HIV infekcijas diagnostika. P24 antigēns, kas ir p24 analīze
HIV inficēto personu identificēšanas nozīmīgums infekcijas sākuma stadijā ir saistīts ar nepieciešamību veikt efektīvāku epidemioloģisko apsekojumu, savlaicīgi organizēt nepieciešamos preventīvie pasākumi kontaktpersonu vidū, kā arī iespējamā pielietošana īsa cikla pretretrovīrusu terapija, lai samazinātu vīrusu slodzi, lai uzlabotu prognozi. Savlaicīga pacienta informēšana par infekciju palīdz samazināt slimības pārnešanas risku un viņa iespējamo dalību ziedošanā.
HIV infekcijas diagnozi pirms imūnblotēšanas (IB) pozitīva rezultāta parādīšanās apstiprina p24 antigēna un / vai HIV nukleīnskābes noteikšana pacienta asins serumā.
P24 antigēna noteikšana, izmantojot ar enzīmu saistītu imūnsorbcijas testu (ELISA), ir vienkāršs un ekonomisks veids, kā pierādīt vīrusa proteīna klātbūtni pacienta asinīs intensīvas vīrusa replikācijas dēļ pirmajās nedēļās pēc inficēšanās. P24 antigēna tests ir pieejams laboratorijām ar ikdienas ELISA iespējām. Salīdzinot ar vīrusa slodzes noteikšanu ar polimerāzes ķēdes reakcijas metodi, tas ir lētāks un darbietilpīgāks. Neskatoties uz to, ka infekcijas noteikšanas stratēģija seronegatīvajā periodā ir zināma, šis tests vēl nav iekļauts HIV diagnosticēšanas algoritmā. Ir zināms, ka vislielākais p24 noteikšanas procents tiek novērots serumos ar apšaubāmiem IB rezultātiem. Tomēr ir pierādīts, ka testa sistēmām ar standarta analītisko jutības slieksni (10 pg / ml) ir nepietiekama konstatētā p24 diagnostiskā jutība un paredzamā vērtība iekļaušanai ikdienas diagnostikas procesā. Šajā sakarā liela interese ir p24 antigēna ar paaugstinātu analītisko jutību testa sistēmas izstrāde un ieviešana.
Darba mērķis ir novērtēt HIV p24 antigēna noteikšanas prognostisko nozīmi, izmantojot testa sistēmas ar dažādiem sliekšņiem analītiskā jutība personām ar apšaubāmiem IB rezultātiem.
Retrospektīvā serumu pētījumā ar nenoteiktu rezultātu antivielām pret HIV IB, izmantojot p24 antigēna testa sistēmu ar analītiskās jutības slieksni 0,5 pg / ml, atklājās 50% inficēto pacientu un testa sistēmas izmantošana, kas atklāj 8 pg / ml - 22,9%. Papildu reaģentu komplekta izmantošana imūnkompleksa iznīcināšanai ļauj palielināt p24 antigēna noteikšanu līdz 55,3%. HIV infekcijas klātbūtnes prognozēšanas vērtība, papildus pārbaudot p24 antigēnu, bija 91,7-96%. Papildu HIV p24 antigēna testa ar analītisko jutību 0,5 pg / ml ieviešana HIV diagnostikas algoritmā ļauj apstiprināt HIV diagnozi agrīnā stadija slimības vismaz 13% gadījumu personām ar neskaidru IB rezultātu. (Skatīt rakstu: Neshumaev D.A. et al. "HIV p24 antigēna noteikšanas paredzamā vērtība, izmantojot testa sistēmas ar paaugstinātu analītisko jutību").
"Klīniskā laboratorijas diagnostika", 2009, Nr. 2, lpp. 40. – 42.
HIV infekcijas klīniskā un laboratoriskā diagnostika ir trīs virzieni:
- HIV infekcijas fakta konstatēšana, HIV infekcijas diagnosticēšana.
- Posma definīcija klīniskā gaita slimības un sekundāro slimību identificēšana.
- Slimības klīniskās norises progresēšanas prognozēšana, ārstēšanas efektivitātes un pretretrovīrusu zāļu blakusparādību laboratoriska uzraudzība.
1. HIV infekcijas noteikšana, HIV infekcijas diagnosticēšana
HIV infekcijas noteikšanai tiek izmantoti šādi specifiski rādītāji: antivielas pret HIV, HIV antigēni, HIV RNS un provīrusa DNS. Antivielas pret HIV nosaka ar enzīmiem saistītu imūnsorbentu testu (ELISA) vai imūnblotēšanu, kas būtībā ir ELISA veids. HIV antigēnus (olbaltumvielas) nosaka ar ELISA metodi. Ar polimerāzes ķēdes reakcijas (PCR) un bDNS molekulāri ģenētisko metožu palīdzību var noteikt HIV RNS un provīrusa DNS. Papildu nukleīnskābju hibridizācijas metodes ar specifiskām DNS zondēm izmantošana ļauj pārbaudīt PCR laikā iegūto DNS sekvenciju specifiskumu. PCR jutība ir vīrusu gēnu noteikšana vienā no pieciem tūkstošiem šūnu.
Primārās infekcijas gadījumā tiek novērota šāda HIV marķieru dinamika inficēto cilvēku asinīs. Pirmajā mēnesī replikatīvā procesa aktivizācijas rezultātā strauji palielinās vīrusu slodze (HIV RNS saturs plazmā), pēc tam vīrusa izplatīšanās un mērķa šūnu masīvas infekcijas dēļ asinīs un limfmezglos kļūst iespējams noteikt provirālo DNS. Fakts, ka tiek konstatēta mērķa šūnas genomā integrēta provīrusa DNS, ir ārkārtīgi diagnosticējoša.
Vīrusu slodze atspoguļo replikatīvā procesa intensitāti inficētajās šūnās. Primārās infekcijas periodā vīrusu slodzes līmenis ir atšķirīgs, ja inficējas ar dažādiem HIV apakštipiem, taču tā izmaiņu dinamika ir aptuveni vienāda. Tātad, inficējoties ar B apakštipu, piemēram, ja pirmajā mēnesī pēc inficēšanās vīrusu slodze ir 700 kopijas / ml, tad 2. mēnesī samazinās līdz 600, trešajā - līdz 100, ceturtajā - līdz 50 kopijas / ml. Šāda dinamika tiek novērota, ņemot vērā specifisko antivielu pret HIV saturu asinīs. Provirālās DNS saturu HIV inficēto pacientu asins mononukleārajās šūnās raksturo relatīva nemainība pirmajos 6 mēnešos ar nelielām dažu apakštipu svārstībām. Tādējādi RNS un DNS slodzes nav identiskas.
Inkubācijas stadijā kādu laiku neveidojas specifiskas antivielas pret HIV tādā daudzumā, kas būtu pietiekams, lai noteiktu esošo laboratorijas metodes... Pirms antivielu reģistrēšanas ļoti īsu laiku tiek novērots Nef proteīna, kas nomāc replikācijas procesu, un strukturālā proteīna p24 parādīšanās asinīs. P24 antigēnu asinīs var noteikt ar enzīmu imūnsorbcijas testa metodi jau 1-2 ped pēc inficēšanās un noteikt līdz 8. nedēļai, pēc tam tā saturs strauji samazinās. Turklāt HIV infekcijas klīniskajā gaitā p24 olbaltumvielu saturs asinīs palielinās otro reizi. Tas attiecas uz AIDS veidošanos. Brīvo (ar antivielām nesaistītu) p24 pamatproteīnu pazušana asinīs un specifisku antivielu parādīšanās pret HIV olbaltumvielām iezīmē serokonversijas sākumu (9.6. Att.).
Virēmija un antigenēmija izraisa specifisku IgM antivielu veidošanos (anti-p24, anti-gp41, anti-gp120, anti-gp160). IgM un IgG klases brīvās antivielas pret p24 olbaltumvielām var parādīties, sākot ar 2. nedēļu, to saturs palielinās 2-4 nedēļu laikā, sasniedzot noteiktu līmeni, kurā tas saglabājas mēnešus (IgM) un gadus (IgG) (8. attēls). 9.7).
Pilnīgas serokonversijas parādīšanās, kad perifērajās asinīs tiek reģistrēts augsts specifisko IgG antivielu līmenis pret HIV p24, gp41, gp120, gp160 strukturālajiem proteīniem, ievērojami atvieglo HIV infekcijas diagnosticēšanu. Antivielas pret HIV parādās 90–95% inficēto 3 mēnešu laikā pēc inficēšanās, 5–9% - periodā no 3 līdz 6 mēnešiem no inficēšanās brīža un 0,5–1% gadījumu - vēlāk.
Neskatoties uz to, ka antivielas pret HIV parādās pēdējās, galvenais laboratorijas diagnostikas rādītājs līdz šim ir specifisku antivielu noteikšana ar ELISA un imūnblotēšanu.
