ieguvumu. Jaunās paaudzes antibiotiku minimālās devas, kas kavē baktēriju augšanu, kritisko vērtību dažos gadījumos ir grūtāk noteikt pārejas dēļ uz profesionālu elastīgu devu diapazonu marķēšanu.
Zāles ir jāizvēlas tā, lai, lietojot tās saskaņā ar shēmu, kas novērš vielu uzkrāšanos toksiskās devās, ir iespējams sasniegt zāļu ierobežojošo koncentrāciju plazmā, ievērojami pārsniedzot MIC. Daudzas baktērijas būs uzņēmīgas pret konkrētu zāļu iedarbību koncentrācijā, kas krietni zem kritiskās minimālās devas. Starpība starp kritisko vērtību un sava nozīme MIC var izmantot, lai salīdzinātu dažādu pretmikrobu zāļu relatīvo efektivitāti. Piemēram, amikacīnam kritiskā vērtība ir 32 µg / ml, tāpēc E. coli ar MIC 2 µg / ml ir salīdzinoši jutīgāka pret amikacīnu nekā E. coli ar MIC 16 µg / ml. Abas sugas jāuzskata par uzņēmīgām (lai gan otro sugu var uzskatīt par vidēji jutīgu), tomēr šķiet, ka pirmās sugas baktēriju augšana ir vairāk kavēta. Ja vienas un tās pašas E. coli sugas MIC ar 2 μg / ml attiecībā pret amoksicilīnu MIC ir 16 μg / ml (ar kritisko vērtību 32 μg / ml), tad acīmredzot šī mikroorganisma augšanu būs vieglāk kavēt, izmantojot amikacīns, nevis amoksicilīns, jo amikacīna MIC vērtība ir tālāk par kritisko MIC vērtību nekā amoksicilīna MIC vērtība.
Lai gan atšķirības starp MIC vērtībām konkrētai baktēriju sugai un noteiktai zāļu vielai (16 vai 32) var šķist diezgan lielas (it īpaši zāļu maksimālās koncentrācijas plazmā kontekstā), šī atšķirība atbilst tikai vienam šķīdumam mēģenē. Šis ir jutīguma datu pārvērtēšanas bīstamības piemērs. Ja noteikta organisma MIC ir pietiekami tuvu kritiskajai vērtībai, tad iespējamo interpretācijas neatbilstību dēļ šim mikroorganismam vienā laboratorijā var piešķirt jutīguma līmeni "S" vai "MS", bet citā - "R". Šādas iespējamās neatbilstības novērtējumā ir viens no iemesliem, kādēļ jāizvairās no tādu zāļu lietošanas, kurām noteiktam organismam ir jutība "MS" (vai ja MIC vērtība ir tuvu kritiskajai), ja vien nevar samazināt zāļu koncentrāciju infekcijas vietā. daudz augstāka nekā MIC vērtība, kas noteikta ar in vitro analīzi. Labs piemērs infekciju ārstēšanai var būt zāļu izdalīšanās caur nierēm urīnceļi vai ar žulti izdalītu zāļu lietošana infekcijas ārstēšanai žults ceļu... Atsevišķu ārstniecisko vielu uzkrāšanās leikocītos (fluorhinoloni, makrolīdi) arī var izraisīt zāļu koncentrāciju audos, kas ievērojami pārsniedz MIC (vai kritisko MIC vērtību), neskatoties uz zemāku koncentrāciju plazmā.
Baktēriju MIC var mainīties ar sekojošām infekcijām, ko izraisa vienas sugas baktērijas, un tas var mainīties arī pašā infekcijas slimības procesā. MIC vērtības pieaugums var vienkārši atspoguļot atšķirīgu pieeju testa rezultātu novērtēšanai (it īpaši, ja atšķirības tiek atklātas tikai atšķaidītā veidā in vitro), bet to var uzskatīt arī par rezistences pret konkrētu zāļu attīstību sekas. Šādos gadījumos pretmikrobu terapijas kursu var mainīt, lietojot papildu zāles vai pārejot uz jaunu, vairāk efektīvas zāles... Polimikrobu infekciju gadījumā konkrētās zāles MIC, iespējams, būs atšķirīgas katrai inficējošai baktērijai. Tiek uzskatīts, ka ir vieglāk nomākt baktēriju augšanu ar zemu MIC vērtību attiecībā uz konkrētām zālēm nekā mikroorganismu augšanu ar augstāku augsta vērtība MIC tai pašai zāļu vielai.