Dati sniegti 9.2. Tabulā [parādīt] un 9.3 [parādīt] , skaidri parāda mūsdienu ar enzīmiem saistīto imūnsorbentu testu augsto jutīgumu, nosakot antivielas pret HIV, kas pārsniedz imūnblotēšanas jutīgumu. Dažos gadījumos, saņemot primāru pozitīvu rezultātu ELISA, to var apstiprināt imūnblotēšanā tikai pēc 2-3 nedēļām.
| 9.3. Tabula. Serokonversijas monitoringa piemērs (pēc N. Fleury, 2000) | |||||
| Apņēmības brīdis | P24 antigēns, pg / ml | Antivielas pret HIV olbaltumvielām | |||
| ELISA, OP arr / OP cr ** | Imūnoblotings | ||||
| HIV DUO | Gen-screen | Vienota | |||
| 1. pacients | |||||
| Galvenokārt | 17 | 1,24 | mazāks par 1 | mazāks par 1 | * |
| Pēc 4 dienām | 67 | 1,36 | 1,85 | mazāks par 1 | - |
| Pēc 7 dienām | * | 2,33 | 6,84 | mazāks par 1 | - |
| Pēc 2 dienām | * | 6,77 | 15,0 | 4,8 | gp160 |
| 2. pacients | |||||
| Galvenokārt | 400 | 13 | mazāks par 1 | mazāks par 1 | - |
| Pēc 5 dienām | 450 | 18 | 2,11 | mazāks par 1 | - |
| Pēc 10 dienām | * | 33 | 12,19 | 2,9 | gp160 |
| Piezīme: * - nav noteikts ** - pētītā seruma parauga optiskā blīvuma attiecība pret optiskā blīvuma kritisko (sliekšņa) vērtību |
|||||
Pārbaudot pacientus ar HIV infekciju (ar HIV inficētiem), izmantojot pasaules vadošo uzņēmumu imūnblotēšanas testa sistēmas, visos gadījumos tiek atklātas antivielas pret gp160 un p24 / 25, 38,8-93,3% gadījumu tiek atklātas antivielas pret citām olbaltumvielām (2. tabula). 9.4 [parādīt] ).
Grūtības noteikt antivielas pacientiem ar HIV infekciju var rasties masīvas virēmijas un antigenēmijas periodos, kad esošās specifiskās antivielas asinīs ir saistītas ar vīrusu daļiņām, un replikācijas process apsteidz jaunu pretvīrusu antivielu ražošanu. Šī situācija var rasties un izzust infekcijas procesa laikā.
Pacientiem ar sākotnēji novājinātu imūnsistēmu virēmija un antigenēmija parādās agrāk un turpinās augsts līmenis pirms slimības iznākuma. Šādiem pacientiem tiek konstatēts zems brīvo antivielu saturs pret HIV divu iemeslu dēļ - nepietiekama antivielu ražošana B-limfocītos un antivielu saistīšanās ar virioniem un šķīstošajiem HIV proteīniem, tāpēc infekcijas noteikšanai ir nepieciešamas testa sistēmas ar paaugstinātu jutību vai analīzes metožu modifikācijas, kas nodrošina antivielu izdalīšanās stadiju. no imūnkompleksiem.
Visbiežāk HIV antivielu satura samazināšanās šo iemeslu dēļ notiek terminālajā stadijā, kad antivielas pret HIV serumā var netikt noteiktas, neizmantojot ar enzīmu saistītas imūnsorbējošās pārbaudes metodes vai imūnblotēšanas metodi (Western blot). Papildus specifisko antivielu parādīšanās pret HIV, imūno atbildi pirmajos 4 mēnešos raksturo inficēto CD4 + šūnu satura samazināšanās asinīs un CD8 + šūnu palielināšanās. Turklāt CD4 un CD8 receptorus nesošo šūnu saturs stabilizējas un kādu laiku paliek nemainīgs. CD8-limfocītu satura palielināšanās ir aizsargreakcija, jo no šūnām atkarīgo citotoksicitāti realizē CD8 + limfocīti, kuru mērķis ir iznīcināt HPV inficētās šūnas. Sākotnēji citotoksiskie limfocīti (CTL) reaģē uz vīrusa regulējošo olbaltumvielu Nef, kam ir nozīmīga loma, samazinot vīrusa (RNS) slodzi HIV inficētās personas plazmā pirmajos mēnešos. Tad CTL atbilde tiek veidota citiem, t.sk. strukturālās, HIV olbaltumvielas, kā rezultātā 12 mēnešus pēc inficēšanās citotoksiskā iedarbība ievērojami palielinās.
Shēmas laboratorijas diagnostika HIV infekcija
Ņemot vērā doto specifisko HIV infekcijas marķieru dinamiku praksē, ieteicams pieaugušajiem ievērot šādas laboratorijas diagnostikas shēmas (9.8.-9.10. Att.).
Diagrammas atspoguļo trīs galvenos HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas galvenos posmus:
- Skrīnings.
- Atsauce.
- Eksperts.
Nepieciešamība pēc vairākiem laboratorijas diagnostikas posmiem galvenokārt ir saistīta ar ekonomiskiem apsvērumiem. Tā, piemēram, viena eksperta pētījuma veikšanas izmaksas ar vietējo testa sistēmu palīdzību, izmantojot imūnblotēšanas metodi, ir līdz 40 ASV dolāriem, skrīnings (izmantojot ELISA metodi) - aptuveni 0,2, tas ir, attiecība ir 1: 200.
Pirmajā posmā (9.8. Att.) Personām tiek pārbaudītas antivielas pret HIV, izmantojot vienu ar enzīmu saistītu imūnsorbcijas testu, kas paredzēts antivielu noteikšanai pret abiem vīrusu veidiem - HIV-1 un HIV-2.
Vīrusu lizātu, rekombinantos proteīnus un sintētiskos peptīdus ražotāji piedāvātajās testa sistēmās izmanto kā antigēnu pamatu. Katram no uzskaitītajiem HIV antigēnu determinantu nesējiem ir savas priekšrocības un trūkumi. Tāpēc, izvēloties testa komplektus ar aptuveni vienādām izmaksām, priekšroka jādod komplektiem ar visaugstāko jutību (vēlams 100%). Starp tādu pašu izmaksu un jutīguma testa sistēmām ieteicams pakavēties pie tām, kurām ir maksimāla specifika.
Pamatojoties uz vīrusa lizātu, tika izveidotas pirmās testu sistēmas HIV infekcijas laboratoriskai diagnostikai. Astoņdesmitajos gados šādām testa sistēmām bija raksturīga jutība, kas mazāka par 100%, un zema specifika, kas izpaužas ar lielu skaitu (līdz 60%) kļūdaini pozitīvu rezultātu.
Vīriona veidošanās laikā limfocītu kultūrā tā membrāna tiek izveidota no ārējās membrānas, un tāpēc tā satur I un II klases galvenā histosaderības kompleksa antigēnus. Šis apstāklis \u200b\u200bizraisa kļūdaini pozitīvas reakcijas gadījumā, ja pacientu asinīs ir antivielas pret histoaderības aloantigēniem.
Vēlāk, lai iegūtu vīrusu, tika ierosināts izmantot makrofāgu kultūru, kurā vīrusu daļiņas galvenokārt tiek veidotas intracelulāri, pumpurējoties nevis no šūnas ārējās membrānas, bet gan no endoplazmas retikuluma membrānām. Šī tehnoloģija ir samazinājusi viltus pozitīvo rezultātu skaitu.
Vieni no labākajiem svarīgāko īpašību - jutīguma un specifiskuma - ziņā ir atzīti ar enzīmiem saistīti imūnsorbcijas testi, kuros izmanto attīrīta vīrusu lizāta kombināciju ar sintētiskiem peptīdiem, kas ir antigēniski nozīmīgākās vīrusa olbaltumvielu vai rekombinanto proteīnu daļas.
Pārbaudes sistēmas jutīgums ir atkarīgs arī no pārējo komplektu sastāvdaļu īpašībām. Tādējādi testa sistēmas, kurās tiek izmantoti konjugāti, kas atpazīst ne tikai IgG klases, bet arī IgM un IgA antivielas, ļauj noteikt agrāku serokonversijas fāzi. Pārbaudes sistēmu izmantošana, šķiet, ir daudzsološa, ar kuras palīdzību vienlaicīgi ir iespējams noteikt gan pretvīrusu antivielas, gan p24 antigēnu, kas padara HIV infekcijas laboratorisko diagnostiku vēl agrāk.
Primārais pozitīvais rezultāts jāpārbauda, \u200b\u200batkārtoti pārbaudot paraugu vienā un tajā pašā testa sistēmā, bet vēlams citā partijā un citam laboratorijas palīgam. Ja otrā pētījuma laikā tiek iegūts negatīvs rezultāts, pētījumu veic trešo reizi.
Pēc pozitīva rezultāta apstiprināšanas ieteicams atkārtoti ņemt asinis un pārbaudīt, vai tajā ir primārās HIV antivielas. Atkārtota asins paraugu ņemšana novērš kļūdu, ko rada neprecīza cauruļu marķēšana un nosūtīšanas veidlapu aizpildīšana.
Seruma pozitīvais serums skrīninga stadijā tiek nosūtīts atsauces pētījumiem, kas veikti, izmantojot divas vai trīs ļoti specifiskas ELISA testa sistēmas. Divu pozitīvu rezultātu gadījumā tiek veikts ekspertu pētījums, izmantojot imūnblotēšanas metodi.
Fermentu imūnanalīzes izmantošana atsauces diagnostikā, ko var izmantot, lai diferencētu specifiskas antivielas pret HIV-1 un HIV-2, atvieglo turpmāko darbu un ļauj eksperta stadijā nekavējoties izpētīt pozitīvu paraugu, izmantojot atbilstošu imūnblotēšanu (HIV-1 vai HIV-2). ...
Laboratorijas ekspertu atzinums par HIV infekciju tiek veikts, tikai pamatojoties uz pozitīvu Western blot rezultātu. Veicot ekspertu diagnostiku, jāizmanto PVO ekspertu grupas 1990. gadā ierosinātā HIV gēnu un gēnu produktu nomenklatūra (9.5. Tabula). [parādīt] ).
Imūnblota joslu specifika ir jānovērtē ļoti uzmanīgi un uzmanīgi, izmantojot kontroles serumu (pozitīvo un negatīvo) pētījumu rezultātus, kas tiek veikti paralēli eksperimentālo paraugu izpētei, un imūnblota paraugu ar HIV proteīnu apzīmējumu (ražotājs pievienojis testa sistēmai). Iegūto rezultātu interpretācija jāveic saskaņā ar testa sistēmai pievienotajām instrukcijām. Parasti pozitivitātes kritērijs ir obligāta antivielu klātbūtne pret diviem olbaltumvielām (prekursors, ārējā vai transmembrāna), ko kodē env gēns, un iespējamā antivielu klātbūtne pret citu divu strukturālu HIV gēnu - gag un pol produktiem - (9.6. Tabula). [parādīt] ).
| 9.6. Tabula. Kritēriji HIV-1 un HIV-2 imūnblotēšanas rezultātu interpretēšanai (PVO, 1990) | |||
| Rezultāts | HIV-1 | HIV-2 | |
| Pozitīvi | +/- pol svītras +/- gag svītras | 2 joslas env (prekursors, ārējais gp vai transmembrānas gp) +/- pol svītras +/- gag svītras |
|
| Negatīvs | HIV-1 specifisko joslu trūkums | HIV-2 specifisko joslu trūkums | |
| Nepārliecināts | Citi profili nav uzskatāmi par pozitīviem vai negatīviem | ||
Apšaubāma rezultāta iegūšanai ir nepieciešams izmantot ieteikumu sarakstu imūnblotēšanas rezultātu galīgai precizēšanai (9.7. Tabula). [parādīt] ).
| 9.7. Tabula. Ieteikumi nenoteiktu imunoblota rezultātu galīgai precizēšanai (PVO, 1990) | |
| Joslu klātbūtne, kas atbilst HIV olbaltumvielām | Rezultāta interpretācija, turpmākās darbības |
| HIV-1 | |
| Tikai 17. lpp | |
| Tikai P24 un gp160 | Šis neparastais modelis var parādīties serokonversijas sākumā. Nekavējoties atkārtoti pārbaudiet paraugu. Ja tiek iegūts tāds pats profils, 2 nedēļas pēc 1. parauga ņemšanas ir jāņem otrais paraugs testēšanai imūnblotēšanas jomā. |
| Citi profili | Šie profili (gag un / vai pol bez env) var norādīt uz serokonversiju vai nespecifiskām reakcijām |
| HIV-2 | |
| Tikai 16. lpp | Var klasificēt kā negatīvu, nav nepieciešamas papildu definīcijas |
| Es bandu env ar vai bez gag / pol | Atkārtoti pārbaudiet to pašu paraugu, izmantojot citu reaģentu partiju |
| Tikai P24 vai gp140 | Šis neparastais profils var parādīties serokonversijas sākumā. Nekavējoties atkārtoti pārbaudiet paraugu. Ja tiek iegūts tāds pats profils, 2 nedēļas pēc 1. parauga ņemšanas jāņem otrs paraugs testēšanai imūnblotēšanas procesā |
| Citi profili | Šie profili (gag un / vai pol bez env) var norādīt uz serokonversiju vai nespecifiskām reakcijām. |
Saskaņā ar Krievijas AIDS profilakses un kontroles zinātniskā un metodiskā centra ieteikumiem pozitīvs rezultāts tiek uzskatīts, ja ir antivielas vismaz pret vienu no gp41, gp120, gp160 olbaltumvielām kombinācijā ar antivielām pret citiem specifiskiem HIV-1 proteīniem vai bez tām. Šie ieteikumi tiek izstrādāti, pamatojoties uz pieredzi ar bērnu serumiem no hospitālās perēkļiem, kuros antivielas bieži tika noteiktas tikai vienam no vīrusa apvalka proteīniem.
Lielākā daļa pacientu, kuri sākotnēji tika pārbaudīti ar seropozitīvu ELISA metodi, pieder pie pastāvīgas ģeneralizētas limfadenopātijas (PGL) fāzes vai asimptomātiskas fāzes. Tādēļ uz imūnblota (nitrocelulozes sloksnes, uz kuras ir imobilizēti HIV proteīni) parasti nosaka šādu HIV-1 antivielu kombināciju: antivielas pret env apvalka olbaltumvielām gp160, gp120 un gp41, ko kodē env gēns, kombinācijā ar antivielām pret pamatproteīniem p24 (olbaltumviela) nukleokapsīds, ko kodē gag gēns) un p31 / 34 (endonukleāze, ko kodē pol gēns).
Pozitīvas reakcijas tikai ar gag un / vai po olbaltumvielām var rasties serokonversijas agrīnā fāzē, un tās arī norāda uz HIV-2 infekciju vai nespecifisku reakciju.
Apšaubāma rezultāta iegūšanas gadījumā ir iespējams izmantot dažādus metodiskos paņēmienus, lai noskaidrotu HIV infekcijas faktu.
Atkarībā no tehniskajām iespējām (diagnostikas komplektu un reaģentu pieejamība, aprīkojums ar īpašu aprīkojumu un personāla apmācība) ekspertu laboratorija veic papildu diagnostikas pētījumus (9.10. Attēls).
Dažos gadījumos ir ieteicams izmantot molekulārās ģenētiskās metodes, lai noteiktu HIV ģenētiskās secības serumā, asins limfocītos vai limfmezglu punkcijās. PCR rezultātā iegūto DNS sekvenču specifiskuma pārbaudi var veikt, izmantojot nukleīnskābju hibridizācijas metodi ar specifiskām DNS zondēm.
Radioimunoprecipitācijas (RIP) un netiešās imūnfluorescences (IFL) metodes var izmantot arī serumu galīgai pārbaudei ar apšaubāmiem rezultātiem imūnblotēšanā.
HIV RNS noteikšana asins plazmā ar kvalitatīvu vai kvantitatīvu metodi nav nozīmīga HIV infekcijas diagnosticēšanai. Šis rezultāts jāapstiprina ar standarta metodēm, piemēram, imūnblotēšanu, 2–4 mēnešus pēc primārās apšaubāmās vai negatīvās atbildes saņemšanas.
HIV izolēšana šūnu kultūrā ir galvenā patiesība. Tomēr metode ir sarežģīta, dārga un tiek veikta tikai speciāli aprīkotās pētījumu laboratorijās.
CD4 + - šūnu saturs asinīs ir nespecifisks rādītājs, tomēr apstrīdamos gadījumos (ELISA "+", imūnblots "-", klātbūtne klīniskās pazīmes HIV / AIDS), to var izmantot kā vadlīnijas ekspertu lēmumu pieņemšanai. Ja laboratorijā ir iespējams veikt tikai imūnblotēšanu, jums jāievēro tabulā sniegtie ieteikumi. 9.7 un att. 9.9.
Personām, kuru seruma ekspertīze sniedza apšaubāmus (nenoteiktus) rezultātus, izņemot gadījumus, kad atklāja tikai antivielas pret p17 (HIV-1) vai p16 (HIV-2), jāpārbauda 6 mēnešu laikā (pēc 3 mēnešiem). Patiesas HIV infekcijas gadījumā pēc 3-6 mēnešiem antivielu spektrā tiek novērota "pozitīva" tendence - papildu antivielu veidošanās pret citiem vīrusa proteīniem. Nepatiesu reakciju raksturo apšaubāma imūnsistēmas bloka ilglaicīga noturība vai aizdomīgu joslu izzušana. Ja pēc noteiktā perioda atkārtotas imūnblotēšanas rezultāti ir negatīvi vai paliek šaubīgi, tad, ja nav riska faktoru, klīniskie simptomi vai citiem faktoriem, kas saistīti ar HIV infekciju, personu var uzskatīt par seronegatīvu attiecībā uz antivielām pret HIV-1 un HIV-2.
Viltus pozitīvi rezultāti, pateicoties pacientu asinīs antivielām pret histoaderības aloantigēniem, kas ir daļa no HIV apvalka, parādās imūnblotā joslu veidā gp41 un gp31 līmenī. Citu nespecifisku reakciju cēloņi (piemēram, uz p24, kas bieži sastopams cilvēkiem ar autoimūniem procesiem) vēl nav noskaidroti.
Ar fermentiem saistītu imūnsorbentu testa sistēmu ražošanas tehnoloģijas uzlabošana ļāva sasniegt augstu jutību - līdz 99,99%, savukārt imūnblotēšanas metodes jutīgums ir 97%. Tāpēc negatīvs rezultāts imūnblotēšanā ar pozitīviem rezultātiem ELISA testā var norādīt uz serokonversijas sākotnējo periodu, kam raksturīgs zems specifisko antivielu līmenis. Tādēļ ir nepieciešams atkārtot pētījumu pēc 1,5-2 mēnešiem, tas ir, laika perioda, kas nepieciešams serokonversijas pilnīgai sasniegšanai, lai sasniegtu specifisku antivielu koncentrāciju asinīs, kas ir pietiekama noteikšanai ar imūnblotēšanu.
Pozitīvs pētījuma rezultāts (rezultāti) HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas atsauces vai tikai skrīninga posmā, tas ir, pozitīvs rezultāts jebkurā enzīmu imūnanalīze, kā rezultātā ekspertu metodes to neapstiprina, interpretē kā savstarpēji reaģējošu antivielu klātbūtni pārbaudīto asinīs. Krusteniska reakcija attiecas uz nespecifisku vietu saistīšanos ar antivielām pret HIV olbaltumvielām vai peptīdiem, kurus testa sistēmā izmanto kā antigēnu pamatu, kurā tiek iegūts pozitīvs rezultāts.
Ja nav imūndeficīta un HIV infekcijas klīnisko pazīmju, šādas personas tiek uzskatītas par seronegatīvām pret HIV antivielām un ir jāsvītro no reģistra.
HIV infekcijas galīgo diagnozi nosaka tikai, pamatojoties uz visiem klīniskajiem, epidemioloģiskajiem un laboratorijas datiem. Tikai ārstējošajam ārstam ir tiesības informēt pacientu par HIV infekcijas diagnozi.
Galvenā HIV infekcijas apstiprinošās (ekspertu) laboratoriskās diagnostikas metode ir imūnblotēšana. Tomēr, ņemot vērā tā zemāko jutību, salīdzinot ar ELISA, vairāki pētnieki ieteica izmantot vairāku testa sistēmu kombināciju, lai galīgi noteiktu specifisku antivielu klātbūtni pret HIV. Piemēram, G. van der Groen et al. ierosināja alternatīvu imūnblotēšanas metodei, lai pārbaudītu pozitīvus rezultātus HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas skrīninga posmā. Tas ietver materiāla izpēti paralēli trīs testa sistēmās, kuru pamatā ir dažādas specifisku antivielu pret HIV noteikšanas metodes (vairāki ELISA varianti, aglutinācijas tests), izmantojot dažāda rakstura antigēnus. Autoriem izdevās atrast tādas testa sistēmu kombinācijas, kuru izmantošana nodrošina 100% jutīgumu un specifiskumu, salīdzinot ar imunoblotinga rezultātiem.
Šīs ekspertu diagnostikas metodes lētums ir neapšaubāma priekšrocība, tomēr informācijas trūkums par to, kādiem vīrusa proteīniem ir antivielas pacienta asinīs, neļauj novērtēt reakcijas specifiku katrā atsevišķā gadījumā, kā arī izsekot antivielu spektra izmaiņām agrīnā serokonversijas stadijā.
Laboratoriskai HIV infekcijas diagnostikai bērniem, kas dzimuši no HIV inficētām mātēm, ir savas īpatnības. Kopš dzimšanas brīža ilgu laiku (līdz 15 mēnešiem) mātes antivielas pret HIV var cirkulēt šādu bērnu asinīs. Tikai IgG klases imūnglobulīni iekļūst placentas barjerā, tāpēc HPV specifisko IgM un IgA klases nmmupoglobulīnu noteikšana bērnam ļauj apstiprināt infekciju, taču negatīvs rezultāts nevar norādīt uz HIV neesamību.
Bērniem līdz 1 mēneša vecumam vēl nav HPV replikācijas, un vienīgā pārbaudes metode ir PCR. P24 antigēna noteikšana bērniem, kas vecāki par 1 mēnesi, ir arī apstiprinoša metode.
Antivielu trūkums pret HIV jaundzimušajiem nenozīmē, ka vīruss nav iekļuvis placentas barjerā. Jebkurā gadījumā HIV inficēto māšu bērni tiek pakļauti laboratorijas diagnostikas pārbaudei un novērošanai 36 mēnešu laikā pēc dzimšanas.
rezultāti laboratorijas pētījumi HIV infekcijas marķieriem ir nepieciešama rūpīga interpretācija, un tie būtu jāapsver tikai saistībā ar epidemioloģisko un klīnisko apsekojumu datiem. No otras puses, jāatzīmē, ka, neskatoties uz moderno metožu augsto jutīgumu, negatīvie pētījumu rezultāti nevar pilnībā izslēgt HIV infekcijas klātbūtni. Tāpēc negatīvu testa rezultātu, piemēram, veicot imūnblotēšanu, var formulēt tikai kā specifisku antivielu trūkumu pret HIV-1 un HIV-2.
HIV infekcijas diagnostika seronegatīviem pacientiem
HIV infekcijas laboratoriskajā diagnostikā izmantoto testa sistēmu kvalitāte ar katru gadu uzlabojas, palielinās to jutīgums. Tomēr lielā HIV mainība var izraisīt jaunu veidu parādīšanos, pret kuriem antivielas var neatpazīt esošās testa sistēmas. Turklāt ir zināmi gadījumi, kad saimnieka imūnsistēma netipiski reaģē uz humoru uz vīrusu. Tādējādi L. Montagnjē 1996. gadā ziņoja par diviem AIDS pacientiem, kuru asinīs vairākus gadus netika atklātas specifiskas antivielas, diagnoze tika veikta, pamatojoties uz klīniskajiem datiem un laboratoriski apstiprināta tikai ar HPV-1 izolāciju šūnu kultūrā. Šādos gadījumos ir jāizmanto PVO ieteikumi, saskaņā ar kuriem klīniskā diagnostika HIV infekcija pieaugušajiem un bērniem ir iespējama, ja ir kāda no 12 AIDS indikatoru slimībām:
- barības vada, trahejas, bronhu, plaušu kandidoze;
- ekstrapulmonāla kriptokokoze;
- kriptosporidioze ar caureju ilgāk nekā mēnesi;
- citomegalovīrusa bojājumi jebkuram orgānam (izņemot aknas, liesu un papildus tām, kā arī papildus tām) limfmezgli pacientam, kas vecāks par 1 mēnesi):
- infekcija, ko izraisa herpes simplex vīruss, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi pacientam, kas vecāks par 1 mēnesi;
- smadzeņu limfoma pacientam, kas jaunāks par 60 gadiem;
- limfocītiska intersticiāla pneimonija bērnam līdz 13 gadu vecumam;
- izplatīta infekcija, ko izraisa Micobacterium avium intracellulare grupas baktērijas vai M. Kansassii;
- pneimocystis pneimonija;
- progresējoša multifokāla leikoencefalopātija;
- centrālā toksoplazmoze nervu sistēmaspacientiem vecākiem par 1 mēnesi.
Vienas no šīm slimībām klātbūtne ļauj diagnosticēt HIV infekciju, ja nav iespējas veikt laboratorisko asins analīzi HIV antivielu klātbūtnei vai arī tad, ja tiek iegūts seronegatīvs rezultāts.
Avots: Medicīniskās laboratorijas diagnostika, programmas un algoritmi. Ed. prof. Karpiščenko A.I., Sanktpēterburga, Intermedica, 2001
Pašlaik jaunās diagnostikas tehnoloģijas ļauj identificēt daudzu slimību etioloģiskos un patoģenētiskos cēloņus un radikāli ietekmēt ārstēšanas rezultātus. Varbūt visiespaidīgākie rezultāti šo tehnoloģiju ieviešanā klīniskajā praksē ir sasniegti imunoloģijas un diagnostikas jomā. infekcijas slimības.
Pārbaužu sistēmas, kuru pamatā ir enzīmu imūnanalīze un imūnhumiluminiscences analīze, ļauj noteikt dažādu klašu antivielas, kas ievērojami palielina klīnisko, analītisko jutību un infekcijas slimību diagnostikas metožu informācijas saturu. Jāatzīmē, ka visbūtiskākie sasniegumi infekciju diagnostikā ir saistīti ar polimerāzes ķēdes reakcijas metodes ieviešanu laboratorijas praksē, kas tiek uzskatīta par "zelta standartu" daudzu infekcijas slimību ārstēšanas diagnostikā un efektivitātes novērtēšanā.
Pētījumiem var izmantot dažādus bioloģiskos materiālus: serumu, asins plazmu, skrāpējumus, biopsiju, pleiras vai cerebrospinālo šķidrumu (CSF). Pirmkārt, infekciju laboratoriskās diagnostikas metodes ir vērstas uz tādu slimību identificēšanu kā vīrusu hepatīts B, C, D, citomegalovīrusa infekcija, seksuāli transmisīvas infekcijas (gonoreāla, hlamīdija, mikoplazma, ureaplasma), tuberkuloze, HIV infekcija utt.
HIV infekcija - slimība, ko izraisa cilvēka imūndeficīta vīruss (HIV), ilgu laiku saglabājas limfocītos, makrofāgos, nervu audu šūnās, kā rezultātā attīstās lēni progresējošs ķermeņa imūno un nervu sistēmu bojājums, kas izpaužas kā sekundāras infekcijas, audzēji, subakūts encefalīts un citas patoloģiskas izmaiņas.
Infekcijas izraisītāji - 1. un 2. tipa cilvēka imūndeficīta vīrusi (HIV-1, HIV-2) - pieder retrovīrusu ģimenei, lēnu vīrusu apakšgrupai. Virioni ir sfēriskas daļiņas ar diametru 100–140 nm. Vīrusu daļiņai ir ārējais fosfolipīdu apvalks, kas satur glikoproteīnus (strukturālos proteīnus) ar noteiktu molekulmasu, mērot kilodaltonos. HIV-1 gadījumā tie ir gpl60, gpl20, gp41. Iekšējo vīrusa apvalku, kas aptver kodolu, attēlo arī olbaltumvielas ar zināmu molekulmasu - p17, p24, p55 (HIV-2 satur gpl40, gpl05, gp36, p16, p25, p55).
HIV genomā ietilpst RNS un enzīms reversā transkriptāze (reversā transkriptāze). Lai retrovīrusu genoms varētu savienoties ar saimniekšūnu genomu, DNS vispirms sintezē uz vīrusa RNS šablona, \u200b\u200bizmantojot reverso transkriptāzi. Tad provirusa DNS tiek ievietota saimnieka šūnas genomā. HIV ir izteikta antigēnu mainība, kas ir ievērojami augstāka nekā gripas vīrusa.
Cilvēka ķermenī galvenais HIV mērķis ir T-limfocīti, uz kuriem virsmas ir vislielākais skaits CD4 receptoru. Pēc tam, kad HIV ar revertāzes palīdzību iekļūst šūnā, sekojot RNS paraugam, vīruss sintezē DNS, kas tiek iekļauta saimniekšūnas ģenētiskajā aparātā (CD4 limfocīti) un paliek tur visu mūžu provīrusa stāvoklī. Papildus T-palīga limfocītiem tiek ietekmēti makrofāgi, B-limfocīti, neiroglija šūnas, zarnu gļotāda un dažas citas šūnas. T-limfocītu (CD4 šūnu) skaita samazināšanās iemesls ir ne tikai vīrusa tiešā citopātiskā iedarbība, bet arī to saplūšana ar neinficētām šūnām. Līdztekus T-limfocītu sakāvei pacientiem ar HIV infekciju notiek arī B-limfocītu poliklonāla aktivizēšana ar visu klašu imūnglobulīnu, īpaši IgG un IgA, sintēzes palielināšanos un sekojošo šīs imūnsistēmas daļas izsīkšanu. Pavājināta imūno procesu regulēšana izpaužas arī ar α-interferona, β2-mikroglobulīna līmeņa paaugstināšanos un IL-2 līmeņa pazemināšanos. Imūnās sistēmas disfunkcijas rezultātā, īpaši, ja T-limfocītu (CD4) skaits samazinās līdz 400 šūnām 1 μl asinīs vai mazāk, rodas apstākļi nekontrolētai HIV replikācijai, ievērojami palielinoties virionu skaitam dažādās ķermeņa vidēs. Daudzu imūnsistēmas daļu sakāves rezultātā ar HIV inficētā persona kļūst neaizsargāta pret dažādu infekciju patogēniem.
Uz pieaugošās imūnsupresijas fona attīstās smagas progresējošas slimības, kas nerodas cilvēkam ar normāli funkcionējošu imūnsistēmu. Tās ir slimības, kuras Pasaules Veselības organizācija (PVO) definējusi kā AIDS marķiera vai AIDS indikatora slimības.
AIDS indikatora slimības
Pirmā grupa - slimības, kas raksturīgas tikai smagam imūndeficītam (CD4<200). Клинический диагноз ставится при отсутствии анти-ВИЧ-антител или ВИЧ-антигенов.
Otrā grupa - slimības, kas var attīstīties gan uz smaga imūndeficīta fona, gan dažos gadījumos bez tā.
Tādēļ šajos gadījumos ir nepieciešams laboratorijas apstiprinājums diagnozei.
Pirmā grupa:
- barības vada, trahejas, bronhu kandidoze;
- ekstrapulmonāla kriptokokoze;
- kriptosporidioze ar caureju ilgāk par 1 mēnesi;
- dažādu orgānu citomegalovīrusa bojājumi, izņemot aknas, liesu vai limfmezglus pacientam, kas vecāks par 1 mēnesi;
- herpes simplex vīrusa izraisīta infekcija, kas izpaužas kā čūlas uz ādas un gļotādām, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi, kā arī jebkura ilguma bronhīts, pneimonija vai ezofagīts, kas skar pacientu, kas vecāks par 1 mēnesi;
- ģeneralizēta Kapoši sarkoma pacientiem līdz 60 gadu vecumam;
- smadzeņu limfoma (primārā) pacientiem līdz 60 gadu vecumam;
- limfocītiska intersticiāla pneimonija un / vai plaušu limfoīdā displāzija bērniem līdz 12 gadu vecumam;
- izplatīta infekcija, ko izraisa netipiskas mikobaktērijas (mycobacterium complex M. aviumintracellulare) ar ekstrapulmonālu lokalizāciju vai lokalizāciju (papildus plaušām) ādā, kakla limfmezglos, plaušu sakņu limfmezglos;
- pneimocystis pneimonija;
- progresējoša multifokāla leikoencefalopātija;
- smadzeņu toksoplazmoze pacientiem, kas vecāki par 1 mēnesi.
Otrā grupa:
- bakteriālas infekcijas, kombinētas vai atkārtotas, bērniem līdz 13 gadu vecumam (vairāk nekā divi gadījumi 2 gadu novērošanas laikā): sepse, pneimonija, meningīts, kaulu vai locītavu bojājumi, hemofīlo nūju izraisīti abscesi, streptokoki;
- izplatītā kokcidioidomikoze (ārpusplaušu lokalizācija);
- HIV encefalopātija (HIV demence, AIDS demence);
- histoplazmoze ar caureju, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi;
- izosporoze ar caureju, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi;
- kapoši sarkoma jebkurā vecumā;
- smadzeņu limfoma (primārā) jebkura vecuma cilvēkiem;
- citas B-šūnu limfomas (izņemot Hodžkina slimību) vai nezināma imūnfenotipa limfomas: mazo šūnu limfomas (piemēram, Burkita limfoma utt.); imūnblastiskas sarkomas (limfomas imūnblastiskas, lielšūnu, difūzas histiocitiskas, difūzas nediferencētas);
- izplatīta mikobakterioze (nevis tuberkuloze) ar bojājumiem papildus ādas plaušām, dzemdes kakla vai priecīgiem limfmezgliem;
- ekstrapulmonārā tuberkuloze (ar iekšējo orgānu bojājumiem, papildus plaušām);
- atkārtota salmonellas septicēmija;
- HIV distrofija (izsīkums, dramatisks svara zudums).
1. tabulā (skatīt avota saiti iepriekš) ir uzskaitītas slimības, kas nosaka AIDS, un to etioloģiskos izraisītājus.
Ir daudzas AIDS klasifikācijas.
Saskaņā ar jauno Slimību kontroles centru piedāvāto jauno klasifikāciju (2. tabula - skatiet saiti uz avotu iepriekš) AIDS diagnoze tiek noteikta personām, kuru CD4 šūnu skaits ir mazāks par 200 / μL, pat ja nav AIDS indikatoru slimību.
B kategorijā ietilpst dažādi sindromi, no kuriem vissvarīgākie ir bacilārā angiomatoze, orofaringeāla kandidoze, atkārtota vulvovagināla kandidoze, grūti ārstējama, dzemdes kakla displāzija, dzemdes kakla karcinoma, idiopātiska trombocitopēniska purpura, listerioze, perifēra neiropātija.
Antivielas pret HIV-1 un HIV-2 asinīs
Antivielas pret HIV-1 un HIV-2 parasti nav asins serumā.
HIV antivielu noteikšana ir galvenā HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas metode. Metode ir balstīta uz enzīmu imūnsorbcijas testu (ELISA) - jutīgums ir lielāks par 99,5%, specifiskums ir lielāks par 99,8%. Antivielas pret HIV parādās 90-95% inficēto 1 mēneša laikā pēc inficēšanās, 5-9% - pēc 6 mēnešiem, 0,5-1% - vēlāk. AIDS stadijā antivielu skaits var samazināties, līdz tās pilnībā izzūd.
Pētījuma rezultāts tiek izteikts kvalitatīvi: pozitīvs vai negatīvs.
Negatīvs testa rezultāts norāda, ka asins serumā nav antivielu pret HIV-1 un HIV-2. Pēc gatavības laboratorija nekavējoties izsniedz negatīvu rezultātu. Saņemot pozitīvu rezultātu - antivielu noteikšanu pret HIV -, lai laboratorijā izvairītos no viltus pozitīviem rezultātiem, analīzi atkārto vēl 2 reizes.
Imūnblotēšana antivielām pret HIV vīrusu olbaltumvielām asins serumā
Asins serumā parasti nav antivielu pret HIV vīrusu olbaltumvielām.
ELISA metode antivielu noteikšanai pret HIV ir skrīninga metode. Kad tiek iegūts pozitīvs rezultāts, lai apstiprinātu tā specifiskumu, tiek izmantota imūnblotēšanas metode - Western-blot - pretnogulsnēšana antivielu želejā pacienta asins serumā ar dažādiem vīrusu proteīniem, kas pakļauti atdalīšanai pēc molekulmasas, izmantojot elektroforēzi, un tiek uzklāti uz nitrocelulozi. Nosaka antivielas pret vīrusu proteīniem gp41, gpl20, gpl60, p24, pi8, p17 utt.
Saskaņā ar Krievijas AIDS profilakses un kontroles centra ieteikumiem antivielu noteikšana pret kādu no glikoproteīniem gp41, gpl20, gpl60 jāuzskata par pozitīvu rezultātu. Ja tiek atklātas antivielas pret citiem vīrusa proteīniem, rezultāts tiek uzskatīts par apšaubāmu, šāds pacients jāpārbauda divreiz - pēc 3 un 6 mēnešiem.
Antivielu neesamība pret specifiskiem HIV proteīniem nozīmē, ka enzīma imūnanalīze deva kļūdaini pozitīvu rezultātu. Tajā pašā laikā praktiskajā darbā, novērtējot Western blotting metodes rezultātus, ir jāvadās pēc uzņēmuma sniegtajām instrukcijām lietotajam "Kit for Western blotting".
Imūnblotēšanas metodi izmanto HIV infekcijas laboratoriskai diagnostikai.
P24 antigēns serumā
Asins serumā nav p24 antigēna.
P24 antigēns ir HIV nukleotīdu sienas proteīns. Primāro izpausmju stadija pēc HIV infekcijas ir replikācijas procesa sākuma sekas. P24 antigēns asinīs parādās 2 nedēļas pēc inficēšanās, un to var noteikt ar ELISA periodā no 2 līdz 8 nedēļām. Pēc 2 mēnešiem no inficēšanās brīža p24 antigēns pazūd asinīs. Vēlāk HIV infekcijas klīniskajā gaitā p24 olbaltumvielu saturs asinīs palielinās vēlreiz. Tas attiecas uz AIDS veidošanos. Esošās ELISA testa sistēmas p24 antigēna noteikšanai tiek izmantotas, lai savlaicīgi atklātu HIV asins donoros un bērnos, noteiktu AIDS kursa prognozi un uzraudzītu terapiju AIDS pacientiem. ELISA ir augsta analītiskā jutība, kas ļauj noteikt HIV-1 p24 antigēnu serumā ar koncentrāciju 5-10 pkg / ml un HIV-2 - mazāk nekā 0,5 ng / ml, un specifiskumu. Tomēr jāatzīmē, ka p24 antigēna līmenis asinīs ir pakļauts individuālām variācijām, kas nozīmē, ka tikai 20-30% pacientu var noteikt, izmantojot šo pētījumu agrīnā periodā pēc inficēšanās (Rose N.R. et al., 1997).
Antivielas pret IgM un IgG klases p24 antigēnu asinīs parādās no 2. nedēļas, sasniedz maksimumu 2–4 nedēļu laikā un šajā līmenī saglabājas dažādas reizes: IgM antivielas - vairākus mēnešus, izzūd viena gada laikā pēc inficēšanās, un IgG antivielas var ilgt gadiem.
HIV infekcijas diagnosticēšanas algoritms ir atkarīgs no slimības fāzes, un to raksturo izmaiņas dažādu klašu noteikšanas antivielu dinamikā (1., 2. att. - skatīt saiti uz avotu iepriekš).
Pētījuma rezultāts tiek izteikts kvalitatīvi - pozitīvs vai negatīvs. Negatīvs testa rezultāts norāda uz antivielu trūkumu pret HIV-1 un HIV-2 un p24 antigēnu asins serumā.
Pēc gatavības laboratorija nekavējoties izsniedz negatīvu rezultātu. Saņemot pozitīvu rezultātu - antivielu noteikšanu pret HIV-1 un HIV-2 un / vai antigēnu p24 - lai laboratorijā izvairītos no kļūdaini pozitīviem rezultātiem, analīzi atkārto vēl 2 reizes.
Neatkarīgi no iegūtajiem testu rezultātiem pacienta asins paraugu un 3 testu rezultātus laboratorija nosūta reģionālajam AIDS centram, lai apstiprinātu pozitīvu rezultātu vai pārbaudītu nenoteiktu rezultātu. Šādos gadījumos reģionālais AIDS centrs sniegs galīgo atbildi uz šo aptauju.
HIV noteikšana ar polimerāzes ķēdes reakciju (kvalitatīva)
HIV noteikšana ar polimerāzes ķēdes reakciju - PCR (kvalitatīvi) tiek veikta, lai:
- apšaubāmu imūnblotēšanas pētījumu rezultātu atrisināšana;
- savlaicīgai HIV infekcijas diagnosticēšanai;
- pretvīrusu ārstēšanas efektivitātes uzraudzība;
- nosakot AIDS slimības stadiju (infekcijas pāreja uz slimību).
Primāras HIV infekcijas gadījumā PCR metode ļauj noteikt HIV RNS asinīs jau 10-14 dienas pēc inficēšanās.
Pētījuma rezultāts tiek izteikts kvalitatīvi: pozitīvs vai negatīvs. Negatīvs testa rezultāts norāda uz HIV RNS neesamību asinīs.
Pozitīvs rezultāts - HIV RNS noteikšana - norāda, ka pacients ir inficēts.
HIV noteikšana ar polimerāzes ķēdes reakciju (kvantitatīva)
HIV asinīs parasti nav.
Tieša HIV RNS kvantitatīvā noteikšana ar PCR ļauj precīzāk prognozēt AIDS attīstības ātrumu personām, kas inficētas ar HIV, nekā noteikt CD4 šūnu skaitu, un tāpēc precīzāk novērtēt viņu izdzīvošanu. Augsts vīrusu daļiņu skaits parasti korelē ar smagu traucētu imūno stāvokli un zemu CD4 šūnu skaitu. Zems vīrusu daļiņu skaits parasti korelē ar labāku imūno stāvokli un lielāku CD4 šūnu skaitu. Vīrusu RNS saturs asinīs ļauj paredzēt slimības pāreju uz klīnisko stadiju. Kad HIV RNS-1 saturs ir\u003e 74 100 kopijas / ml, gandrīz visiem pacientiem attīstās AIDS klīniskā aina (Senior D., Holden E., 1996).
Personām ar HIV-1 asinīm\u003e 10 000 kopijas / ml ir 10,8 reizes lielāka iespēja saslimt ar AIDS nekā tām, kurām ir HIV-1 asinis<10 000 копий/мл. При ВИЧ-инфекции прогноз непосредственно определяется уровнем виремии. Снижение уровня виремии при лечении улучшает прогноз заболевания.
ASV ekspertu grupa ir izstrādājusi indikāciju HIV pacientu ārstēšanai. Ārstēšana ir indicēta pacientiem ar CD4 šūnu skaitu asinīs<300/мкл или уровнем РНК ВИЧ в сыворотке >20 000 eksemplāru / ml (PCR). Antiretrovīrusu terapijas rezultātu novērtēšana personām, kas inficētas ar HIV, tiek veikta, samazinot HIV RNS līmeni serumā.
Veicot efektīvu ārstēšanu, virēmijas līmenim pirmajās 8 nedēļās vajadzētu samazināties 10 reizes un būt zemāk par metodes (PCR) noteikšanas robežu (<500 копий/мл) через 4-6 месяцев после начала терапии.
Tādējādi līdz šim klīniskajā praksē HIV infekcijas diagnosticēšanai, tāpat kā visām citām vīrusu infekcijām, ir ieviestas un izmantotas daudzas pētījumu metodes. Starp tiem vadošā loma tiek piešķirta seroloģiskajiem pētījumiem. Galvenās HIV infekciju diagnosticēšanas metodes ir parādītas 3. tabulā (skatīt saiti uz avotu iepriekš), kur tās ir sadalītas atbilstoši katras metodes nozīmīgumam vīrusu noteikšanā četros līmeņos:
- A - pārbaudi parasti izmanto diagnozes apstiprināšanai;
- B - tests noteiktos apstākļos ir noderīgs noteiktu infekcijas formu diagnosticēšanai;
- C - testu reti izmanto diagnostikas nolūkos, bet tam ir liela nozīme epidemioloģiskajos pētījumos;
- D - testu parasti neizmanto laboratorijās diagnostikas vajadzībām.
Tā kā vīrusu infekciju diagnostikai papildus optimālās analīzes metodes izvēlei ir ne mazāk svarīgi pareizi identificēt un pētniecībai ņemt biomateriālu, 4. tabulā (skatīt saiti uz avotu iepriekš) sniegti ieteikumi optimālas biomateriāla izvēlei HIV infekcijas pētīšanai.
Lai uzraudzītu ar HIV inficēto, jāizmanto visaptveroša imūnā stāvokļa izpētes iespējas - visu tās saišu kvantitatīva un funkcionāla noteikšana: humorālā, šūnu imunitāte un nespecifiskā rezistence kopumā.
Mūsdienu laboratorijas apstākļos imunoloģiskā stāvokļa novērtēšanas daudzpakāpju princips ietver limfocītu, asins imūnglobulīnu apakšpopulācijas noteikšanu. Novērtējot rādītājus, jāpatur prātā, ka HIV infekcijai raksturīga CD4 / CD8 T šūnu skaita samazināšanās mazāka par 1. CD4 / CD8 indekss 1,5–2,5 norāda uz normālu stāvokli, vairāk nekā 2,5 norāda uz hiperaktivitāti, mazāk 1.0 - norāda imūndeficītu. Arī smagā iekaisuma gadījumā CD4 / CD8 attiecība var būt mazāka par 1.
Šim koeficientam ir būtiska nozīme, novērtējot imūnsistēmu AIDS slimniekiem, jo \u200b\u200bHIV selektīvi inficē un iznīcina CD4 limfocītus, kā rezultātā CD4 / CD8 attiecība samazinās līdz vērtībām, kas ir ievērojami mazākas par 1.
Imunoloģiskā stāvokļa novērtējums pamatojas arī uz vispārēju vai "rupju" defektu identificēšanu šūnu un humorālās imunitātes sistēmā: hipergammaglobulinēmiju (paaugstināta IgA, IgM, IgG koncentrācija) vai hipogammaglobulinēmiju terminālajā stadijā; cirkulējošo imūno kompleksu koncentrācijas palielināšanās; samazināta citokīnu ražošana; limfocītu reakcijas uz antigēniem un mitogēniem vājināšanās.
B-limfocītu kopējā baseina populāciju attiecības pārkāpums ir raksturīgs nepietiekamai humorālai imunitātei. Tomēr šīs izmaiņas nav specifiskas HIV infekcijai un var notikt arī citu slimību gadījumā. Veicot visaptverošu vairāku citu laboratorijas parametru novērtējumu, jāpatur prātā, ka HIV infekciju raksturo arī: anēmija, limfas un leikopēnija, trombocitopēnija, β2-mikroglobulīna un C-reaktīvā proteīna līmeņa paaugstināšanās, transamināžu aktivitātes palielināšanās asins serumā.
interneta veikalā: 10% atlaide!
laboratorijā:
510berzēt
Izteikt
1 020berzētizmaksas ir norādītas, neņemot vērā bioloģiskā materiāla paraugu ņemšanas izmaksas
Pievienot pirkumu grozamAntivielas pret HIV - skrīninga tests HIV infekcijas diagnosticēšanai.
Analīzes rezultātu gatavība
Parasts *: nodots pirms plkst. 12:00 (plkst. 11.00 Podoļskā) - 1 darba diena, nodots pēc plkst. 12:00 (plkst. 11.00 Podoļskā) - 2 darba dienas
Analīzes gatavības laiks ekspresrežīmā (Cito)
| Piegādes laiks | Gatavība | |
|---|---|---|
| Nedēļas dienas | Nedēļas nogale | |
| Klīnika CIR laboratorijā Dubrovkā | ||
| 08:00-12:00 | - | 1 diena |
| 12:00-20:30 | - | |
| Maryino, Novokuzņeckaja, Voikovskaja | ||
| 08:00-12:00 | 09:00-12:00 | 1 diena |
| 12:00-20:30 | 12:00-17:00 | Nākamajā dienā plkst. 8:00 |
| Butovo | ||
| 08:00-12:00 | 09:00-12:00 | 1 diena |
| Podoļska | ||
| 08:00-11:00 | 09:00-10:00 | 1 diena |
Analīžu vērtība
HIV antivielu (cilvēka imūndeficīta vīrusa, HIV, cilvēka imūndeficīta vīrusa) analīze asinīs nosaka antivielas, kas veidojas organismā, reaģējot uz infekciju ar vīrusu.
HIV - Cilvēka imūndeficīta vīruss - mikroorganisms, kas izraisa AIDS (AIDS (iegūtais imūndeficīta sindroms)).
Cilvēka imūndeficīta vīrusa pārnešanas veidi
- seksuāls - neaizsargāta seksuāla kontakta laikā ar HIV inficētu partneri. Infekcijas risks ir visaugstākais ar anālo dzimumaktu, zemākais - ar mutes dzimumaktu.
- kontakts ar inficētām asinīm - lietojot adatas, nesterilus instrumentus, pārlejot ziedotās asinis.
- vertikālais pārraides ceļš- no HIV inficētas mātes līdz auglim grūtniecības, dzemdību, zīdīšanas laikā.
Indikācijas pārbaudei
- Plānota hospitalizācija
- Gatavošanās operācijai
- Grūtniecības plānošana un grūtniecība (iekļauta pārbaudes standartā)
- Neaizsargāts gadījuma rakstura sekss, biežas dzimuma partnera maiņas
- Infekcijas riska faktoru klātbūtne (piemēram, veselības aprūpes speciālisti)
- Sūdzības: limfmezglu pietūkums vairākās vietās, nakts svīšana, ilgstošs drudzis (temperatūra), svara zudums, ilgstoša caureja,
- Šādu slimību vai to kombināciju identificēšana: tuberkuloze, kandidoze, toksoplazmoze, bieži herpesvīrusu infekcijas recidīvi, mikoplazmu izraisīta pneimonija, legionella, pneimocystis pneimonija, Kapoši sarkoma.
Kad jāpārbauda HIV antivielas
- Plānota hospitalizācija, sagatavošanās operācijai: sazinieties ar slimnīcu.
- Grūtniecības plānošana: grūtniecības sagatavošanas programmā.
- Grūtniecība: vismaz trīs reizes grūtniecības laikā saskaņā ar dzemdniecības kalendāru.
- Ja ir infekcijas riska faktori - vismaz reizi gadā.
- Pieņemama infekcija: vidējais antivielu parādīšanās laiks asinīs ir 2 nedēļas no inficēšanās brīža, maksimālais laiks ir 6 mēneši. Parasti testus veic pēc 1, 3 un 6 mēnešiem.
- Ja ir sūdzības un tiek atklātas iepriekš uzskaitītās slimības: nekavējoties.
Kā pārbaudīties CIR laboratorijās?
Lai ietaupītu laiku, pasūtiet analīzi Interneta veikals! Maksājot par pasūtījumu tiešsaistē, jūs saņemat atlaidi 10% par visu veikto pasūtījumu!
Saistītie materiāli
Kad rezultāti ir nepieciešami ātri, apmeklējiet jebkuru CIR klīniku. Iegūstiet savus testa rezultātus vakarā.
Pirmsdzemdību skrīnings ir ne tikai augļa malformāciju attīstības riska novērtējums, bet arī grūtniecības komplikāciju risku novērtēšana - pēc iespējas īsākā laikā!
Uzmanību!Pozitīvu un apšaubāmu reakciju gadījumā rezultāta izsniegšanas termiņu var pagarināt līdz 10 darba dienām.
Antivielas pret HIV 1, 2 tipiem, antigēns p 24 - specifisku antivielu izpēte, kas organismā radušās, reaģējot uz cilvēka imūndeficīta vīrusa (HIV) 1, 2 veidu infekciju un cilvēka imūndeficīta vīrusa p 24 antigēnu.
HIV(cilvēka imūndeficīta vīruss) - retrovīrusu dzimtas vīruss (vīruss ar lēnu replikāciju), kas inficē cilvēka imūnsistēmas šūnas (CD4, T-palīgi) un izraisa gūto imūndeficīta sindromu.
Inkubācijas periods parasti ir 3-6 nedēļas. Retos gadījumos antivielas pret HIV sāk atklāt tikai vairākus mēnešus vai ilgāk pēc inficēšanās. Viņu koncentrācijas līmenis var ievērojami samazināties slimības terminālajā periodā. Retos gadījumos antivielas pret HIV infekciju var pazust uz ilgu laiku.
Antigēns p 24 HIV 1,2 asins serumā konstatētais tips norāda uz slimības agrīnu stadiju. Pirmajās nedēļās pēc inficēšanās vīrusa un p24 antigēna daudzums asinīs strauji palielinās. Tiklīdz sāk ražot antivielas pret HIV 1, 2, p24 antigēna līmenis sāk samazināties.
P 24 antigēna noteikšana ļauj diagnosticēt HIV infekciju agrīnās infekcijas stadijās, pirms antivielu veidošanās.
Vienlaicīga antivielu noteikšana pret HIV-1,2 vīrusu un p-24 vīrusa antigēnu palielina pētījuma diagnostisko vērtību.
Šis tests nosaka antivielas pret HIV-1,2, kā arī HIV-1,2 antigēnu p24. Analīze ļauj diagnosticēt HIV infekciju agrīnā stadijā.
Infekcijas pārnešanas veidi:
- seksuāla;
- ar asins pārliešanu;
- no inficētas mātes līdz jaundzimušajam.
HIV infekcija - ilgstoša un nopietna slimība, ko papildina cilvēka imūnsistēmas šūnu bojājumi; pret to vēl nav izstrādātas efektīvas ārstēšanas metodes un īpašas profilakses līdzekļi (vakcīnas).
Imūndeficīta vīrusa avots ir cilvēki. Cilvēka vīrusu var izolēt no spermas, dzemdes kakla izdalījumiem, limfocītiem, asins plazmas, cerebrospinālajā šķidrumā, asarās, siekalās, urīnā un mātes pienā, taču vīrusa koncentrācija tajos ir atšķirīga. Visaugstākā vīrusa koncentrācija ir atrodama šādos bioloģiskos barotnēs: spermā, asinīs, dzemdes kakla sekrēcijās.
Ir ierobežoti veidi, kā vīrusu var pārnest no inficētas personas uz neinficētu personu.
HIV izplatības ceļi
Ir trīs imūndeficīta vīrusa pārnešanas veidi:
- Visbiežāk notiek seksuālais ceļš. Infekcija notiek neaizsargāta seksuāla kontakta laikā, kamēr vīruss nonāk organismā caur gļotādām. Brūces uz gļotādas, čūlas, iekaisums - palielina infekcijas iespējamību. Personām ar seksuāli transmisīvām infekcijām inficēšanās risks, saskaroties ar inficētu personu, ir 2–5 reizes lielāks. Vīrusa pārnešanai ir svarīga ne tikai kontakta tuvības pakāpe, bet arī patogēna daudzums. Neaizsargāta dzimumakta laikā sieviete ir aptuveni trīs reizes biežāk inficēta ar vīrieti, jo viņas ķermenī nonāk lielāks vīrusa daudzums, un sievietei ir ievērojami lielāks virsmas laukums, caur kuru vīruss var iekļūt ķermenī (maksts gļotādā). Infekcijas risks ir vislielākais ar anālo dzimumaktu un vismazāk ar orālo dzimumaktu.
- Saskare ar inficētas personas asinīm: a) lietojot kopīgas adatas, šļirces, traukus zāļu pagatavošanai, nesterilus medicīnas instrumentus; b) tādu zāļu ieviešana, kuru pagatavošanā tiek izmantotas asinis; c) inficēto donoru asiņu un no tām izgatavoto preparātu lietošana, pārliešana (risks ir ārkārtīgi mazs, jo visi donori, kā arī asinis tiek rūpīgi pārbaudīti).
- No HIV inficētas mātes (vertikāls ceļš) līdz auglim grūtniecības laikā, caur dzemdību kanālu un barojot bērnu ar krūti.
AIDS - HIV infekcijas galīgā stadija
AIDS neattīstās uzreiz. Lielākajai daļai cilvēku ar imūndeficīta vīrusa antivielām AIDS klīniskās pazīmes var neparādīties no 2 līdz 10 gadiem vai vairāk, un ar veiksmīgu ārstēšanu šis periods ir ievērojami palielinājies. Tas notiek tāpēc, ka ir nepieciešams ilgs laiks, līdz CD4 T šūnu skaits samazinās līdz līmenim, kad imūnsistēma ir novājināta.
Vīruss inficē arī cita veida šūnas, ieskaitot centrālās nervu sistēmas šūnas un sarkano un balto asiņu šūnas, kurās vīruss, šķiet, atrodas ilgu laiku “neaktīvā” stāvoklī, pirms tas sāk aktīvi vairoties. Faktori, kas ietekmē slimības progresēšanu, ir dažādi: ģenētiskās īpašības, vīrusa celms, pacienta psiholoģiskais stāvoklis, dzīves apstākļi un citi.
Slimības gaita un posmu ilgums ir atkarīgs arī no tā, vai persona ārstējas, un, ja jā, kādas zāles.
4 HIV infekcijas posmi
- Inkubācijas periods ("loga periods") ir laiks no inficēšanās brīža līdz antivielu (imūnsistēmas aizsargājošo olbaltumvielu) parādīšanās cilvēka asinīs. Šajā periodā infekcija nekādā veidā neizpaužas, visi testi ir negatīvi, bet persona jau ir lipīga. Inkubācijas periods var ilgt līdz 3 mēnešiem (vidēji 25 dienas).
- Primāro izpausmju stadija. Tas ilgst vidēji 2-3 nedēļas, un to raksturo straujš vīrusa daudzuma palielināšanās asinīs. Šo stāvokli sauc par "serokonversijas slimību", jo šajā laikā asinīs parādās antivielas pret vīrusu tādā daudzumā, lai to varētu noteikt testu laikā. Šis periods lielākajai daļai cilvēku neizpaužas, bet 20–30% var rasties gripai līdzīgas parādības: drudzis, limfmezglu pietūkums, galvassāpes, kakla sāpes, savārgums, nogurums un muskuļu sāpes. Šis stāvoklis izzūd pēc 2-4 nedēļām bez jebkādas ārstēšanas.
- Asimptomātisks periods. Tas notiek pēc infekcijas primāro izpausmju beigām un vidēji ilgst līdz 10 gadiem, ja to neārstē. Šajā periodā imūnsistēma cīnās ar vīrusu cilvēka ķermenī: vīrusu daļiņu skaits pakāpeniski palielinās un imunitāte samazinās. Šīs stadijas beigās inficētajām personām parādās palielināti limfmezgli, svīšana naktī, vispārējs savārgums un parādās pirmās oportūnistisko infekciju izpausmes, kas rodas cilvēkiem, spēcīgi vājinot imūnsistēmu. Šīs infekcijas izraisa mikroorganismi, kas mūs ieskauj un neizraisa infekcijas veseliem cilvēkiem. Vājināta imūnsistēma var izraisīt arī citu slimību, piemēram, vēža, attīstību.
- AIDS ir pēdējais šīs slimības posms, un to raksturo vairāku slimību parādīšanās ķermeņa imūnsistēmas pavājināšanās dēļ. Parasti pacientiem ir ļoti zems CD4 T skaits; viena vai vairākas smagas oportūnistiskas infekcijas (pneimocystis pneimonija, smaga sēnīšu infekcija, tuberkuloze utt.), kas bez nāves izraisa nāvi; onkoloģiskās slimības; encefalopātija (smadzeņu bojājumi, ko papildina demences attīstība).
HIV infekcijas diagnosticēšana ir sarežģīts process, kura pamatā ir laboratorijas, klīniskās un epidemioloģiskās izmeklēšanas dati, un laboratorijas asins analīzēm ir galvenā loma diagnozes noteikšanā.
Galvenā laboratorijas diagnostikas metode ir antivielu noteikšana pret vīrusu, izmantojot enzīmu imūnanalīzi.
Cilvēka imūndeficīta vīrusa antigēnu un šī vīrusa antivielu klātbūtnes laboratorisko testu veikšanas kārtību stingri reglamentē Krievijas Federācijas Veselības ministrijas rīkojumi, un tā ietver:
- skrīninga (atlases) pētījuma posms ar lietošanai apstiprinātām enzīmu imūnanalīzes (ELISA) metodēm;
- verifikācijas (apstiprinošo) pētījumu posms ar imūnblota metodi pilsētas AIDS centra laboratorijā.
Laboratoriskai imūndeficīta vīrusa klātbūtnes diagnostikai bērniem, kas dzimuši mātēm, kuras inficējušās ar šo vīrusu, ir savas īpatnības. Mātes antivielas pret vīrusu (Ig G klase) var cirkulēt bērnu asinīs līdz 15 mēnešiem no dzimšanas. Antivielu trūkums pret vīrusu jaundzimušajiem nenozīmē, ka tas nav iekļuvis placentas barjerā. Ar imūndeficīta vīrusu inficēto māšu bērni tiek pakļauti laboratorijas un diagnostikas pārbaudei 36 mēnešu laikā pēc piedzimšanas.
Kamēr nav iegūts pozitīvs rezultāts imūnblotā un negatīvs pētījuma rezultāts, persona tiek uzskatīta par veselīgu, un pret viņu netiek veikti pretepidēmijas pasākumi.
Imūndeficīta vīrusa antivielu testēšanas materiāls ir venozās asinis, kuras vēlams ziedot tukšā dūšā.
Protams, vīrusa klātbūtnes pārbaude ir brīvprātīga katra cilvēka lieta. Imūndeficīta vīrusa pārvadāšanas testus nevar noteikt piespiedu kārtā bez pacienta piekrišanas. Bet jums arī jāsaprot, ka, jo ātrāk tiek noteikta pareiza diagnoze, jo lielākas iespējas nodzīvot ilgu un piepildītu dzīvi, pat esot tā nesējam.
Indikācijas:
- pietūkuši limfmezgli vairāk nekā divās vietās;
- leikopēnija ar limfopēniju;
- nakts svīšana;
- asa svara zudums neskaidra iemesla dēļ;
- caureja, kas ilgst vairāk nekā trīs nedēļas un kuras cēlonis nav zināms;
- drudzis ar nezināmu cēloni;
- grūtniecības plānošana;
- pirmsoperācijas sagatavošana, hospitalizācija;
- šādu infekciju vai to kombināciju noteikšana: tuberkuloze, manifestēta toksoplazmoze, bieži atkārtota herpesvīrusu infekcija, iekšējo orgānu kandidoze, atkārtota herpes zoster neiralģija, ko izraisa mikoplazmas, pneimocistis vai legionellas pneimonija;
- kapoši sarkoma jaunībā;
- gadījuma dzimums.
Asinis ieteicams ziedot no rīta, no 8 līdz 12 stundām. Asinis tiek ņemtas tukšā dūšā vai pēc 4-6 stundām badošanās. Ir atļauts dzert ūdeni bez gāzes un cukura. Pārbaudes priekšvakarā jāizvairās no pārtikas pārslodzes.
HIV reģistrācijas noteikumi:
Pieteikumu reģistrēšana pētījumiem DNKOM tiek veikta, pamatojoties uz pasi vai dokumentu, kas to aizstāj (migrācijas karte, pagaidu reģistrācija dzīvesvietā, karavīra sertifikāts, pases biroja izziņa pases nozaudēšanas gadījumā, reģistrācijas karte no viesnīcas). Iesniegtajā dokumentā jābūt informācijai par pagaidu vai pastāvīgu reģistrāciju Krievijas Federācijas teritorijā un fotogrāfiju. Ja pases (dokumentu aizstājoša) nav, pacientam ir tiesības izsniegt anonīmu iesniegumu par biomateriāla piegādi. Veicot anonīmu pārbaudi, pieteikumam un no klienta saņemtajam biomateriāla paraugam tiek piešķirts numurs, kas zināms tikai pacientam un medicīnas personālam, kurš veicis pasūtījumu.
Anonīmi veikto pētījumu rezultātus nevar iesniegt hospitalizācijai, profesionālajām pārbaudēm un tie nav jāreģistrē ORUIB.
Rezultātu interpretēšana
HIV 1/2 antivielu tests ir labas kvalitātes. Ja nav antivielu, atbilde ir “negatīva”. Ja tiek atklātas antivielas pret HIV, pētījumu atkārto citā sērijā. Ja enzīma imūnanalīzē atkārtojas pozitīvs rezultāts, paraugs tiek nosūtīts pētījumiem ar apstiprinošu imūnblota metodi, kas ir "zelta standarts" HIV diagnostikā.
Pozitīvs rezultāts:
- HIV infekcija;
- kļūdaini pozitīvs rezultāts, kas prasa atkārtotus vai papildu pētījumus *;
- pētījums nav informatīvs bērniem līdz 18 mēnešu vecumam, kuri dzimuši ar HIV inficētām mātēm.
Negatīvs rezultāts:
- nav inficēti (tika ievēroti analīzes diagnostiskie nosacījumi);
- infekcijas seronegatīvā gaita (antivielas tiek ražotas vēlu);
- beigu stadija AIDS (tiek traucēta antivielu veidošanās pret HIV);
- pētījums nav informatīvs (nav ievēroti diagnostikas nosacījumi).